原发性肝癌患者血清代谢产物初步研究

目的:分析原发性肝癌(PHC)患者血清中小分子代谢产物的改变,为早期诊断和治疗原发性肝癌提供依据。方法:收集52例原发性肝癌(实验组)和同期17例正常体健者(对照组)血清,Bruker 600核磁共振检测两组血清中小分子代谢产物,通过主成分分析法比较两组受检者血清中代谢产物含量的差别情况。结果:与对照组比较实验组血清中α-葡萄糖、β-葡萄糖、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、糖蛋白、乳酸盐、异丁酸盐、丙氨酸、精氨酸、赖氨酸及肌酸等含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:质子核磁共振代谢组学技术可以无创而有效地识别肝癌患者血清代谢变化,有望成早期诊断原发性肝癌的一种新的方法。

TRIM31沉默抑制胰腺癌侵袭和迁移

目的:探讨三结构域蛋白31(TRIM31)对胰腺癌侵袭转移的影响及其机制。方法:利用基因表达数据库(GEO)获得TRIM31在胰腺癌组织、癌旁组织以及正常胰腺组织中的表达,选取两株胰腺癌细胞Panc-1及MIAPa Ca-2分别分为TRIM31沉默组(实验组)和空载体组(阴性对照组),通过Transwell小室细胞迁移和划痕实验观察TRIM31对胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响,Western blot实验检测上皮-间充质细胞转化(EMT)相关钙黏附蛋白E(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平。结果:正常胰腺组织中TRIM31 mRNA相对表达量明显低于胰腺癌组织,癌旁组织中TRIM31 mRNA相对表达量明显低于癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);小室细胞迁移和侵袭实验显示,实验组Panc-1及MIA Pa Ca-2迁移和侵袭细胞数明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);沉默TRIM31表达后,Panc-1及MIAPa Ca-2细胞中E-cadherin蛋白表达量明显升高,Vimentin蛋白表达量明显降低。结论:沉默TRIM31的表达可能通过抑制胰腺癌细胞的EMT过程,进而抑制其侵袭迁移。

缺氧下HIF-1α对胰腺癌细胞“干性”的影响及机制

目的:通过构建人胰腺癌PANC-1、As PC细胞缺氧模型、检测缺氧对胰腺癌细胞"干性"及生物学恶性行为的影响。方法:在缺氧培养箱中构建人胰腺癌PANC-1、As PC细胞缺氧模型,通过Western Blot检测胰腺癌细胞中缺氧诱导因子(HIF-la)表达情况;通过悬浮培养成球实验检测肿瘤细胞成球生长能力,流式细胞术检测胰腺癌细胞表面CD133阳性率,PCR和Western blot实验检测常氧和缺氧培养下干性相关基因(BMI-1、OCT4A、Nanog、SOX2)在mRNA以及蛋白水平的表达差异,免疫荧光观察CD133的表达量以及其定位变化。结果:随着缺氧时间的延长,HIF-1a、CD133表达逐渐上升,在16 h时HIF-1a表达处于高峰;缺氧时间超过16 h后,随着HIF-1a表达降低,CD133表达也降低,同时缺氧胰腺癌细胞悬浮成球能力增强,CD133+细胞比例增多,干性标记物mRNA表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05);缺氧培养下胰腺癌表面标记CD133阳性率显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05);在缺氧条件下,下调HIF-1α后,BMI-1、OCT4A、Nanog、SOX2表达显著下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:缺氧可诱导胰腺癌细胞"干性"维持或增强,在缺氧条件下HIF-lα对胰腺癌细胞"干性"调节有着重要作用。

海南农垦疟疾监测措施及防治效果分析

目的总结近10年来海南农垦疟疾监测措施的现状及其防治效果，为进一步完善疟疾防治对策提供依据。方法运用回顾性调查方法，收集1996～2005年垦区疟疾监测资料进行统计和分析，评价疟疾防治效果。结果近10年来海南农垦疟疾发病率总体呈下降趋势，平均每年病例递减9．97％。全垦区共监测本地常住人口发热病人474589人次，流动人口发热病人106319人次，平均血栓阳性率分别为1．10％和3．57％，流动人口血栓疟疾感染相对危险度（RR）为本地常住人口的3．25倍；每年监测均发现主要传疟媒介是大劣按蚊和微小按蚊；每年4，10月为疟疾高发季节，发病高峰出现在6—8月；现症病人和疟史抗复发治疗率及人群预防服药率分别为95．63％、88．52％和90．16％。结论采取以发热病人血检的病原学监测、主要传疟媒介监测、现症病人根治和流动人口管理的综合监测措施是行之有效的，防治效果是明显的。

过表达microRNA-137对体外人胰腺癌细胞增殖能力的影响

目的:过表达microRNA-137(miR-137)对体外人胰腺癌增殖能力的影响及其机制初探。方法:将胰腺癌PANC-1和As PC细胞分为miR-137 mimics转染组和对照组,并通过qRT-RCR检测转染效率;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率和周期阻滞变化,CCK-8实验、平板克隆实验检测miR-137对胰腺癌细胞增殖能力的影响,qRT-RCR、Western blot等实验检测miR-137对PTN的mRNA及蛋白表达的影响。结果:上调miR-137表达后,PANC-1、As PC胰腺癌细胞凋亡率增加(P<0.05)、周期阻滞于G1期比例增加(P<0.05);CCK8及平板克隆实验结果均显示过表达miR-137后,胰腺癌细胞增殖能力降低PTN表达显著下调。结论:miR-137在胰腺癌细胞中的表达水平影响抑制胰腺癌的增殖能力,其机制可能与抑制PTN的表达有关。

长链非编码RNA ITGβ2-AS1对胰腺癌细胞增殖和侵袭及迁移能力的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)整合素β2(ITGβ2)-AS1在体外对人胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及其机制。方法:采用癌症基因组图谱(TCGA)公共数据库分析ITGβ2-AS1在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达,通过qPCR实验检测ITGβ2-AS1分别在人正常胰腺导管上皮细胞及人PC细胞株AsPC-1、CFPAC-1、PANC-1、MIAPaCa-2、Capan-2、BxPC-3、Hs766T及SW1990细胞中的表达,利用慢病毒载体稳定转染ITGβ2-AS1最高的表达细胞,采用CCK-8和平板克隆实验检测ITGβ2-AS1对PANC-1细胞增殖能力的影响;通过细胞划痕及Transwell实验检测ITGβ2-AS1对PANC-1细胞侵袭及迁移能力的影响,qPCR及Westernblot实验检测干扰ITGβ2-AS1后PANC-1细胞中ITGβ2的基因表达情况。结果:ITGβ2-AS1在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织,且在各胰腺癌细胞株中的表达显著高于人正常胰腺导管上皮细胞,PANC-1中表达最高,差异有统计学意义(P<0.05);干扰ITGβ2-AS1后,PANC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著降低,ITGβ2的表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LncRNAITGβ2-AS1在胰腺癌中高表达,干扰其表达可抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力和抑制ITGβ2的转录及翻译过程。

长链非编码RNA ITGβ2-AS1对胰腺癌MAPK信号通路的作用及机制

目的:探讨长链非编码RNA整合素β2(ITGβ2)-AS1在胰腺癌(PC)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用及机制。方法:选择癌症基因组图谱(TCGA)中胰腺导管腺癌数据库PAAD的mRNA表达谱类型,根据TCGA数据库分析结果,选取与ITGβ2-AS1相关的基因中相关系数较大(Person系数>0.6)的基因进行GO富集分析,筛选出与ITGβ2-AS1的表达显著相关的基因及信号通路;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Westernblot验证人PC细胞株PANC-1中相关mRNA及蛋白的表达。结果:GO分析显示,ITGβ2-AS1与PC的增殖及相关肿瘤信号通路转导密切相关;qRT-PCR及Westernblot结果显示,与正常PANC-1细胞比较,干扰ITGβ2-AS1后,PANC-1细胞中BCL2、MMP9、MYC及磷酸化的ERK1/2的mRNA及蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:ITGβ2-AS1可能通过正向调控MAPK信号通路上靶基因的表达,促进PC细胞的增殖、侵袭及迁移。

海南农垦系统流动人口疟疾发病规律的探讨

改革开放以来,大量易感人群出入疟区,疟疾局部暴发流行的报告时有所见[1].作者于1991～2000年对海南农垦系统流动人口疟疾疫情进行了监测,报告如下.

microRNA-125b对胰腺癌侵袭转移的影响及其机制

目的:探讨miR-125b对胰腺癌细胞(PC)侵袭转移能力的影响及其机制。方法:构建miR-125b过表达载体(miR-125bMIMIC)及空白载体(miR-125bNC)并转染PC细胞系PANC-1细胞作为实验组及阴性对照组,设胰腺正常导管上皮细胞作为BC组;采用划痕实验及Transwell实验检测miR-125b对PC细胞侵袭能力的影响,采用激光共聚焦检测细胞骨架的改变、Westernblot检测上皮-间质细胞转化(EMT)相关蛋白钙黏附蛋白E(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的变化。结果:Transwell实验及细胞划痕实验结果显示,过表达miR-125b能显著抑制PANC-1细胞的侵袭转移能力,差异有统计学意义(P<0.05);激光共聚焦结果显示,过表达miR-125b后,PANC-1细胞骨架形态紊乱,细胞极性消失;Westernblot结果显示,过表达miR-125b后,PANC-1细胞EMT相关蛋白E-cadherin下调、Vimentin上调,细胞侵袭能力增强(P<0.05)。结论:miR-125b能显著抑制PC细胞侵袭转移能力,其机制可能与miR-125b抑制PC细胞EMT转换有关。

青藤碱对胰腺癌细胞系SW1990增殖及凋亡的影响

目的:探讨青藤碱(SIN)对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:胰腺癌SW1900细胞分为实验组和对照组,实验组设置SIN浓度梯度0.125、0.25、0.5、1.0及2.0 mmol/L组,对照组不作处理;CCK-8方法检测SIN对胰腺癌细胞SW1990增殖的影响,平板克隆实验检测SIN对胰腺癌SW1990细胞集落形成的影响,流式细胞术检测SIN对胰腺癌SW1990细胞凋亡的影响,Western blot检测SIN对胰腺癌SW1990细胞中PARP蛋白表达水平的影响。结果:SIN作用于SW1990细胞后,细胞增殖率随着SIN剂量增加而降低(P<0.05),细胞集落形成数量逐渐减少(P<0.05),细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05);相同浓度SIN时,随着作用时间延长,其对SW1990细胞增殖的抑制作用逐渐增强(P<0.05);Western blot结果显示胰腺癌SW1990细胞PARP蛋白表达水平逐渐随着SIN剂量增加而减少(P<0.05)。结论:青藤碱能有效抑制胰腺癌SW1990细胞的增殖,其机制可能与诱导SW1990细胞凋亡有关。

芍药苷对人胰腺癌Panc-1细胞系增殖和凋亡的影响

目的:探究芍药苷(PF)对人胰腺癌Panc-1细胞增殖及凋亡的影响。方法:将人胰腺癌Panc-1细胞分为对照组(0μmol/L PF)和12.5、50、200及800μmol/L PF组,用细胞增殖实验(CCK8)和平板克隆实验检测PF对人胰腺癌Panc-1细胞增殖的影响,用Annexin V-FITC/PI双染试剂染色实验检测人胰腺癌Panc-1细胞凋亡,免疫印迹实验检测PF对人胰腺癌Panc-1细胞Caspase-3及Bcl-2蛋白表达水平的影响。结果:CCK8实验显示Panc-1细胞增殖能力随药物浓度的增加而减少(P<0.05),平板克隆实验显示细胞集落数量随药物浓度的增加而减少(P<0.05),Annexin V-FITC/PI双染试剂染色实验显示细胞凋亡发生率随药物浓度的增加而增加(P<0.05);Western blot实验结果显示Caspase-3、Cleave caspase3的表达量随PF浓度的增加而增加(P<0.05),Bcl-2与其相反。结论:PF可以抑制人胰腺癌Panc-1细胞的增殖、促进其凋亡,其机制可能是激活了Caspase途径。

microRNA-100对胰腺癌细胞侵袭和转移能力的影响及机制

目的:探讨miR-100对胰腺癌细胞在体外侵袭和迁徙能力的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶连反应(qRT-PCR)检测miR-100在6株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达,选取表达差异较明显的PANC-1和MIA PaCa-2细胞系进行后续实验;针对miR-100设计miR-100 mimic和空载体(NC),并转染上述两株细胞系中,用PCR检测转染效率;Transwell实验及划痕实验检测miR-100对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响,免疫荧光检测miR-100对胰腺癌细胞骨架的影响,Western blot检测转染细胞后FZD-8的表达。结果:PCR实验显示miR-100在胰腺癌细胞系中低表达,在正常胰腺上皮细胞系中高表达,所设计的miR-100 mimic可以有效地升高PANC-1和MIA PaCa-2细胞系中miR-100的表达;Transwell实验及划痕实验显示转染miR-100之后,能有效的抑制胰腺癌细胞的侵袭及迁移能力(P<0.05);免疫荧光显示转染miR-100后,F-肌动蛋白(F-actin)减少;Western blot结果显示,转染miR-100后,FZD-8的表达减少,胰腺癌细胞的侵袭转移能力明显降低。结论:上调miR-100后,胰腺癌细胞可能通过下调FZD-8的表达来抑制其侵袭转移的能力,提示miR-100有望成为胰腺癌治疗的潜在靶点。

青藤碱对人胰腺癌细胞系PANC-1侵袭转移的影响

目的:体外实验探讨青藤碱对胰腺癌细胞PANC-1侵袭和迁移能力的影响。方法:用高糖培养基DMEM培养胰腺癌PANC-1细胞,取对数期生长的细胞,实验组用0.5、1.0 mmol/L青藤碱处理,运用侵袭和迁移实验研究青藤碱对胰腺癌侵袭转移的影响,采用激光共聚焦实验观察青藤碱对细胞骨架的改变,免疫印迹技术检测青藤碱对胰腺癌细胞PANC-1 E-钙粘着蛋白Nimentin和波形蛋白(E-cadherin)表达水平的改变。结果:实验组PANC-1细胞穿过铺有Matrigel胶小室的细胞数量显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验表明,青藤碱处理24 h和48 h的胰腺癌细胞迁移速度明显小于对照组(P<0.05);激光共聚焦显示,实验组PANC-1细胞内绿色荧光染色的F-actin与对照组比较显著减少,且荧光强度也较弱(P<0.05);β-微管蛋白(β-tubulin)红色荧光强度明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05);免疫印迹结果显示,实验组Vimentin逐渐减少,E-cadherin逐渐增多,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的青藤碱可抑制体外胰腺癌PANC-1细胞的侵袭和转移能力。

夹边毒土防治小象鼻虫

甘薯是我市的主要粮食作物之一,近年来,由于甘薯小象鼻虫的猖獗为害,一般损失率20—30％,高的达50—90％。夏秋季节正是小象虫活跃为害的时段,又处于薯块形成膨大时期,受害损失大,正是施药保产的关键。甘薯夹边毒Ⅰ防治技术以甘薯块根膨大形成期为施药的最佳时期,每亩用3％呋喃丹颗粒剂1—

外墙外保温施工技术及质量控制

本文介绍了厦门祥店刘厝旧村改造F地块项目外墙外保温工程的施工技术和质量控制。本工程外墙外保温工程采用上海亮迪化工有限公司生产的XPS保温涂料饰面系统。

外墙外保温施工技术及质量控制

本文介绍了厦门祥店刘厝旧村改造F地块项目外墙外保温工程的施工技术和质量控制,本工程外墙外保温工程采用上海亮迪化工有限公司生产的XPS保温涂料饰面系统。

化州市蔬菜主要病虫害发生特点与防控技术

在多年调查的基础上,分析了广东省化州市露地蔬菜主要病虫害的发生特点及其发生原因,提出了以农业防治、生物防治、物理防治为主,选用高效、低毒、低残留的环境友好型药剂为辅的病虫害绿色防控技术措施,旨在提高化州市蔬菜病虫害的科学防控水平。

缺氧诱导因子-3α调控长链非编码RNA促进胰腺癌细胞侵袭转移的研究

缺氧诱导因子(HIFs)是应答肿瘤组织微环境氧气浓度降低的关键转录因子,可对多种基因及信号通路进行转录调控[1]。长链非编码RNA(lncRNAs)在肿瘤的侵袭和转移过程中有着重要的生物学功能[2]。本研究旨在观察HIF-3α调控下游lncRNA对胰腺癌侵袭转移的影响。