Ⅱ型胶原抗原分子结构的保守性与自身抗体形成关系的研究

目的:为了解各种属动物Ⅱ型胶原分子结构的保守性和自身抗体形成的关系。方法:(1)从不同种属动物(包括人、猪、牛、鸡)中制备Ⅱ型胶原,用溴化氰把胶原分解成多个片段,以聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法(Westernblot)鉴定和测定抗体的各项特性。(2)用鸡Ⅱ型胶原自皮下多点注射至大鼠尾部,建立了类风湿关节炎(RA)的动物模型,并通过口服Ⅱ型胶原以观察其对疾病的干扰情况。(3)用ELISA法分析RA病人血清中自身抗体。结果:112例RA病人血清对牛Ⅱ型胶原IgG和IgA抗体反应的阳性率分别为19.6%和12.5%,对人Ⅱ型胶原IgG和IgA反应的阳性率则各自为17.5%和13.8%。对不同种属动物Ⅱ型胶原抗体IgG和IgA反应的阳性率无明显差异。IgA型阳性率高于一般正常比率。溴化氰能把各种属Ⅱ型胶原消化成8～12个片段,每个片段有类似的分子量,有类似的位点特异抗体,CB10、CB11、D和C是主要的位点抗体。动物模型结果表明预先口服胶原大鼠组发生RA的阳性率明显低于模型组,二组的发病率分别是44.4%和83.3%,口服胶原组的病情严重程度明显低于模型组,口服胶原组和模型组的肢体累及率分别为13.8%和49.9%。结论:不同种属Ⅱ型胶原分子结构有很高的保守性,自身抗体的产生可能是饮食胶原刺激人体免疫器官或直接刺激肠道黏膜的免疫系统所致,病人的主要位点特异抗体是CB10、CB11。此外该研究还发现D和C也是主要特异位点抗体,特异位点抗体与RA疾病程度有关。

尿白蛋白片段与心脑血管损伤的关系

为探讨尿白蛋白片段与心血管损伤的关系 ,用改进的免疫印迹法分析心血管损伤疾病患者尿白蛋白片段 ,尿样来自 112例无并发症原发性高血压患者 ,另有 46例并发冠心病和 36例并发脑血管病的原发性高血压患者以及 10 8例健康人。有心脑血管损伤性疾病的患者尿中可见异常尿白蛋白片段 (4 5kDa、30kDa和 2 2kDa)。原发性高血压、并发冠心病和并发脑血管病患者尿白蛋白片段的阳性率分别为 32 .3%、6 0 .8%和 6 6 .7%。这些患者的尿白蛋白片段阳性率明显高于健康人 (4 .6 0 % ,P <0 .0 1) ,且合并心脑血管病的原发性高血压患者尿白蛋白片段的阳性率也明显高于单纯原发性高血压患者。尿白蛋白片段与微量白蛋白尿、甘油三酯和总胆固醇等指标呈正相关。提示尿白蛋白片段与心脑血管疾病明显相关 ,可作为一种新的非创伤性检查心脑血管损伤的参考指标。

微量白蛋白尿的发生机理、预后及治疗

微量白蛋白尿（Microalbuminuria简称MCA）的存在代表糖尿病和原发性高血压等老年病自然发展过程中的重要变化，它反映机体内在在着广泛的血管损伤，是肾脏早期损伤、心血管病发病率和死亡率的良好指标，及时的治疗干预能降低MCA的水平，改善原发疾病的预后。

尿白蛋白片段分析在糖尿病性肾病早期诊断中的意义

用免疫印迹法分析尿白蛋白片段（ Ｕ Ａ Ｆ），并与 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｒ Ｉ Ａ 检测尿微量白蛋白（ Ｕ Ｍ Ａ）作比较。共检测Ⅱ型糖尿病 １２３ 例，健康人 １０８ 名， Ｕ Ａ Ｆ阳性率分别为 ４４７％ 和 ４６％ 。９７ 例 Ｕ Ｍ Ａ 阴性的糖尿病例中仍有３１％ Ｕ Ａ Ｆ阳性。结果表明 Ｕ Ａ Ｆ可作为早期诊断糖尿病性肾病的新的临床参数。

ELISA法检测尿微量白蛋白的临床应用与评价

目的:评价ELISA方法检测尿微量白蛋白的准确性、可靠性及其临床意义。方法:使用ELISA一步竞争法测定尿微量白蛋白,与放免法、化学发光法进行比较。结果:ELISA测定尿微量白蛋白与放免法、化学发光法测定的结果十分接近,相关系数r值分别为0.98和0.95。测定400例健康人晨尿尿微量白蛋白正常值为18μg/m l。糖尿病、高血压、冠心病患者尿微量白蛋白的检测,阳性率分别为39.2%、42.0%和36.1%。结论:ELISA法测定尿微量白蛋白具有经济、实用的特点,与化学发光法、放免法比较有良好的相关性。对于糖尿病、高血压、冠心病早期肾脏损伤的诊断以及疾病的预测具有重要意义。

高血压患者微量白蛋白尿的阳性率及相关因素

本文研究国内高血压患者微量白蛋白尿(MAU)的阳性率及相关因素.入选102例不伴有糖尿病及原发性肾脏疾病的原发性高血压患者.用酶联免疫法测定早晨第一次尿中微量白蛋白,并以108例健康人做对照.尿中微量白蛋白小于20μg/ml为MAU阴性,在20～200μg/ml为MAU阳性.发现MAU的阳性率为23%,显著高于正常人的5%.高血压患者中,MAU阳性者与MAU阴性者相比,体重指数大、有家族史多、收缩压和平均压较高,与空腹血浆胰岛素、胰岛素敏感性指数及脂质指标无关,而且MAU阳性患者并发中风率高.以尿微量白蛋白为应变量作多元逐步线性回归,发现收缩压、体重指数和病程可进入方程;而以中风为应变量作Logistic回归分析发现尿微量白蛋白、收缩压、体重指数和腰臀比可进入方程.说明在不伴有糖尿病的高血压患者中,MAU阳性与血压升高、肥胖和家族史相关,而与胰岛素抵抗及脂质代谢无关.MAU是中风的独立相关因素.

原发性高血压、冠心病患者尿微量白蛋白阳性率及其相关因素

目的:探讨微量白蛋白尿与原发性高血压和冠心病的关系。方法:采用酶标记抗原一步竞争法,检测81例原发性高血压患者、66例冠心病患者及108例健康对照的尿微量白蛋白。结果:原发性高血压患者尿微量白蛋白阳性率为54.3%,冠心病患者尿微量白蛋白阳性率为37.9%,高血压患者尿微量白蛋白与收缩压及高密度脂蛋白相关,尿微量白蛋白阳性冠心病患者发生急性心梗和尿微量白蛋白阴性冠心病患者发生急性心梗分别为40%和17.1%(P<0.05)。结论:冠心病尿微量白蛋白阳性患者预后不良,提示尿微量白蛋白测定的重要性。

类风湿关节炎患者抗人、猪两种属Ⅱ型胶原抗体检测的意义

目的 :检测类风湿关节炎 (RA)患者血清中人及猪Ⅱ型胶原抗体水平 ,探讨其在RA发病中的意义。方法 :用自提取的人、猪Ⅱ型胶原包板 ,采用改良的酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 1 0 5例RA患者血清抗人、猪Ⅱ型胶原抗体IgG及IgA ,并与正常人 ( 1 4 0例 )及疾病对照组 ( 80例 )比较分析。同时检测患者的类风湿因子(RF)、血沉 (ESR)及C反应蛋白 (CRP)。结果 :RA患者血清中抗人Ⅱ型胶原抗体IgG、IgA阳性率分别为2 5 .3%、2 7.5 % ,抗猪Ⅱ型胶原抗体IgG、IgA阳性率分别为 2 6.9%、2 5 .6% ,显著高于正常人及疾病对照组 (P<0 .0 5 )。两种属Ⅱ型胶原抗体IgG及IgA常同时存在于同一患者中。两种属Ⅱ型胶原抗体与RF、ESR及CRP异常无相关性。结论 :RA患者血清中人及猪Ⅱ型胶原抗体水平升高 ,可能在RA的发病中起着一定的作用 ;但RA患者Ⅱ型胶原抗体阳性与疾病活动指标无明显相关 ,不能作为监测RA活动的指标。

Ⅱ型胶原自身抗体与类风湿性关节炎的关系

我们用改良的酶联免疫吸附法(ELISA),分别用牛、人天然Ⅱ型胶原和用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,检测了112例类风湿性关节炎患者和154例健康对照血清中抗Ⅱ型胶原的IgG型和IgA型抗体。抗天然牛Ⅱ型胶原自身抗体IgG型和IgA型阳性率RA患者组分别为19.6％和12.5％,而健康对照组为0.7％和2.0％,抗天然人Ⅱ型胶原自身抗体IgG型和IgA型阳性率RA患者分别为12.5％和16.3％,而健康对照为0％和2.5％,两类抗体的阳性率均为RA患者组显著高于对照组。用牛和人的Ⅱ型胶原作为包被抗原,其阳性率无显著性差异。这也说明了Ⅱ型胶原蛋白在种属间的抗原决定簇相似。用溴化氰裂解的人Ⅱ型胶原作为包被抗原,RA患者和健康对照组在IgG型有显著性差异,而在IgA型无统计学差异,其原因有待进一步探讨。本文根据这些结果讨论了Ⅱ型胶原自身抗体在RA发病中的意义。

高血压与糖尿病患者尿铜蓝蛋白排泄率的变化比较

了解血管损伤性疾病高血压、糖尿病患者尿铜蓝蛋白与尿白蛋白排泄率的变化并进行比较 ,评价其临床意义。用酶联免疫吸附测定法检测尿中铜蓝蛋白及尿白蛋白水平。结果 10 7例正常人尿铜蓝蛋白排泄率为 5 2 .98± 32 .89ng min ,尿白蛋白排泄率为 7.13± 2 .2 9μg min ;4 5例高血压患者尿铜蓝蛋白排泄率为 94 .0 1± 6 9.5 0ng min ,尿白蛋白排泄率为 10 .4 2± 8.19μg min ;112例糖尿病患者尿铜蓝蛋白排泄率为 131.92± 10 3.6 4ng min ,尿白蛋白排泄率为 18.6 9± 2 7.30 μg min。对以上资料分别与正常对照组进行比较 ,统计分析结果表明 ,尿铜蓝蛋白排泄率在各组间差异非常显著 (P <0 .0 5 )。糖尿病患者尿铜蓝蛋白排泄率比高血压患者尿铜蓝蛋白排泄率更高。高血压、糖尿病常伴有肾小球血管内膜损伤 ,因肾小管基底膜电荷改变 ,网孔变大 ,使带电荷铜蓝蛋白经该处大量逸出。提示尿铜蓝蛋白排泄率对高血压。

凝血酶原片段PF1+2单克隆抗体的制备及其应用

目的:自制凝血酶原片段F1+2单克隆抗体,探讨其在血栓性疾病中的诊断作用。方法:常规方法制备F1+2单克隆抗体,用ELISA法检测血浆F1+2片段。结果:血栓患者、短暂性脑缺血发作(TIA)患者、脑梗塞患者与正常对照组比较,F1+2水平明显升高,具有显著性差异。结论:F1+2片段是血栓性疾病的特异指标,自制的F1+2片段单抗可以用于检测F1+2片段水平。

系统性红斑狼疮患者的尿白蛋白测定

目的 :通过尿白蛋白的测定 ,早期发现SLE患者的肾损害 ,并给予积极的治疗 ,改善患者的预后。方法 :利用简易酶联免疫法测定SLE患者的尿白蛋白 ,同时测定 2 4h尿总蛋白、ANA、ESR。结果 :SLE患者的尿白蛋白明显高于正常人组 ;其尿白蛋白与 2 4h尿总蛋白结果呈正相关 (r =0 .96 ) ;2 4h尿总蛋白阴性的SLE患者仍有 36 .3%尿白蛋白阳性 ;尿白蛋白经治疗后可降低 ,尿白蛋白结果与ANA、ESR无相关性。结论 :测定SLE患者的尿白蛋白可早期发现肾损害 。

口服Ⅱ型胶原对胶原诱发大鼠关节炎的抑制作用及其致病机制初探

目的：观察口服Ⅱ型胶原蛋白（CⅡ）对大鼠胶原性关节炎（CIA）的疗效。方法：用鸡CⅡ致SD大鼠类风湿性关节炎模型，于致关节炎前一周口服CⅡ，持续4周，观察大鼠CIA的发生率及Ⅱ型胶原抗体产生情况。结果：与实验组比较，给予CⅡ灌胃的SD大鼠，其CIA发病率明显降低（44.4%:83.3%)，关节炎指数及肢体累及率降低（0.88:5.33;13.88%:47.91%)，两组Ⅱ型胶原抗体均为阳性。结论：CⅡ灌胃可以明显抑制CⅡ引起的关节炎的发病率，并能减轻关节炎的严重程度。

类风湿关节炎危险因素病例—对照研究

目的通过流行病学调查,探讨与类风湿关节炎(RA)发生有关的危险因素,估计各主要危险因素的相对危险度。方法应用1:1匹配的病例—对照研究方法,收集RA患者及对照各165例,收集的资料包括人口学特征、既往疾病史、家族史、吸烟、饮酒、饮茶等生活习惯和嗜好、居住和工作环境,以及女性月经史、生育史。对各危险因素进行单因素和多因素条件Logistic回归分析。结果与RA危险性增加有关的因素有阳性家族史、未受过高等教育、既往结核病史、中度及中度以上劳动强度和既往腮腺炎病史(OR=2.10￣5.41),女性第一次生育后哺乳史(OR=2.25)及初潮年龄晚(OR=2.17)与RA危险性的增加也有关,饮绿茶(OR=0.27)可降低RA发病的危险性。结论阳性家族史、未受过高等教育、既往结核病史、中度及中度以上劳动强度、既往腮腺炎病史和女性第一次生育后哺乳史、初潮年龄晚是RA发生的危险因素,饮绿茶对RA的发生具有保护作用。

酶联免疫吸附法测定血小板反应素1及其对前列腺癌诊断价值的研究

目的 采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血小板反应素-1（TSP-1）,并分析TSP-1对前列腺癌的诊断价值.方法 用ELISA斑点法测定TSP-1,研制了3种具有分离特异抗原功能的试剂,研发了一项具有纯化蛋白能力的技术,解决非特异蛋白的交叉反应问题,建立测定TSP-1的ELISA常规方法.并用该方法测定14例良性前列腺增生和18例前列腺癌患者血清标本的TSP-1.结果 前列腺癌组TSP-1值平均（73.77±12.72）%,前列腺增生组为（121.86±19.47）,差异有统计学意义（t=8.44,P＜0.01）.TSP-1和前列腺特异性抗原（PSA）对前列腺癌诊断的敏感性和特异性分别为92.9%、88.9%和85.7%、66.7%,差异有统计学意义（均P＜0.01）.TSP-1的受试者工作特征曲线（ROC）曲线下面积为0.9663,PSA的ROC曲线下面积为0.7421,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 应用ELISA方法测定TSP-1现实可行,TSP-1是一种理想的前列腺癌诊断指标,可能比PSA更能够准确地鉴别良性和恶性前列腺疾病.

类风湿关节炎患者血清中Ⅱ型胶原片段及其意义的探讨

目的观察类风湿关节炎(RA)患者血清中Ⅱ型胶原(CⅡ)抗体片段随病情发展的变化情况。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)选取抗CⅡ抗体阳性患者,用免疫印迹方法检测其CⅡ抗体片段阳性情况。结果112例RA患者及120名健康对照人群中CⅡ抗体阳性率分别为19．6％和1．67％,22例CⅡ抗体阳性患者中20例可观测到阳性片段,其中最常见的特异位点抗体为CB10,CB11及D片段,其阳性率分别为45．4％,54．5％和45．4％。结论CB10,CB11及D片段出现与疾病严重程度有关。

健康人尿铜蓝蛋白排泄率随增龄的变化

目的 观察健康人尿铜蓝蛋白排泄率 (CER)随增龄发生的变化 ,并探讨其临床意义。 方法 对 314名 2 0～ 79岁健康者以 10岁为一年龄段分成 6组。采用酶联免疫吸附测定法检测其尿CER。 结果 各年龄组尿CER为 :2 0～ 2 9岁组 (38± 19)ng/min、30～ 39岁组 (42± 2 4 )ng/min、4 0～ 4 9岁组 (45± 2 5 )ng/min、5 0～ 5 9岁组 (48± 32 )ng/min、6 0～ 6 9岁组 (5 3± 33)ng/min、70～ 79岁组 (6 1± 4 3)ng/min ,但各年龄组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。非老年组 (47± 30 )ng/min ,老年组(5 9± 39)ng/min ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。 结论 (1)增龄过程中尿CER有上升的趋势 ;(2 )尿CER老年组明显高于非老年组 ;(3)对老年患者的临床诊断治疗要考虑因年龄因素而存在的脏器排泄率变化。

血清抗Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原自身抗体的测定及其意义

目的为了解衰老过程中细胞外基质胶原的变化，建立了血清抗Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原抗体水平的测定方法并探讨其意义。方法采用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）测定方法，观察１０８名老年人和３９名中年人血清中抗Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原自身抗体水平。参照Ｂｕｙｚｅｒｅ方法计算样品抗体水平。以混合的健康人血清作标准对照，用每份待测样品的吸光度值与标准对照的吸光度值的百分比表示抗体的相对水平。结果老年组抗Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原自身抗体水平分别为１１５５±２８６、１２３２±３８０、１１６５±４７６；中年组分别为９８９±７０、１０６５±２７８、９７５±２８８。两组间各项分别比较，差异均有显著性（均为Ｐ＜００５）。结论（１）建立了血清抗Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ型胶原自身抗体ＥＬＩＳＡ测定法。所测得的结果稳定、精确、重复性好。（２）老年组抗Ⅰ、Ⅳ。