绿脓杆菌所致感染症的现状及其初析

绿脓杆菌在自然界和人体分布很广,1882年由Gessard首次分离,1890年Charrin确认为具有致病性,但绿脓杆菌感染症在青霉素与磺胺药问世以前其发病率很低,随着抗菌药物的广泛应用,临床上引起感染症的病原菌也发生了变化。近年来,一些被认为致病力比较低的革兰氏阴性杆菌所致的感染症明显增加。据国外报导,绿脓杆菌所致感染症仅次于大肠杆菌。

4年中海口地区产超广谱β-内酰胺酶阳性菌检测及其耐药性分析

目的为了了解海口地区产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)阳性菌的种类、分布及其耐药性,为控制其扩散、暴发流行和指导临床治疗提供科学依据。方法采用常规KB琼脂扩散法和双纸片琼脂扩散法,测定4年中从临床各类标本分离的革兰阴性菌的抗药性和ESBLs,探讨菌种、病房、标本间ESBLs阳性率差异及菌株的多重耐药模式。结果产ESBLs的菌种已达28种,总阳性率41.63%;ESBLs阳性率在病室间存在一定差异,以心血管内科最高,五官、耳鼻喉最低(χ2=32.817,P<0.05);从血、分泌物、脓液、清洁中段尿、痰标本中分离菌株的ESBLs阳性率较高,大便、精液前列腺液中分离菌的阳性率较低(χ2=26.582,P<0.01);ESBLs阳性菌株的多重耐药现象较普遍,除开耐β内酰胺类抗生素外,以耐氯霉素和阿米卡星相对较多,且对含β内酰胺酶抑制剂的复合抗生素,如果使用时间长,也能产生较高的耐药性。结论ESBLs阳性菌已在海口地区广泛存在,并已成为本地区主要的病原菌,且其耐药谱广,多重耐药严重,控制其进一步发展已成为一项迫在眉睫的工作。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的两种新SCCmec型别及其抗药性研究

为探明本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的耐药性、流行病学分布状况及携带的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)型别,用K-B琼脂扩散法、E-test和多位点PCR,对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行了SCCmec分型及耐药性测定。结果发现了两种新的SCCmec型别,新1型含Ⅱ型的mecA上游特异性位点B和位于mecA内的M位点以及Ⅲ型的下游位点F,缺乏Ⅱ型上游位点C和下游位点D、G;新2型含Ⅰ、Ⅱ型的上游特异性位点A、B和两个Ⅲ型的下游位点F、H,同样缺乏位点C、D、G,可能分别为原有Ⅱ型和Ⅰ、Ⅱ型与Ⅲ型的基因重组株;且携带有新SCCmec型别的MRSA菌株,其流行病学分布特点及抗药性也与国外已报导的菌株不同,多分自门诊病人,且耐药性高,抗药谱广,值得引起高度重视和关注。

铜绿假单胞菌ESBLs检测及其流行病学分析

目的 为了解本地铜绿假单胞菌的耐药性及其分布情况 ,为控制和预防其流行提供科学依据。 方法 采用双纸片琼脂扩散法 ,测定 2 0 0 0～ 2 0 0 3年从临床标本分离的铜绿假单胞菌的ESBLs检测及药敏结果 ,比较该菌在病房、标本间的检出率、ESBLs阳性率、耐药性差异及年间变化。 结果 铜绿假单胞菌在各年检出的革兰氏阴性病原菌中均居第二位或第三位 ,住院标本检出率为 15 9%是门诊标本检出率 6 1%的 2 6倍 ,以五官耳鼻喉科、放疗科、康复科、心血管内科、老干病房、呼吸内科、心胸外科的呼吸道、伤口创面分泌物检出率较高。ESBLs总阳性率为 3 6 3 % ,前三年逐年下降 ( 5 7 1%～ 6 7% ) ,2 0 0 3年又呈上升趋势 ( 71 4% ) ( χ2 =3 3 163 ,P <0 0 5 )。对临床常用的氯霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星等均产生了很高的耐药性 ,最高达 10 0 % ,且ESBLs阳性菌株的耐药率明显高于阴性菌 (P <0 0 5或 0 0 1) ;对复合抗生素优力欣也已产生了较高的耐药性 ,对碳青霉烯类抗生素———泰能 ,复合抗生素舒普深、特治星的耐药性目前较低。 结论 铜绿假单胞菌ESBLs阳性菌在医院广泛存在 ,对临床常用的抗生素有很高的抗药性 ;应加强重点科室物表、空气和ESBLs监测及常住病人痰标本的送检 。

海口地区患者泌尿生殖道感染病原谱及其耐药现状

目的 调查海口地区患者泌尿生殖道感染病原谱及其耐药现状。方法 采集近期海口地区门诊及住院病人泌尿生殖道标本 185份 ,同时进行一般致病菌、淋球菌、解脲脲原体、人型支原体和衣原体的分离培养鉴定及药敏试验。结果 一般致病菌、解尿脲脲原体、人型支原体和衣原体的阳性检出率分别为 :5 4.0 8%、32 .40 %、2 7.0 0 %和 8.11%。解脲脲原体耐药率最低的是美满霉素 ( 3.3% ) ,最高者是壮观霉素 ( 5 0 .0 % ) ;人型支原体耐药率最低的是强力霉素 ( 2 .0 % ) ,最高者是壮观霉素 ( 4 8.5 % )。主要致病菌金黄色葡萄球菌耐药率最低的是丁胺卡那霉素 ( 15 .4% ) ,最高者是青霉素 ( 10 0 .0 % )。结论 海口地区患者泌尿生殖道感染病原谱广 ,其耐药率高 ,临床治疗应依药敏试验用药才能取得满意疗效。

耐多药结核杆菌分离林KatG及inhA基因变异的研究

目的用直接测序法研究临床分离的多耐药结核杆菌的katG和inhA的基因变异机理。方法用未见报还katG和inhA基因中的片须为引物，PCR法扩增产物，克隆后大量制备质粒，经全自动测序系统测定其DNA序列。结果15株耐INH≥1ug/ml的细菌均有katG突变，主要为点突变。其中14株有463位和315位AA密码子改变。13个变异位点中，9个未见文献报告。关于inhA变异，在18个耐INH≥1ug/ml的菌株中，全部出现inhA基因变异，主要为点突变和缺失，其中又以单个位点变异为主。各菌株之间变异不同。耐式菌株中，katG和inhA同时出现变异的比例较大。结论结核杆菌耐药基因变异机理复杂，我国分离的多耐药结核菌株与国外的菌株上述二基因变异特点不同。

结核分支杆菌临床分离株多耐药特点研究

目的测定武汉和海口结核分支杆菌分离株对5种抗结核药的MIC并分析其耐药特征。方法BACTC技术和改良罗氏培基培养用于MIC的测定。结果66株结核随时INH，SM，PAS．EMB和RFP的耐药率分别是39．4％，24．2％．16．7％．24．2％和37．9％。武汉和海口分离株的耐药率无显著性差异（P＞0．05）。总耐药率为57．6％。多耐药率为42．2％。多耐药株占总耐药株的73．7％。多耐药菌株中，INH和RFP所占比例高；在耐INH和RFP的菌株中，大多数为多耐药菌株。结论耐药率和多耐药率高，结核菌的多耐药特征与其耐INH和RFP有关。

液体培养基快速分离结核杆菌的效果评价

目的 评估结核杆菌快速分离液体培养基的分离效果。 方法 采用传统的罗 -琴氏培养基与快速液体分离培养基平行对照分离临床标本 ,比较其分离阳性率 ,以评价其分离效率。 结果 液体培养基对 14 2份临床标本总的分离阳性率为 2 3 94% ( 3 4/14 2 ) ,对 12 5份痰标本的分离阳性率为 2 6 4% ( 3 3 /12 5 )。 3 8份标本用罗 -琴氏培养基和液体培养基进行平行接种 ,结果两者的分离阳性率分别为 10 5 3 % ( 4 /3 8)和 3 1 5 8% ( 12 /3 8) ,后者明显高于前者 (x2 =9 686,P<0 0 1) ;阳性结果出现时间 ,前者最早为 2 2d ,平均 2 5 5d ,后者最早 6d ,平均 12 67d ,两者差异有显著性意义 (t =1 90 3 1,P <0 0 5 )。

结核分支杆菌耐利福平基因rpoB变异机理及其检测的研究

目的研究耐利福平株结核分支杆菌rpoB基因变异及其PCR－SSCP检测方法。方法PCR法扩增rpoB基因．纯化克隆．大量质粒制备．经ABI377系统直接测序。结果17株多耐药结核菌，14株检测出rpoB基因变异。496（Arg），507（Gly→Asp），579（Ala→Gly）和583（Pro→Leu）密码子变异未见报道。全部为点突变，主要是错义突变。在511－533密码子区域变异只占66.7％。地区及耐药谱与rpoB变异无明显规律性。SSCP法检测rpoB的结果与之间测序法一致。结论在511－533之间的23个密码子外的变异比例高．结核菌耐RFP变异与此片断外的基因或其他基因突变有关。SSCP可用于结核菌耐RFP基因的检测。

结核分支杆菌耐异烟肼基因inhA突变的测序研究

目的 :对多耐药株结核分支杆菌的inhA基因进行测序分析。方法 :inhA片段为引物 ,聚合酶链反应扩增产物 ,克隆后制备质粒 ,直接测定DNA序列。结果 :在17个耐异烟肼菌株中 ,11株出现inhA基因变异 ,突变率为64.7%。主要为碱基置换和缺失 ,各菌株变异不同。katG和inhA同时出现变异的比例高。结论 :结核菌的耐异烟肼 (INH)和乙胺丁醇 (EMB)变异与inhA突变有关 。

117例女性生殖道支原体感染与药敏试验分析

目的了解女性生殖道支原体感染与药物敏感试验情况,以指导临床合理用药。方法采用美国其昌达生物高科技(上海)有限公司生产的支原体培养试剂盒对195例女性拟诊为生殖道支原体感染的患者进行培养及药敏试验。结果195份标本中,支原体阳性117例,阳性率60%,其中解脲支原体(UU)、人型支原体(MH)及UU+MH混合感染的阳性率分别为38.46%(75例)、3.08%(6例)、18.46(36例)。药敏结果显示:抗菌活性较强的药物有强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素。耐药性高的药物有林可霉素、壮观霉素等。结论女性生殖道支原体感染以UU为主,其次是UU+MH混合感染,临床上可将强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素作为女性生殖道支原体感染的首选用药。

海口地区超广谱β-内酰胺酶阳性菌检测及其流行病学分析

目的 为了解海口地区超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)阳性菌的种类及其分布 ,为控制其扩散、预防暴发流行提供科学依据。方法 采用双纸片琼脂扩散法 ,测定 3年中从临床各类标本分离的革兰阴性菌的ESBLs ,比较菌种、病房及标本间ESBLs阳性率差异。结果 产ESBLs的菌种已达 2 8种 ,阳性率最高达 6 0 % ,常见菌的阳性率均达约 5 0 % ,且 3年间的变化多数无统计学意义 ;ESBLs阳性菌分离率在病室间的差异不大 ,门诊患者相对住院患者较低 ,在标本间的分布存在一定差异。结论 ESBLs阳性菌已在海口地区广泛存在 ,并已成为医院及社区感染的主要病原菌 ,控制其进一步发展已成为一项迫在眉睫的工作。

结核分支杆菌耐多药株katG突变SSCP技术检测的研究

目的建立并评价PCR－SSCP检测结核分支杆菌耐药性基因突变的方法。方法根据katG基因易变区设计一对引物，PCR扩增，产物经沸点断裂成单键，经SDS－PAGE，比较电泳的位置。结果PCR检测结核菌DNA的灵敏度达到100个细菌／ml，与其它细菌和其他分支杆菌无交叉反应。30株敏感株和H37Rv的PCR产物经SSCP检测正常，20株耐异烟肼结核菌中，19株的PCR产物SSCP检测游异常电泳带，敏感性达95％。15株经DNA测序有点突变的菌株，全部出现异常电泳带，表明测序的结果与SSCP检测的结果有很好的一致性。结论SSCP技术是检测结核分支杆菌katG基因突变的较好方法。

结核分支杆菌inhA基因突变的测序研究

目的 对耐药结核分支杆菌的inhA基因进行测序分析以研究其变异的分子机制。方法 以inhA片段为引物 ,聚合酶链反应扩增H37Rv、耐药株和敏感株的inhA基因 ,产物克隆后制备质粒 ,ABI 377全自动核酸测序系统测定DNA序列。结果 在 17个耐异烟肼菌株中 ,11株出现inhA基因变异 ,突变率为 6 5 % ,其中 10株至少每株有 1个错义突变。变异主要为点突变 ,包括碱基置换和缺失。各菌株变异不同。katG和inhA同时变异的达 6 2 %。首次发现了 18个与结核分支杆菌耐INH和EMB特性有关的inhA基因位点。

耐药结核分枝杆菌基因变异研究

目的 研究耐多药结核分枝杆菌katG、inhA基因的变异机理。方法 用katG、inhA基因片段为引物 ,聚合酶链反应扩增产物 ,克隆后制备质粒 ,直接测定DNA序列。结果 15株耐异烟肼菌株均有katG基因突变 ,主要为点突变 ,其中 14株有 4 63位和 3 15位AA密码子改变。在 18个耐异烟肼菌株中 ,全部出现基因inhA基因变异 ,主要为点突变和缺失 ,以单个位点变异为主 ,各菌株变异不同。katG、inhA基因同时出现变异的比例高。结论 结核分枝杆菌耐药基因变异复杂 ,我国耐多药结核菌株与国外的菌株katG、inhA基因变异特点不同。

海口地区耐药金黄色葡萄球菌检测及其流行病学分析

了解海口地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)在医院环境中的分布及其阳性率变化.