不同质量玻璃化冻融胚胎移植对其妊娠结局的影响

[目的]探讨移植不同质量的玻璃化冻融胚胎与妊娠结局的关系,寻找合适的冻融胚胎移植选择策略,以保证妊娠率、降低多胎率.[方法] 对应用玻璃化冷冻技术进行人类早期胚胎冻融移植周期492 例患者的相关资料进行回顾性分析,根据移植优质胚胎数量以及移植胚胎中包含8 细胞胚胎数目将其分为3 组,比较各类组间的临床妊娠率和多胎率差异.[结果]共复苏了1 425 枚胚胎,存活1 340 枚,胚胎存活率为94.0%,其中完整胚胎1 268 枚,胚胎完整率为89.0%,临床妊娠率为43.9%,多胎率37.0%.移植3 枚优胚的妊娠率显著高于移植1～2枚优胚的妊娠率（P〈0.05）;移植1枚优胚的多胎率显著低于移植2～3枚优胚的多胎率.移植8细胞胚胎的妊娠率显著高于其他细胞数胚胎组（P〈0.05）,随着移植8细胞胚胎数目的增加,多胎率亦增加,但妊娠率无显著性差异.[结论]移植的玻璃化冻融优胚数目和8细胞胚胎数是影响临床妊娠率和多胎率的重要因素.因此,为保证患者的妊娠率,降低多胎率,应移植2 枚优质胚胎,其中包含1 枚8细胞优质胚胎.

TGF-β1刺激对人腹膜间皮细胞内Smad信号转导通路的影响

目的 :探讨人腹膜间皮细胞内Smad信号转导通路在TGF β1致腹膜纤维化过程中是否发挥作用。方法 :取健康成年人大网膜进行人腹膜间皮细胞原代培养 ,经鉴定 95 %以上为人腹膜间皮细胞。用 5ng/mlTGF β1刺激第三代培养细胞 ,采用免疫组织化学染色、Westernblotting ,ELISA以及RT PCR等方法 ,分别观察人腹膜间皮细胞内磷酸化Smad2 / 3(p Smad2 / 3)的蛋白表达以及在细胞内的迁移 ;细胞内Smad7的蛋白和mRNA表达 ;细胞外纤维连接蛋白 (FN)的蛋白、细胞内FN的mRNA以及细胞内I型胶原 (COL1 )的蛋白和mRNA表达。结果 :人腹膜间皮细胞内 p Smad2 / 3的蛋白表达在TGF β1刺激后 1 5min即开始显著增加 ,此时p Smad2 / 3的阳性细胞率为 2 9% ,细胞着色主要分散在细胞质中 ,30min阳性细胞率 81 %至 1h阳性细胞率 84 %增加最明显 ,细胞着色加深且集中在细胞核及周边 ,2h蛋白表达明显回落 ,此时阳性细胞率为 37% ,细胞着色转淡并又分散至细胞质中 ;细胞内Smad7的蛋白表达在TGF β1刺激后 2 4h明显增加 ,4 8h时达高峰 ,mRNA表达呈时间依从性增强 ;细胞外FN的蛋白、细胞内FN的mRNA以及细胞内COL1的蛋白和mRNA表达从TGF β1刺激后 2 4h起均明显增加 ,且均显示一定的时间依从性。结论 :人腹膜间皮细胞内Smad信号转导通路能?

不明原因不孕患者精子的精-卵相互作用实验及体外受精临床结局的研究

目的:研究不明原因不孕患者的精子功能,并进一步探讨不明原因不孕患者体外受精(in vitrofertilization,IVF)方式对临床结局的影响。方法:选择2009年7月至2010年1月在中南大学湘雅医院生殖医学中心行IVF治疗的55例患者,根据不孕的原因将患者分为不明原因不孕组(A组)和单纯女方输卵管因素组(B组)。将不明原因不孕组25例患者通过超排卵获取的成熟卵母细胞随机分为2组,分别行常规IVF(A1组)和卵胞质内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精(A2组);单纯女方输卵管因素组(B组)采用常规IVF。将2组男方的精子利用废卵分别进行精-卵结合实验和透明带诱发精子顶体反应实验。观察A组与B组平均精卵结合数和透明带诱发精子顶体反应情况,分析透明带诱发精子顶体反应率与受精率的关系。比较不明原因不孕组通过2种方式受精后的受精率、优胚率及妊娠率。结果:A组平均精卵结合数(78.29±16.31)和透明带诱发精子顶体反应率[(55.87±27.69)%]明显低于B组的平均精卵结合数(94.63±6.72)及透明带诱发精子顶体反应率[(82.53±17.99)%],差异具有统计学意义(P<0.01);A1组的受精率(49.32%)明显低于B组(64.42%)和A2组(71.33%),差异具有统计学意义(P<0.01);而A1组的优胚率(44.44%),与A2组(56.86%)及B组的优胚率(53.81%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);A2组的受精率及优胚率与B组比较,差异也无统计学意义(P>0.05);A组的妊娠率(36%)与B组(40%)相比,差异无统计学意义(P>0.05);A1组的受精率与透明带诱发精子顶体反应率具有明显的相关性,有统计学意义(r=0.932,P<0.01)。结论:对于不明原因不孕患者,精卵结合及透明带诱发精子顶体反应是有重要意义的精子功能检测实验。不明原因不孕患者的卵子采用half-ICSI,可有效地避免受精完全失败导致的无胚胎移植,从而获得较理想的妊娠结局。

3种子宫内膜准备方案对冻融胚胎移植的临床结局比较

目的通过分析3种子宫内膜准备方案的冻融胚胎移植临床结局情况,探讨如何选择恰当的冻融胚胎移植子宫内膜准备方案。方法对该中心243例冻融胚胎移植周期进行回顾性分析。结果自然周期、激素替代周期和HMG促排卵周期三组冻融胚胎移植患者的年龄、不孕年限、胚胎完整率和优胚率比较,差异均无显著性(P>0.05);3组子宫内膜厚度及其A型内膜百分率比较,差异具有显著性(P<0.05);3组种植率及妊娠率比较,差异无显著性(P>0.05)。结论 3种子宫内膜准备方案各有优缺点,自然周期是冻融胚胎子宫内膜准备最经济有效的首选方案;对于排卵障碍或子宫内膜薄者,激素替代周期及HMG促排卵周期不失为内膜准备的补充措施。临床医生应因人而异选择适宜的子宫内膜准备方案。

多原核受精与HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度、受精率、妊娠率的关系

回顾性分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的686个周期,比较多原核受精组(348例)和非多原核受精组(338例)两组的一般资料、HCG日雌孕激素、获卵数、授精密度及活力、受精率、卵裂率、妊娠率.结果显示两组HCG日雌孕激素、获卵数、成熟卵率、受精率、卵裂率、妊娠率之间有显著差异(P<0.05),授精密度、受精活力之间无差异.表明HCG日雌孕激素较高,获卵数多及未成熟和过熟卵子比例高,预示着发生多原核受精的可能性大,而多原核受精的发生可能有较好的临床结局.

排卵监测后宫腔内人工授精与指导性生活治疗不孕症比较

目的比较分析排卵监测后宫腔内人工授精和指导性生活在治疗不孕症的临床应用价值。方法回顾性分析该院门诊治疗的不孕症患者,用阴道B超监测卵泡发育,结合尿LH峰测定于排卵24h内行宫腔内工人授精(IUI)或指导性生活,并比较其临床妊娠率。结果宫腔内人工授精(IUI)156周期,临床妊娠36例,临床妊娠率23.1%。指导性生活160周期,临床妊娠20例,临床妊娠率12.5%。结论宫腔内人工授精临床妊娠率明显高于指导性生活。

部分卵子卵胞浆内单精子注射在辅助生殖技术中的应用价值

【目的】探讨部分卵子卵胞浆内单精子注射（half-ICSI）指征的选择及其在辅助生殖技术中挽救受精失败的意义。【方法】回顾性分析2007年1月至2008年12月在本院生殖中心实施采卵周期的常规体外受精（IVF）及halPICSI患者的临床资料，比较两种方法的临床特征、受精率及妊娠率。【结果]hal{-ICSI组在不孕年限、不孕年限大于10年、原发性不孕及男方轻中度少弱畸精子症所占比例显著高于IVF组（P〈0.05）；halPICSI组低受精率及完全受精失败率较IVF组明显增高（P〈O．05），但Half—ICSI组中低受精组的妊娠率与常规IVF妊娠率相比差异无统计学意义（P〉0．05）；half-ICSI组内IVF、ICSI均受精组各项精液参数均高于仅ICSI受精组，但仅在处理前精子总活率、处理前A级精子、处理前B级精子、处理后B级精子百分率上差异有统计学意义（P〈O．05）；half-ICSI中根据移植胚胎来源分为IVF组、IVF＋ICSI及ICSI组，以移植IVF＋ICSI混合胚胎的着床率及妊娠率为最高，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】对于原发性不孕、不孕年限大于10年、男方轻中度少弱畸精子症的患者，无论是单项或合并多项明确不孕原因存在可疑受精障碍，可考虑行halMCSI治疗，避免完全受精失败及妊娠率低下。

转化生长因子β_1介导的Smad信号通路对人腹膜间皮细胞外基质的调控

目的 探讨TGF - β1介导的Smad信号通路对人腹膜间皮细胞 (HPMCs)细胞外基质 (ECM)的调控机制。方法 原代培养的第三代HPMCs分成对照组与 5ng/mlTGF - β1刺激组 ,采用免疫组织化学染色和Western印迹法观察细胞内磷酸化Smad2 / 3(p -Smad2 / 3)的表达以及在细胞内的迁移 ,Western印迹、ELISA和RT -PCR法观察Smad7、结缔组织生长因子 (CTGF)、α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)、纤溶酶原激活物抑制剂 -1(PAI- 1)、纤维连接蛋白 (FN)和I型胶原 (COL1)的mRNA及蛋白表达。结果 ①对照组细胞内几乎不表达p -Smad2 / 3,在刺激后 15min蛋白表达增加 ,主要分散在细胞质中 ,1h达高峰 ,主要集中在细胞核及周边 ,2h明显回落 ,又分散至细胞质中 ;②刺激组细胞内Smad7、CTGF、α -SMA和COL1的蛋白表达与对照组比均增加 ,其中Smad7、CTGF和α -SMA在 4 8h最明显 ,COL1呈时间依从性 ;刺激组上清液PAI - 1的蛋白含量与对照组比均增加 ,其中 2 4h最高 ,FN呈时间依从性 ;刺激组Smad7的mRNA表达与对照组比呈时间依从性增加 ,CTGF、α -SMA、PAI- 1、FN和COL1均增加 ,其中CTGF和α-SMA在 4 8h最高 ,PAI- 1在 2 4h最高 ,FN和COL1呈时间依从性。结论 TGF - β1能特异性激活HPMCs内Smad信号通路 。

囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用探讨

目的探讨囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用价值。方法对2002年10月～2003年12月在湘雅医院生殖医学中心接受囊胚培养并行囊胚期冷冻胚胎移植的病例进行分析,了解囊胚期与卵裂期冷冻胚胎解冻后的胚胎成活率、植入率及妊娠率。结果冷冻囊胚解冻后胚胎数、胚胎成活率、植入率和妊娠率与卵裂期冷冻胚胎无显著差别(P>0.05),囊胚解冻后经15h过夜培养,42枚中有22枚成活,其中8枚I,II级继续发育或囊胚腔扩张,3例获得妊娠,妊娠率为37.5%。结论囊胚期冷冻胚胎移植同样能达到卵裂期冷冻胚胎移植的临床效果,同时增加解冻与移植间隔时间可更好地选择冻融囊胚移植,对提高妊娠率可能有一定意义。

辅助生殖技术治疗周期中单侧卵巢对超促排卵及妊娠的影响

目的了解辅助生殖技术(ART)治疗周期中单侧卵巢对超促排卵效果及临床结果的影响。方法对2001年1月￣2003年12月3a内在湘雅医院生殖医学中心接受ART治疗的30个单侧卵巢病例进行分析,了解ART周期治疗前单侧卵巢切除的原因,比较单侧与双侧卵巢患者超促排卵后获卵数及注射HCG日E2水平、植入率及临床妊娠率的差异。结果ART治疗前手术切除一侧卵巢的原因以卵巢病变及宫外孕为主,且单侧卵巢超促排卵后促性腺激素(Gn)用量、用药时间、受精率、卵裂率及妊娠率与双侧卵巢比较差异无显著性(P>0.05),而注射HCG日E2水平及获卵数较双侧卵巢为低(P<0.01)。结论ART周期中单侧卵巢行IVF-ET时虽临床妊娠率与双卵巢无差异,但注射HCG日E2水平及获卵数低于双侧卵巢,因此对良性卵巢病变生育前应尽量采取保守性手术。

不同精子来源及参数对卵胞浆内单精子注射术结局的影响

目的:探讨不同源性精子、不同参数精子对卵胞浆内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injec-tion,ICSI)结局的影响。方法:回顾性分析2005年6月至2008年12月在中南大学湘雅医院生殖医学中心接受ICSI治疗的433个周期。根据行ICSI的精子来源,分为射出精子组(A组)336个周期,附睾来源精子组(B组)97个周期。根据精子参数,又将射出精子组分为3个亚组,即正常组(A1组)95个周期,单参数异常组(A2组)119个周期,多参数异常组(A3组)122个周期。比较4组的受精率、正常受精率、卵裂率、优胚率、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率。结果:4组的一般情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4组的受精率、正常受精率、卵裂率、优胚率、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:精子无论是来自附睾还是射出精液,对其ICSI结局无影响;ICSI可以治疗各种因素的男性不育,单一或多种参数异常精子不影响ICSI结局;经皮附睾抽吸精子行ICSI是治疗梗阻性无精子症所致的男性不育的有效方法。

新鲜周期和冻融周期胚胎移植术后发生异位妊娠的相关因素分析

目的比较新鲜周期和冻融周期胚胎移植后异位妊娠(EP)的发生率,探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后EP的危险因素。方法回顾性分析湘雅医院生殖医学中心2013年1月-2015年4月行IVF-ET或卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗的移植周期3 028例,其中新鲜移植周期1 696例,发生EP75例,冻融移植周期1 332例,发生EP 49例;比较两组患者的EP发生率,并探讨体外受精周期中发生EP的相关危险因素。结果冻融周期EP发生率为3.7%,新鲜周期EP发生率为4.4%,差异无统计学意义。盆腔输卵管病变、既往EP史、既往人工流产史、子宫内膜厚度及不孕类型是胚胎移植后EP发生的相关因素。结论冻融周期胚胎移植相比于新鲜周期,其EP发生率无明显降低。

7日GnRHa短方案对卵泡液中IGF-Ⅱ和IGFBP-4浓度的影响

目的:探讨7日促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin releasing hormone agonist,GnRHa)短方案与GnRHa长方案对卵泡液中胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factorII,IGF-II)和胰岛素样生长因子结合蛋白-4(insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4)浓度水平的影响。方法:将接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗的88例输卵管因素不孕患者,随机分成7日GnRHa短方案组和GnRHa长方案组(n=44)。收集取卵日优势卵泡的卵泡液,采用放射免疫法测定IGF-II浓度,酶联免疫吸附法测定IGFBP-4浓度。结果:7日GnRHa短方案与长方案组相比较,Gn用量明显减少,用药时间明显缩短。两组间人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日血清雌二醇(E2)和每成熟卵泡E2的水平差异均无统计学意义(P>0.05)。7日GnRHa短方案卵泡液的IGF-II和IGFBP-4水平明显低于GnRHa长方案组。两组间卵泡液的IGF-II/IGFBP-4比值差异无统计学意义(P>0.05)。卵泡液中的IGF-II水平与Gn用量呈显著正相关。结论:7日GnRHa短方案与长方案引起卵泡液中IGF-II和IGFBP-4的浓度变化,但卵泡液中IGF-II和IGFBP-4浓度的改变并未导致临床结局的不同。

改良超长降调节方案对卵巢子宫内膜异位囊肿手术后体外受精-胚胎移植结果的影响

目的:了解改良超长降调节方案对卵巢子宫内膜异位囊肿术后体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结果的影响。方法:回顾分析16例卵巢子宫内膜异位囊肿患者腹腔镜下剥除囊肿或经阴道B超下囊肿穿刺术后每月肌内注射曲普瑞林3.75 mg,共3次,于末次注射后14天左右开始使用促性腺激素(Gn)超排卵行IVF-ET妊娠情况;并以同期12例异位囊肿术后采用短方案行IVF-ET为对照组。结果:研究组Gn用量、用药时间、注射HCG日E2水平、获卵数、受精数、卵裂数与对照组比较差异无显著性(P>0.05);而研究组种植率、临床妊娠率明显高于对照组,差异有显著性或非常显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:子宫内膜异位囊肿腹腔镜或穿刺术后采用改良超长降调节方案行IVF-ET,为患者节约了再次降调节的费用,且IVF-ET成功率得到极大的提高,是子宫内膜异位症患者行IVF-ET值得推荐的超排卵方案。

双阳离子有机膨润土吸附处理水中有机物的性能

分别用长碳链季铵盐（ 如溴化十二烷基三甲铵、溴化十四烷基苄基二甲铵、溴化十六烷基三甲铵、溴化十八烷基三甲铵） 和短碳链季铵盐（ 如溴化四甲基铵） 按一定配比混合改性膨润土，制得一系列双阳离子有机膨润土．研究了双阳离子有机膨润土吸附水中对硝基苯酚、苯酚、苯胺的适宜条件、性能、作用机理．结果表明，双阳离子有机膨润土的层间距、有机碳含量和对有机物的吸附性能与改性时长、短碳链季铵盐的组成及配比有关，水中有机物的去除效果还与其本身的性质有关；所用的双阳离子有机膨润土对有机物的吸附符合 Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ 或 Ｌａｎｇｍｕｉｒ 等温式，是表面吸附作用和分配作用共同作用的结果．

来曲唑促排卵治疗的临床观察

目的观察来曲唑（LE）促排卵治疗的临床疗效.方法符合标准的患者67例服用LE治疗,记录卵泡发育、子宫内膜生长、宫颈黏液性状等指标,并与同期使用克罗米酚（CC）治疗患者进行比较.其中22例CC反应不良患者采用自身对比.结果LE促排卵治疗67个周期中42个周期有优势卵泡发育（62.7%）,35个周期在注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）48～60 h内破裂排卵（排卵率83.3%）,卵泡期13.76 d,平均1.07/周期卵泡成熟,10个周期的子宫内膜出现明显的三线征（A型内膜率23.8%）,宫颈黏液平均11.52分,1个周期发生黄素化未破裂卵泡综合征（LUFS）,未出现卵巢过度刺激综合征（OHSS）,2例妊娠（4.76%）.22例CC反应不良患者服用LE后有13例发育出优势卵泡,LUFS和内膜＜7 mm各1例.结论LE有促卵泡生长的作用,并对CC反应不良患者有一定疗效;成熟卵泡破裂排卵率高,对生殖系统及全身的副反应小.

生长激素辅助促排卵对卵巢低反应患者体外受精-胚胎移植结果的影响

【目的】探讨生长激素(GH)辅助促排卵治疗对预测卵巢低反应患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结果的影响。【方法】选择2004年1月至2005年12月在本院生殖中心接受体外受精-胚胎移植88例卵巢低反应型患者,56例使用改良的短方案促排卵为对照组,32例使用改良的短方案同时加用生长激素辅助促排卵为研究组,分析其GH用量、获卵数、受精率、卵裂率、种植率、临床妊娠率。【结果】本中心行体外受精-胚胎移植治疗周期卵巢低反应型占8.51%,研究组Gn用量、用药时间略低于对照组,注射HCG当日E2水平、获卵数、受精率、卵裂率、种植率略高于对照组,但两组比较均差异无显著性(P>0.05);而研究组临床妊娠率明显高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。【结论】GH辅助促排卵治疗卵巢低反应患者可减少无可移植的胚胎周期,临床妊娠率有显著提高。

浅谈铜及铜合金的自动化清洗技术

为了解决铜及铜合金手工强酸清洗存在的问题,如工件变形和厚度一致性差、环境污染大、成本高及生产效率低等问题,研究了铜及铜合金的自动化清洗生产方式、处理流程和工艺配方。结果表明:采用自动化弱酸清洗工艺,工件质量和生产效率均得到明显提高,生产成本却大幅降低。