黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生

【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60~150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。

绿叶挥发物代谢调控及分子机理研究进展

植物处于复杂的自然环境中,常受到植食性昆虫、病原菌及机械损伤等生物或非生物的侵害并造成植物的局部伤害,从而启动复杂的防御反应。释放绿叶挥发物(green leaf volatiles,GLVs)是植物防御性反应之一。绿叶挥发物是植物不饱和脂肪酸经过Oxylinpins生化途径中的脂氧合酶(LOX)和脂氢过氧化物裂解酶(HPL)催化而形成的一类C6和C9醛、醇及其相应的酯类。作为启动植物防御机制的信号分子,这类挥发性物质通过长距离的气态传输在植物与病原菌、植物与植食性昆虫、植物自身和相邻的植物之间起作用,从而介导防御性反应。研究其生化途径及其调节机理,对探索其对病虫害的直接、间接防御、改善作物风味品质及抗病新种质创制起着非常重要的作用,且对园艺植物甚至农林生态系统中作物病虫害综合治理策略的制定具有重要的指导意义。该文综述了绿叶挥发物合成的生化途径及其作为信号转导物质的作用机制,并阐述了绿叶挥发物在植物抗逆方面的生理作用及其应用前景。

水肥供应水平及环境因子对番茄果实生长的影响

【目的】针对西北地区设施番茄栽培中出现的水肥施用过量及不适环境条件造成的产量和品质下降问题,探讨不同水肥供应水平下环境因子对番茄果实生长的影响,为设施番茄的精准管理奠定基础。【方法】试验采用随机区组实验,设置3个施肥水平F 1(N646-P 2O 5323-K 2O 403.75 kg/hm 2)、F 2(N300-P 2O 5150-K 2O 187.5 kg/hm 2)、F 3(N150-P 2O 575-K 2O 93.75 kg/hm 2)和3个灌水水平W 1(1.0 Ep)、W 2(0.75 Ep)、W 3(0.5 Ep),在果实盛果期每隔10 d测定果实生长量,将监测的环境因子划分为日平均光照(X 1)、全天平均气温(X 2)、全天平均相对湿度(X 3)、白天平均气温(X 4)、白天平均相对湿度(X 5)、夜间平均气温(X 6)、夜间平均相对湿度(X 7)、昼夜温差(X 8)、昼夜相对湿度差(X 9)9个变量,采用多元回归方法建立番茄果实日增量和关键环境因子之间的回归方程,并确定番茄日增量最大的环境因子组合。【结果】日光温室中各环境因子总体变化比较缓和,相对湿度的变化较大。不同的水肥供应条件下,X 9是影响果实日增量最显著的正因子。X 6是影响低肥或者低水处理下果实日增量的负因子。在供水水平为W 1时,各肥力供应水平的果实日增量都随着X 1、X 8和X 9的增大而升高。不同肥水供应水平条件下,影响果实日增量最显著的环境因子不同。【结论】不同水肥供应条件下,平均光照、夜间平均气温、平均温差、平均相对湿度差是影响番茄果实日增量的重要因子。通过建立回归方程确定番茄果实日增量最大的关键环境因子范围为设施番茄精准化管理提供参考。

RAPD标记构建芥蓝×甘蓝分子标记连锁图

以芥蓝C10 0 12 ×甘蓝秋50 Y7为杂交组合 ,构建了F2 作图群体 ,利用 3 0 0个随机引物对两亲本进行了RAPD检测 ,共筛选到 1 5 0个RAPD引物在亲本间表现多态 ,多态引物的比率为 5 8.3 %。共分析了 5 2个引物产生的 96个多态性RAPD标记在该群体中的遗传。 96个RAPD标记中有 94个在F2 群体中的分离比符合 3∶1 ,说明该群体适合于QTL分析 ,共发现两对共分离的RAPD标记。利用该作图群体构建了甘蓝的基本遗传图谱。该图谱由 9个主要的连锁图构成 ,覆盖基因总长度约为 5 5 5 .7cM。

芥蓝×甘蓝的F_2群体抽薹期性状QTLs的RAPD标记

利用芥蓝C10 0 12 ×甘蓝秋50 Y7杂交组合的F2 作图群体的RAPD标记连锁图进行了 19个农艺学性状的QTL定位研究 ,在 9个连锁群上共定位了 2 8个QTL位点。其中控制抽薹期、开花期、株高 ( 4月 2 7日调查 )的QTL各 3个 ;控制伸展度、株高 ( 4月 2 0日调查 )、叶柄长QTL各 2个 ;控制茎高、叶数、叶宽( 4月 2 7日调查 )的QTL各 1个 ;控制叶宽 ( 5月 11日调查 )的QTL有 5个。

大蒜种质产量和品质性状主成分聚类分析与综合评价

以40个大蒜品种为供试材料,依据数值分类学的性状选择原则,分别于大蒜生长期和采收后进行农艺性状指标的采集。估算40个大蒜品种16个农艺性状及4个品质指标的主成分,并以前3个主成分和遗传相似性系数为基础,分别作二维散点图和系统聚类分析。40份大蒜品种前7个主成分累计贡献率达85%。根据品种性状主成分表现,评选出性状优良的大蒜品种共10个。在聚类图中,在0.14的遗传相似性水平上可以把40份品种分成4类,即由5份种质组成的类群Ⅰ;由28份种质聚成的类群Ⅱ;由改良蒜等4份种质组成的类群Ⅲ,及苏联蒜等3份种质组成的类群Ⅳ。全部种质的遗传相似性系数在0.07～0.64之间,很好地揭示了品种类群间存在的亲缘关系。

单菌落PCR法直接快速鉴定重组克隆

利用单菌落PCR法直接筛选含有GFP、LTB-ST外源基因的重组克隆,阳性克隆可以扩增出目的条带,和质粒PCR扩增的结果一致。同时,单菌落PCR法也可应用于重组质粒转化后的农杆菌的筛选,单菌落PCR法的扩增结果和农杆菌液扩增的结果一致。结果表明,单菌落PCR法是一个有效简便的鉴定重组阳性克隆的方法。

不同整枝留瓜方式对大棚厚皮甜瓜源库关系的调节效应

为探讨不同整枝方式对厚皮甜瓜源库调节的效应,于2009年3-6月对大棚厚皮甜瓜进行双蔓双瓜(T1)、双蔓四瓜(T2)、单蔓双瓜(T3)、单蔓三瓜(T4)等不同整枝方式的试验。结果表明,不同整枝留瓜处理对不同生长发育阶段甜瓜平均单株叶面积和叶面积指数的影响差异显著,双蔓整枝处理在开花坐果期即可达到最适宜的叶面积指数,其叶面积指数分别为1.76和1.56。在果实成熟期,双蔓四瓜和单蔓三瓜的处理出现明显的早衰现象,叶面积指数迅速降低。双蔓双瓜处理的叶果比显著高于其他3个处理,其次是单蔓双瓜。双蔓四瓜的生殖器官干质量显著高于其他处理。双蔓四瓜和单蔓三瓜能有效地提高产量,但平均单瓜质量较低,品质劣于T1和T3处理。综上所述,厚皮甜瓜爬地栽培时,双蔓双瓜是调节源库关系、延缓功能叶早衰的适宜整枝方式。

外源Ca(NO_3)_2对NaCl胁迫下番茄幼苗生理特征的影响

以番茄品种‘农城906’和"毛粉802’幼苗为材料,利用Hoagland基础培养液,研究在150 mmol/L NaCl胁迫下外源10、20、30和40 mmol/L Ca(NO3)2对番茄植株盐胁迫的缓解作用。结果显示,(1)NaCl胁迫显著降低了2个品种幼苗地上和地下部分干重、叶片叶绿素含量和根系活力,增加了幼苗的可溶性糖含量、细胞膜透性和MDA含量,同时使其CAT、POD、SOD活性显著降低;(2)添加20 mmol/L Ca(NO3)2能够有效提高盐胁迫条件下幼苗的地上和地下部干重,缓解叶绿素的降解和根系活力的下降,增加幼苗体内可溶性糖含量,降低叶片质膜透性和MDA含量,增强幼苗体内POD、CAT等细胞保护酶活性,但随着Ca(NO3)2浓度的继续增加,这种缓解作用逐渐减小。研究表明,一定浓度的外源Ca(NO3)2能有效缓解NaCl对番茄幼苗的生长和生理伤害,在一定程度上增强番茄幼苗对盐胁迫的耐受力,并以20 mmol/L Ca(NO3)2对NaCl胁迫的缓解效果最佳。

钙处理对番茄采后成熟生理品质的影响

用浓度为10%、15%的C aC 12处理采后番茄,发现外源钙可有效增加番茄果肉硬度和有机酸含量,降低呼吸峰值,并延缓呼吸高峰的出现,降低可溶性固形物含量,C aC 12还较好抑制了膜透性的增加,降低了丙二醛含量,从而延缓了番茄采后成熟衰老。在本试验范围内,以15%C aC 12处理的效果较好。

番茄果实不同发育阶段香气成分组成及变化

以陕西杨凌地区主栽的番茄品种‘金棚1号’为试验材料,通过固相微萃取和GC/MS联用技术,对番茄果实不同成熟阶段的香气成分及其组成变化进行了研究。结果表明,‘金棚1号’番茄果实共检测到54种香气成分,主要成分为醛类、酸类、醇类、酮类、酯类、酚类等。在果实的不同发育阶段,香味组分及其含量差异较大。醛类物质在绿熟期相对含量较高,为45.87%,在半熟期、硬熟期、完熟期的相对含量分别为12.65%、16.62%、17.15%,其中C6醛在绿熟期占43.7%,完熟期占15.27%,为醛类物质的主要成分;酸类物质含量在4个发育时期中先上升后下降,在半熟期含量达到最高,为15.2%,在完熟期酸类物质含量下降,为6.93%;酮类物质在完熟期含量达到最大,为18.27%;在绿熟期检测到4种重要的番茄特征香气物质,半熟期检测到5种番茄特征香气物质,硬熟期和完熟期各检测到6种番茄特征香气物质。说明随着果实的成熟,特征香气物质种类增多。

PCR鉴定时的微量DNA快速制备

用基因组微量DNA快速提取方法,从胡萝卜转化再生株样品中快速提取了基因组DNA,并以此为模板进行胡萝卜转化再生株的PCR快速检测的结果表明,这是转基因时PCR检测的一种快速、简便、有效方法。

甘蓝类作物抽薹期及开花期数量性状的研究进展

从甘蓝类作物抽薹开花期数量性状研究的历史、甘蓝类作物抽薹期开花期性状的传统遗传学研究、甘蓝类作物与其它十字花科抽薹期和开花期的分子标记研究及与其它十字花科作物的抽薹及开花期的比较作图研究等几个方面,概述了甘蓝类作物抽薹期与开花期等数量性状的研究进展,并对以后的研究方向提出了建议。

“参与式”教学方法在园艺学概论课程教学中的应用

分析了参与式教学方法在园艺学概论课程教学中应用的必要性,阐述参与式教学方法的特点,最后提出了参与式教学方法的设计。

利用正交设计优化辣椒的SRAP反应体系

以辣椒雄性不育保持系B-07LP为试材,利用正交设计L16(45)在5个水平上对影响辣椒SRAP反应体系稳定性的dNTP浓度、引物用量及Taq酶活性浓度梯度等外部条件进行了优化试验。在此基础上,通过单因素完全随机试验确定了辣椒SRAP关键反应因子的适宜浓度。其中引物浓度为0.4μmol/L、dNTP的适宜浓度为0.2 mmol/L及适宜的Taq酶活性浓度为0.3 U/μL,并对所建体系的稳定性进行了验证。

蔬菜学全方位多时段实践教学体系的构建与实践

西北农林科技大学在实践中完善了蔬菜学本科人才培养方案。该方案适应了现实需要,凸现了实践教学目标体系,并根据新的需求构建全方位多时段实践技能训练环节。新的实践教学体系体现了学生"意识引导—认知实习—综合实践—深化提高"为一体的渐进式认知过程。

芥蓝×甘蓝F_2群体的2个RAPD标记转化为ERPAD标记的研究

在对芥蓝C100-12×甘蓝秋50-Y7杂交组合构建F2作图群体进行RAPD检测的基础上,分别对4个O12,R13,Q14,P17进行了延长1个碱基的研究,其中O12和P17能将部分特异RAPD标记转化为稳定性更强的ER-PAD标记,但对R13和Q14随机引物未找到相应的ERPAD标记。

霍乱毒素B亚基对胡萝卜的遗传转化

以胡萝卜无菌幼苗的下胚轴为外植体,通过携带CTB基因的根癌农杆菌的介导进行转化,在Kan50mg/L和Carb500mg/L的MS3-1固体培养基上诱导形成胚性愈伤组织,转至Kan100mg/L和Carb100mg/L的MS0固体培养基上形成植株,同时还进行了以经过预处理的下胚轴为外植体进行转化的试验,发现低温处理4d的下胚轴的抗性愈伤诱导率较高。经PCR检测、PCR-Southern杂交检测以后,表明CTB基因已整合进胡萝卜的基因组中。RT-PCR检测初步证明了CTB基因的转录。

影响芥蓝×甘蓝RAPD标记稳定性的外部条件优化研究

通过对影响RAPD标记稳定性的引物浓度梯度、退火温度梯度、dNTP浓度梯度、Taq酶浓度梯度等外部条件的优化研究,确定了RAPD反应适宜的引物浓度为0.1～0.2 pmol/μL,退火温度为48～52 ℃,dNTP浓度为0.3～0.15 mmol/L及Taq酶浓度为0.3 U/μL,提高了该反应体系中RAPD的稳定性.

绿色荧光蛋白基因TuMv病毒表达载体的构建

本研究通过设计引物进行PCR扩增得到绿色荧光蛋白GFP基因,将PCR产物酶切以后与芜菁花叶病毒表达载体相连,得到的阳性克隆通过多对引物组合进行PCR验证及序列测定,说明GFP基因已经连接到该病毒表达载体中,而且没有发生碱基误配及错配。该GFP表达载体的构建为进一步利用TuMv的全长cDNA侵染性克隆进行外源基因的转化奠定了基础。