腹腔镜全子宫切除术中手术室护理配合路径的效果及并发症发生率分析

目的:评估腹腔镜全子宫切除术患者实施手术室护理配合路径的效果及并发症发生率。方法:选取2022年11月~2023年06月汕头大学医学院附属医院肿瘤医院外二科所78例腹腔镜全子宫切除术患者,随机均分为试验组和常规组。常规组运用常规护理,试验组患者选择手术室护理配合路径,比较两组的手术相关指标、并发症及护理满意度情况。结果:(1)试验组患者出血量较低,手术时长、麻醉苏醒时间、拔管时间、住院时长较短,术毕体温指标高于常规组,差异显著(P<0.05)。(2)试验组患者恶心、呕吐、腹胀、头晕等并发症发生率(7.69%)低于常规组(28.21%),差异显著(P<0.05)。(3)试验组患者护理满意度(94.87%)明显高于常规组(76.92%),差异显著(P<0.05)。结论:腹腔镜全子宫切除术患者行手术室护理配合路径,效果显著,能够缩短患者的恢复时间,患者并发症发生率较低,并可提升患者的护理满意度水平。

手术室护理配合对腹腔镜卵巢肿瘤剔除术患者手术时间及并发症的影响

目的:评估腹腔镜卵巢肿瘤剔除术患者实施手术室护理配合对手术时间及并发症的影响。方法:选取2022年12月~2023年08月我院收治的70例腹腔镜卵巢肿瘤剔除术患者,随机数字表法均分为两组,常规组运用常规护理,试验组患者选择手术室护理配合,针对试验组与常规组的手术相关指标、并发症及护理满意度情况实施组间对照。结果:(1)试验组腹腔镜卵巢肿瘤剔除术患者出血量、疼痛感评分较低,手术时长、自主呼吸恢复时间、睁眼时间、指令恢复时间、拔管时间、住院时长短于常规组患者,组间差异显著(P<0.05)。(2)试验组患者寒颤、恶心、低体温、呛咳等并发症发生率(8.57%)低于常规组患者(31.43%),组间差异显著(P<0.05)。(3)试验组患者护理满意度(94.29%)明显高于常规组患者(74.29%),组间差异显著(P<0.05)。结论:腹腔镜卵巢肿瘤剔除术患者实施手术室护理配合,效果确切,能够缩短患者的恢复时间,降低其并发症发生率,患者的疼痛感水平得以下降。

腹腔镜结直肠癌根治术的手术室护理配合效果及并发症发生率分析

目的:评估腹腔镜结直肠癌根治术患者实施手术室护理配合的效果及并发症发生率。方法:选取2022年01月~2023年05月期间我院的76例腹腔镜结直肠癌根治术患者,按照抽签法均分为试验组和常规组。常规组运用常规护理,试验组配合手术室护理,比较两组的临床指标、护理前后应激指标、并发症情况。结果:(1)试验组手术时长、肠鸣音恢复时间、首次下床时间、住院时长短于常规组患者,差异显著(P<0.05)。(2)护理前,两组应激指标对比,差异不显著(P>0.05);护理后,试验组收缩压、舒张压、心率低于常规组患者,差异显著(P<0.05)。(3)试验组感染、输尿管损伤、肠梗阻、吻合口瘘等并发症发生率(7.89%)明显低于常规组(28.95%),差异显著(P<0.05)。结论:腹腔镜结直肠癌根治术患者配合手术室护理,效果确切,可提升患者术后恢复速度,患者术中体征平稳,并发症发生率较低。

姜黄素衍生物T63提高MCF-7/DOX细胞株对多柔比星敏感性的研究

目的:以人乳腺癌细胞MCF-7和耐多柔比星(doxorubicin,DOX)的人乳腺癌细胞MCF-7/DOX为研究对象,观察新型多芳烯姜黄素衍生物T63对这两株细胞系的影响,探讨T63能否逆转MCF-7/DOX细胞对多柔比星(DOX)的耐药性。方法:用MTT法检测T63的细胞毒性,同时检测T63对细胞株MCF-7/DOX药物敏感性的影响。用流式细胞术PI单染法分析T63或T63联合DOX对细胞周期的影响,观察细胞凋亡情况。用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。用Real-time PCR法检测相关基因的转录情况。结果:T63能够有效抑制MCF-7和MCF-7/DOX的增殖,且药效强于姜黄素,而T63对MCF-7和MCF-7/DOX的抑制增殖的效应差异不大。使用非细胞毒性剂量(0.75μmol/L)的T63能有效提高MCF-7/DOX对多柔比星的敏感性。PI单染法显示单独使用T63或者非细胞毒性剂量T63与多柔比星联合使用均能促进细胞凋亡。Western blot结果显示T63能够上调p53、p21、p27、Bim、Bax的表达,下调Bcl-2的表达。Real-time PCR结果表明T63对p53无显著影响。结论:T63可通过促进细胞凋亡的方式逆转MCF-7/DOX对多柔比星的耐药性,从而提示其可能具有临床应用价值,其具体分子机制有待进一步研究。

FOXO3a反馈上调人表皮生长因子受体3表达介导HER2^+乳腺癌细胞酪氨酸激酶抑制剂治疗耐受

近年来,酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKI)类药物治疗HER2+乳腺癌进展迅速,但出现治疗耐受仍是迫切需要解决的问题。本研究采用TKI(AEE788、Lapatinib)处理HER2+乳腺癌细胞BT474和SKBR3,发现HER3在mRNA和蛋白质水平上的表达均上调。MTS及克隆形成实验结果显示,siRNA干扰HER3的表达能够显著抑制BT474、SKBR3细胞的增殖,表明干扰HER3可增强细胞对TKI的敏感性。为进一步考察TKI促进HER3表达的可能机制,Western印迹及免疫荧光检测发现,AEE788、Lapatinib能够上调FOXO3a的表达且促进其入核。干扰FOXO3a可逆转TKI对HER3的诱导作用,说明TKI通过激活FOXO3a上调HER3的表达。综上所述,FOXO3a反馈上调HER3表达介导HER2+乳腺癌细胞TKI治疗耐受。这一研究发现,为临床解决TKI治疗耐受提供一定的理论基础。

干扰FOXC1逆转非小细胞肺癌吉非替尼耐药的作用

背景与目的肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌的80%。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)靶向治疗已成为NSCLC临床治疗的主要手段,然而不可避免的耐药性出现极大限制了EGFR-TKI的治疗效果。叉头框蛋白C1(forkhead box protein C1,FOXC1)是叉头框蛋白家族重要成员,在NSCLC异常表达并参与调控NSCLC进展。本研究旨在探讨干扰FOXC1对NSCLC吉非替尼耐药的影响及可能机制。方法应用Western blot、免疫组化方法检测FOXC1在NSCLC吉非替尼耐药细胞和组织中的表达情况;应用FOXC1 shRNA转染HCC827/GR细胞,筛选稳定干扰FOXC1的HCC827/GR细胞,采用新型四氮唑盐比色法(Methyl-thiazolyldiphenyl-sulfophenyl-tetrazolium bromide assay,MTS)法、流式细胞术及微球体形成实验检测细胞增殖、细胞凋亡及细胞自我更新能力;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、Western blot检测干性标志物SOX2、Nanog、OCT4和CD133的表达水平;运用流式细胞术检测CD133的表达情况;免疫组化检测耐药组织中SOX2和CD133的表达情况;基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库的肺腺癌数据集,分析FOXC1、SOX2和CD133表达的相关性。结果FOXC1在NSCLC吉非替尼耐药细胞HCC827/GR的表达水平显著高于HCC827敏感细胞(P<0.05),免疫组化结果显示FOXC1在NSCLC吉非替尼耐药组织中高表达。与对照组相比,稳定干扰FOXC1的HCC827/GR细胞对吉非替尼的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)值显著降低(P<0.01),细胞增殖能力降低、凋亡率升高(P<0.05)。干扰FOXC1能够抑制SOX2、CD133的表达,并减弱HCC827/GR耐药细胞的微球体形成能力。免疫组化结果显示,吉非替尼耐药组织中SOX2和CD133表达显著高于敏感组织(P<0.01)。相关性分析结果显示,FOXC1、SOX2和CD133表达两两呈正相关(P<0.05)。结论FOXC1参与NSCLC吉非替尼耐药,其机制可能与FOXC1调控肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)特性有关。

靶向p21蛋白激活激酶2逆转非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药

靶向突变的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中显示出越来越重要的作用。然而,不可避免的耐药性的出现极大限制了TKI的临床治疗效果。p21蛋白激活激酶2(p21-activated protein kinase 2,PAK2)是丝/苏氨酸激酶家族的重要成员,在肿瘤发生与发展中发挥重要的作用。本研究拟探讨靶向抑制PAK2逆转非小细胞肺癌吉非替尼耐药的作用及可能机制。首先Western印迹检测发现,相比非小细胞肺癌吉非替尼敏感细胞HCC827,耐药细胞HCC827/GR中PAK2的蛋白质磷酸化水平显著上调(P<0.01),而PAK2总蛋白质水平未见明显变化。采用PAK2抑制剂FRAX597和G5555诱导HCC827/GR细胞,MTS及克隆形成结果显示,抑制剂FRAX597和G5555均能显著增加HCC827/GR细胞对吉非替尼的敏感性(P<0.01)。流式细胞术分析发现,抑制剂FRAX597处理诱导HCC827/GR细胞发生G2/M期阻滞,并增加吉非替尼诱导的HCC827/GR细胞的凋亡以及切割胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)表达(P<0.01)。最后,Western印迹结果显示,抑制剂FRAX597处理能够抑制HCC827/GR细胞BCL-2和CDK4蛋白质表达(P<0.05),上调BAX、p21和p27蛋白质表达(P<0.05)。综上所述,PAK2活化与非小细胞肺癌吉非替尼耐药性密切相关;靶向抑制PAK2活化能够诱导细胞周期阻滞及凋亡,从而提高非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性。

组蛋白甲基转移酶WHSC1对三阴性乳腺癌增殖的作用研究

目的:探究组蛋白甲基转移酶WHSC1对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法:在癌症基因组图谱(TCGA)中分析WHSC1在人乳腺癌组织中的表达情况。采用人TNBC细胞MDA-MB-231及BT549构建稳定过表达WHSC1的细胞株,利用MTS法、克隆形成实验检测WHSC1对TNBC细胞增殖的影响。将过表达WHSC1的MDA-MB-231细胞接种至裸鼠皮下后观察移植瘤的生长情况;接种细胞后第20天,剥离移植瘤组织并称重,绘制肿瘤生长曲线;应用免疫组化方法检测移植瘤组织中增殖标志物Ki-67的表达情况。进一步,Western blotting方法检测过表达WHSC1的TNBC细胞中增殖相关分子的表达情况。结果:通过TCGA数据库分析可见,WHSC1在TNBC组织中显著高表达(P<0.001);MTS及克隆形成实验结果显示,过表达WHSC1可增强TNBC细胞的增殖能力(P<0.01);裸鼠皮下成瘤模型实验发现过表达WHSC1可增强TNBC细胞在体内的增殖能力,且免疫组化验证增殖标志物Ki-67表达增多;Werstern blotting结果显示,过表达WHSC1的MDA-MB-231细胞中c-Myc和CDK4蛋白表达水平升高(P<0.01),p21蛋白表达减少(P<0.001)。结论:WHSC1在三阴性乳腺癌中高表达,WHSC1能够促进三阴性乳腺癌细胞的增殖。

miRNA-155在TGF-β1诱导的人前列腺癌细胞中的作用

目的:探讨miR-155在转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人前列腺癌细胞PC3中的生物学作用。方法:TGF-β1处理PC3细胞,相差倒置显微镜下观察细胞形态学变化;通过Transwell试验检测细胞的迁移能力;实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerasechain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测TGF-β1诱导的PC3细胞纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达情况;qRT-PCR检测miR-155的表达水平;干扰miR-155检测TGF-β1诱导的PC3细胞FN的表达及细胞迁移能力的变化。结果:TGF-β1诱导PC3细胞发生形态改变并增强其迁移能力,且FN的表达显著上调;TGF-β1诱导的miR-155表达呈现时间依赖性;干扰miR-155使TGF-β1诱导的FN表达减少,细胞形态及迁移能力在一定程度上发生逆转。结论:miR-155在TGF-β1诱导的前列腺癌细胞PC3中高表达,可能间接上调FN的表达从而促进细胞迁移,可为前列腺癌的治疗提供理论依据。

TGF-β1诱导人前列腺癌PC3细胞上皮间叶化的研究

上皮细胞间叶化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤侵袭转移密切相关,转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)已被证实为肿瘤EMT的主要诱导剂。该研究旨在探讨TGF-β1对人前列腺癌PC3细胞EMT发生的诱导作用。经TGF-β1处理的PC3细胞,在相差倒置显微镜下观察到细胞形态由上皮型向间叶型转化;细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移能力较对照组显著增强;Real-time PCR、Western blot和细胞免疫荧光验证TGF-β1能上调间叶型标记蛋白的表达及下调上皮型标志蛋白的表达。进一步发现,TGF-β1对转录因子Snail的表达没有明显的影响,但是能促进Snail的入核,干扰Snail能逆转TGF-β1对PC3细胞EMT发生的诱导作用。该研究表明,TGF-β1能够介导Snail的入核而激活Snail,促进前列腺癌PC3细胞的发生。

人源TNFα的原核表达及活性测定

目的:利用SUMO标签构建人TNFα原核表达载体,通过表达及纯化获得重组蛋白,为深入研究和利用人TNFα奠定基础。方法:利用PCR技术,从质粒pET32a-hTNFα中扩增出人TNFα成熟肽编码序列,并在其上游添加SUMO标签,与原核表达载体pET28a连接,构建表达质粒pET28a-SUMO-hTNFα。在BL21(DE3)工程菌中表达融合蛋白,经Ni-NTA纯化体系纯化,切除SUMO标签,纯化获得hTNFα成熟蛋白。CCK-8法检测TNFα对L929细胞的细胞毒性,以测定TNFα的生物学活性。结果:成功构建pET28a-SUMO-hTNFα原核表达质粒,酶切鉴定和测序分析与预期结果完全一致。在BL21(DE3)工程菌中实现了融合蛋白的可溶性表达。经纯化、水解酶切除标签及再次纯化获得hTNFα成熟肽。CCK-8法检测得所制备的TNFα蛋白ED50约为12.8μg/ml。结论:成功构建原核表达载体pET28a-SUMO-hTNFα,经表达、纯化、酶切及再纯化,获得有生物活性的hTNFα蛋白,为深入研究和利用hTNFα奠定基础。

利用TNF-α诱导建立结肠癌细胞HCT116体外侵袭模型

该研究利用TNF-α诱导建立肿瘤细胞体外侵袭模型,为进一步的研究提供基础。利用20 ng/mL TNF-α刺激结肠癌细胞HCT116 7 d后,使用流式细胞术检测HCT116细胞的CCR7和CXCR4受体表达量的变化,并利用Transwell小室检测TNF-α刺激对CCL21、SDF-1介导的细胞迁移与侵袭能力的影响。实验结果显示,20 ng/mL TNF-α刺激7 d后的HCT116细胞的CCR7和CXCR4表达量均显著增加,侵袭能力也增强,且使CCL21、SDF-1介导的细胞迁移与侵袭能力显著增强。结果说明了本实验利用TNF-α诱导HCT116细胞,成功建立了HCT116的体外侵袭模型,为接下来的研究提供了细胞模型基础,也为进一步的药物筛选提供了基础。

奥希替尼耐药非小细胞肺癌细胞系的建立及耐药机制的初步研究

目的建立非小细胞肺癌(NSCLC)第三代EGFR-TKI奥希替尼(Osimertinib)耐药细胞系并初步探讨其耐药机制。方法以人NSCLC细胞系H1975为研究对象,利用低浓度奥希替尼持续诱导筛选继发耐药细胞系。MTS法检测细胞奥希替尼药物敏感性。活细胞工作站检测细胞增殖能力。流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡。利用蛋白质谱检测数据构建亲代与耐药细胞的差异表达基因谱并通过qRT-PCR和Wester blot验证耐药相关基因。结果成功获得奥希替尼继发耐药H1975/OSI细胞。与亲代细胞相比,H1975/OSI细胞的耐药指数增加了27.25倍(P<0.01),细胞增殖能力降低但凋亡抗性增加(P=0.01)且未产生EGFR-TKI耐药常见相关基因的突变。同时建立起H1975与H1975/OSI细胞蛋白质差异表达谱,发现耐药细胞上调蛋白307个,下调蛋白295个,其中在H1975/OSI细胞中表达增加的成纤维细胞特异蛋白(FSP1)被干扰后,干扰细胞对奥希替尼的敏感性增加(IC50值下降3.51倍,P=0.02)。在亲代H1975细胞中过表达FSP1,奥希替尼对细胞的IC50值增加了3.75倍(P<0.01)。结论成功建立人NSCLC奥希替尼耐药细胞系H1975/OSI;成功构建H1975与H1975/OSI蛋白质差异表达谱;FSP1蛋白可能通过增加H1975/OSI的凋亡抗性介导奥希替尼耐药。

量子信道的凸优化重建技术

对于实际的量子信道,它可能包含一系列非幺正的操作,但是过去的研究基本都集中在幺正或近幺正的情况,对于非幺正过程的研究还是很少.本文借用经典人工智能技术中常用的凸优化方法,将量子过程层析构造成一个最小二乘的优化问题,并且能有效地缩小过程矩阵与实际实验结果之间的误差.作者首先选择了海水量子信道来测试该方法的可行性.对比经典的线性变换方法,该方法更准确地体现了海水量子信道的实际操作,并且能很好地保持量子过程的物理性.另外,作者在7个经典的量子门上进行了实验,分别对比了线性变换方法和范数优化的方法.对于线性变换,精度提高了1个量级;对于范数优化,减去了?参数的调优,精确度更高,鲁棒性更好.除此之外,作者还制备了非幺正的量子信道进行检验.对比以往常用的过程层析技术,在非幺正的情况,该方法依然能准确地还原量子过程,准确率达99.5%,进一步证明了其优越性.

miR-23b抑制三阴性乳腺癌增殖及迁移

目的探讨miR-23b对三阴性乳腺癌增殖、迁移的影响及可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR检测miR-23b在三阴性乳腺癌组织的表达情况;构建稳定表达miR-23b的三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231/miR-23b、BT549/miR-23b,采用细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验检测miR-23b对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-23b对叉头框C2(FOXC2)的靶向调控作用;实时荧光定量PCR与Western blot检测miR-23b对FOXC2基因表达水平的影响。结果 miR-23b在乳腺癌组织中下调表达,且在三阴性乳腺癌组织中表达显著低于非三阴性乳腺癌; miR-23b可抑制MDA-MB-231和BT549细胞的增殖和迁移;双荧光素酶实验证实miRNA-23b直接靶向FOXC2 3'-UTR,进而抑制FOXC2的mRNA和蛋白的表达。结论 miR-23b靶向调节FOXC2的表达抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖与迁移。