抗核抗体间接免疫荧光试剂盒一致性评估

目的评估4种常见的HEp-2间接免疫荧光法(IFA)试剂盒检测抗核抗体(ANA)相关风湿免疫病(AARD)患者和非自身免疫性疾病(NAD)患者样本的一致性。方法实验分为2个阶段。阶段1随机抽取134例2023年1月至6月在上海交通大学医学院附属新华医院进行IFA检测ANA的患者血清样本,使用4种试剂盒检测并评估定性结果,其中阳性率最高的定义为试剂X;阶段2选择在同期患者的样本中经试剂X初筛后结果为阳性的共计554例样本(218例AARD、336例NAD),再使用其他3个HEp-2 IFA试剂盒检测,记录核型和滴度,并建立半定量评分体系,评估ANA核型的重现性及不同临床性质、不同荧光强度、不同阳性反应部位下结果的一致性。结果4种试剂盒的定性结果间差异无统计学意义(P>0.05),其中m试剂的阳性率最高(45.86%),作为初筛试剂X。ANA核型重现性存在显著差异,其中着丝点型、颗粒型重现性优于均质型、致密颗粒型、核浆混合型和其他混合型(P<0.05)。单纯核型的重现性优于混合核型(P<0.05)。在核质部位,AARD组一致性评分高于NAD组(P<0.01)。各反应部位的一致性评分均随着反应强度的增强而增加,在核质、核仁、赤道板3个反应部位中,弱荧光强度和强荧光强度间差异均有统计学意义(P<0.001),胞质部位一致性评分最低。结论临床在解读IFA ANA报告时,对弱荧光强度、混合核型、胞质部位阳性的结果应更加谨慎。实验室在选择试剂时应注意抗人免疫球蛋白对结果的影响。制定HEp-2 IFA试剂盒制造的标准化官方指南可能是提高一致性、促进结果互认的关键举措。