跨胎盘RNA干扰在先天畸形模型鼠研究中的意义

目的应用跨胎盘RNA干扰技术抑制胚胎鼠骨形态发生蛋白4（BMP4）基因，为获取基因下调小鼠探索经济高效技术。方法构建发育相关基因BMP4下调质粒后通过尾静脉向孕鼠注射Ringer’s液、pSES质粒、pSESSiBMP4质粒。部分孕鼠注射48h后取出胚胎观测胚胎发育变化，并应用RT—PCR及Westernblotting检测BMP4基因mRNA和蛋白质；部分孕鼠自然分娩后研究子代鼠生长发育变化。结果在mRNA水平，pSES-SiBMP4组胚胎BMP4基因较Ringer’S组、pSES绢分别下调（29．4±5．0）％，（42．2±9．2）％（P％0．05）；在蛋白质水平，pSES-SiBMP4组胚胎BMP4基因较Ringer’S组、pSES组分别下调（27．0±6．4）％、（31．1±5．8）％（P〈0．05）。pSES-SiBMP4组胚胎鼠头部、胃肠道及脊柱发育异常。新生子代鼠中pSES-SiBMP4组出现癫痫，肠息肉，先天性巨结肠。结论胚胎鼠早期跨胎盘RNA干扰现实可行，跨胎盘SiBMP4可下调子代鼠基因。该方法叮用来研究基闪功能，构建先天性巨结肠，诱导肠息肉形成。