miR-182调控RECK信号通路在非小细胞肺癌进展中的作用

目的探讨miR-182在非小细胞肺癌(NSCLC)发展中的作用及其相关机制。方法采用实时定量PCR检测NSCLC细胞系以及30组配对的NSCLC患者癌组织和癌旁组织样本中miR-182的表达水平。在NSCLC细胞株A549和H1299中过表达miR-182后,测定细胞增殖活性及侵袭转移能力。利用荧光素酶活性实验鉴定miR-182的预测靶基因(RECK)。采用qRT-PCR和Western blotting分别检测转染miR-182类似物和miR-182抑制物后RECK mRNA和蛋白的表达水平。结果miR-182在NSCLC细胞系和癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,在伴淋巴结转移的肺癌患者癌组织中的表达水平明显高于不伴淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.01)。过表达miR-182可增强NSCLC细胞株A549和H1299的增殖、侵袭和迁移能力。双荧光素酶实验结果表明,RECK的翻译水平受miR-182直接调控。qRT-PCR和Western blotting 检测结果表明,转染miR-182类似物后,RECK表达水平降低,转染miR-182抑制物后,RECK表达水平升高。结论miR-182可调控RECK的表达,促进NSCLC的进展。

纳米壳聚糖递送分子信标成像肺癌细胞的研究

目的采用纳米技术和分子信标(MB)技术,研究纳米壳聚糖(CS)作为miR-155 MB载体用于肺癌细胞成像的效果。方法设计并合成锁核酸修饰的miR-155 MB,采用自组装方法合成纳米壳聚糖分子信标复合物(CS-MB)并对其抗DNaseⅠ特性、粒径大小、zeta电位等理化性质进行检测。以CS作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌细胞中的miR-155的识别能力并进行成像,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)进行进一步验证,以随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照。结果按照7:1的质量比合成的CS-MB,其包封率高,能抵抗DNaseⅠ的降解,粒径小,带正电荷,适合基因转染。CS转染miR-155 MB后可在肺癌细胞中看到较强的红色荧光,RS MB组未检测到荧光信号(P<0.05),且荧光信号强弱趋势与实时荧光定量PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论 CS可作为miR-155 MB载体检测肺癌细胞中miR-155的表达并进行肺癌细胞成像,为肺癌的诊断提供了新思路和新技术。

利用分子信标检测microRNA并成像肺癌干细胞的实验研究

目的利用miR-155分子信标(MB)检测CD133+CD326+肺癌干细胞(LCSCs)中高表达的miR-155并成像肺癌干细胞。方法采用对A549细胞逆向诱导及紫杉醇富集的方法,通过流式细胞仪从A549细胞中分选出CD133+CD326+细胞,并对其干性进行鉴定。以壳聚糖纳米(CS)作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦显微镜检测miR-155 MB对LCSCs中miR-155的识别功能并成像,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步验证。结果分选的CD133+CD326+细胞在干细胞培养基中成球生长,干性相关基因CD133、CD326、OCT-4、Nanog表达为A549细胞的3.27、3.39、6.01、3.42倍(P<0.05),在细胞数为1×104数量下仍具备成瘤能力。CS转染miR-155 MB后在A549及LCSCs中均可看到较强的红色荧光,以LCSCs中荧光信号最强(P<0.05),且荧光信号强弱趋势与qRT-PCR检测的miR-155的表达趋势较一致。结论利用miR-155 MB能够检测LCSCs中高表达的miR-155并使其成像,为监测并发现肺癌干细胞提供新思路。

降低鼻咽癌放疗患者重度放射性口腔黏膜炎发生率

目的降低鼻咽癌放疗患者重度放射性口腔黏膜炎发生率。方法成立多学科协作团队,通过现状调查、原因解析,明确了6项真因,针对性制定干预措施并执行,分别为:建立综合性评估体系,制定阶梯式干预方案,实施全维度提醒策略。结果鼻咽癌放疗患者重度放射性口腔黏膜炎发生率由56.67%降低至22.22%。结论开展品管圈活动可促进多学科协作团队管理,降低了鼻咽癌放疗患者重度放射性口腔黏膜炎发生率,使放疗中断率下降,提高了疗效和患者生活质量。

某电站发电机风洞运行环境温度偏高分析及处理

某电站发电机风洞内运行环境温度与其他流域电站相同机型相比温度明显偏高,环境温度偏高会加速线圈绝缘老化,降低机组使用寿命,运维人员巡检时带来身体上的不适感。就产生的原因进行分析和论证,提出解决方案及具体可行措施。对定子固定挡风板、定子工艺孔进行技术改造,改造后环境温度明显降低,取得了显著效果。因此,为了降低风洞内环境温度,需要对运行的机组分别监测空冷器冷热风温度、定子上下端线棒温度、应力孔、地面温度进行分析,找到问题的根源并采取可行方案进行处理。

局部晚期鼻咽癌辅助化疗的临床疗效分析

目的评价同步放化疗(concurrent chemoradiotherapy,CCRT)联合辅助化疗(adjuvant chemotherapy,AC)对局部晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的临床疗效。方法纳入2011年4月至2019年1月在陆军军医大学第二附属医院肿瘤放疗中心初治的局部晚期NPC患者318例,根据CCRT后是否行辅助化疗分为辅助组(n=202)和未辅助组(n=116),对比分析辅助化疗对局部晚期NPC患者的生存结局和不良反应。分层比较318例患者不同治疗方案[CCRT与CCRT+AC、诱导化疗(induction chemotherapy,IC)+CCRT与IC+CCRT+AC]的生存差异,分析辅助组与未辅助组配对后的99对患者在各临床指标亚组的生存差异。结果与单纯CCRT相比,CCRT联合辅助化疗有提高总生存时间(overall survival,OS)、无进展生存时间(progression-free survival,PFS)、无远处转移生存时间(distant metastasis-free survival,DMFS)、无复发生存时间(recurrence-free survival,RFS)的趋势;与IC+CCRT相比,辅助化疗(IC+CCRT+AC)有降低OS、PFS、DMFS、RFS的趋势。分层结果显示,辅助化疗有提高EBV阳性、N_(3)期、ⅣA期患者OS、PFS、DMFS、RFS的趋势,有提高T_(4)期RFS的趋势;两组患者在急性放射性黏膜炎、急性放射性咽炎和食管炎的发生上无差异;辅助组2级以上骨髓抑制发生率高于未辅助组(68%vs 55%,P=0.020)。结论局部晚期NPC同步放化疗后的辅助化疗未显著增加生存获益,但对于EBV阳性、N_(3)期、ⅣA期患者的OS、PFS、DMFS、RFS有获益趋势,对于T_(4)期患者有RFS获益趋势。

癌症患者疲乏相关性管理指南的质量评价及内容分析

目的对癌症患者癌因性疲乏(CRF)相关性管理指南进行质量评价和内容整合分析,以期为临床应用提供思路和参考。方法计算机检索相关数据库,由两名研究者独立筛选文献、提取资料,采用指南研究与评价工具(AGREEⅡ)对纳入指南进行质量评价,汇总CRF管理的各类推荐意见。结果最终纳入8篇指南,其中6篇来源于国外,指南各领域的平均得分为范围和目的57.64%、参与人员51.04%、严谨性50.39%、清晰性63.20%、应用性36.98%、独立性47.92%。推荐意见涉及管理规范、筛查评估、非药物干预、药物干预4个方面。结论纳入指南质量均为B级,推荐意见存在一定差异性。国内对CRF管理指南开发处于起步阶段,需借鉴国外最佳证据并合理本土化,进而指导CRF诊治和护理。

人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞PC9/ER的建立及奥曲肽改善耐药机制研究

目的探讨人肺腺癌耐厄洛替尼细胞系PC9/ER的耐药机制,及奥曲肽(OCT)改善PC9/ER耐药的可能机制。方法采用CCK-8法检测PC9/ER的耐药指数,奥曲肽(OCT)对PC9/ER改善耐药的倍数,Western bolt方法比较PC9、PC9/ER及OCT作用后PC9/ER细胞IGF-1R、p-IGF-1R、Akt、p-Akt的表达。实时荧光定量PCR法检测IGF-1,IGF-1R的mRNA表达量。酶联免疫吸附方法(ELISA)检测OCT作用后IGF-1的表达变化。结果 PC9/ER的耐药指数为10.4。厄洛替尼和OCT对PC9/ER的抑制作用增强,改善倍数为9.62。单独用药OCT可抑制PC9/ER细胞IGF-1,联合用药可抑制PC9/ER细胞IGF-1R、p-IGF-1R、Akt、p-Akt蛋白的表达。结论 OCT可通过抑制IGF-1,进而通过抑制IGF-1R、PI3KAkt信号通路来提高PC9/ER对厄洛替尼的敏感性。

基于分子信标技术对活细胞内miR-155检测用于肺癌诊断

目的探讨激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌活细胞中miR-155的识别成像功能。方法设计锁核酸修饰的miR-155分子信标(MB),同时设计不和任何序列结合的随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照;采用液相分子杂交试验验证其灵敏性和特异性,并进一步在肺肿瘤组织水平上验证。以纳米壳聚糖(CS)作为载体转染miR-155 MB,检测miR-155 MB对肺癌细胞中miR-155识别成像功能;同时采用miR-155抑制剂antagomir抑制miR-155的表达后检测miR-155 MB对肺癌细胞中miR-155的识别成像功能。结果液相分子杂交实验中miR-155+miR-155 MB组荧光强度为miR-155 MB组的58倍,RS+RS MB组荧光强度为RS MB组的43倍(P<0.05)。在肺鳞癌、腺癌组织中,激光共聚焦可检测到较强的荧光信号,阴性对照组未检测到明显荧光信号。纳米壳聚糖转染miR-155 MB后,可在肺癌活细胞中检测到较强的荧光信号,antagomir抑制miR-155的表达后,发现荧光信号明显降低(P<0.05)。结论利用分子信标技术可以实现通过识别肺癌活细胞中的miR-155并成像肺癌细胞,从而为发现肺癌细胞并用于肺癌诊断提供了新的理论基础。

奥曲肽偶联的壳聚糖纳米运输分子信标成像肺癌细胞的研究

目的设计并合成奥曲肽(OCT)偶联的壳聚糖(CS)分子信标(MB)纳米(CS-MB-OCT),研究CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体识别miR-155并更好地成像肺癌细胞。方法免疫荧光检测肺癌细胞生长抑素受体2(SSTR2)的表达,以戊二醛为交联剂共价连接CS和OCT中的氨基并合成CS-MB-OCT,检测其吸收光谱、粒径等理化性质。激光共聚焦检测CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体对肺癌细胞中miR-155的识别功能并成像肺癌细胞;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行验证,并通过荧光信号强度比较CS-MB及CS-MB-OCT的成像功能差别。结果免疫荧光检测发现,SSTR2在肺癌细胞中表达,可和OCT特异性结合。按质量比为4:7合成的CS-MB-OCT,其连接率高,平均纳米粒径(83.41±0.95)nm,粒径范围40-140 nm,适合基因转染。荧光成像表明,OCT偶联的CS-MB-OCT能和肿瘤细胞表面的SSTR2特异性结合,促使更多的MB对肺癌细胞中miR-155识别并成像肺癌细胞,和非偶联OCT的CS-MB组相比,孵育时间更短(仅需1 h),荧光信号更强(P<0.05),荧光信号强弱趋势与实时qRT-PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论合成的CS-MB-OCT纳米能和SSTR2特异性结合,更好地对miR-155进行识别并成像肺癌细胞,为肺癌的早期诊断提供了新方法。

现代放射治疗的多维度特征及其智能化发展

现代放射治疗在肿瘤治疗中发挥重要作用,新型放疗手段和各种学科融合层出不穷,是越来越活跃的领域。随着图像引导、自适应放射治疗、人工智能集成、重粒子治疗和Flash超高剂量率等先进技术快速发展,现代放疗呈现出多种特点:放射治疗的复杂性和多元性,放疗数据的多样性和多模态,放疗技术的高精度、快捷性、实时性和功能性,以及放疗技术的多学科融合、人工智能化。人工智能在肿瘤放疗靶区和危及器官智能化自动化勾画、建立放射治疗计划模型、建立远程智能化质控系统的应用正如火如荼。这些现代放疗的多维度、多模态、大数据的独有特征,以及基于“互联网+放疗”、“人工智能放疗”和“共享放疗”的新服务模式,推动放疗技术向着数字化、自动化、智能化的方向进步和发展。

球囊扩张治疗鼻咽癌放疗后吞咽障碍2例并文献复习

目的分析球囊扩张治疗鼻咽癌(NPC)放疗后吞咽障碍的临床效果,同时提高对该病的认识。方法收集两例放疗后食管上括约肌(UES)不完全开放导致吞咽障碍的NPC患者,给予球囊主、被动扩张治疗,并采用进食评估问卷调查(EAT-10)、吞咽造影检查(VFSS)和功能性经口摄食量表(FOIS)评估疗效。结果治疗后,病例1的EAT-10评分由35分降至4分,VFSS评估由不完全开放变为完全开放,FOIS评分由2级提高为7级;病例2的EAT-10评分由40分降至18分,VFSS评估结果未变(不完全开放),FOIS评分由0级提高为4级。两例患者症状和功能均明显好转。结论球囊主被动扩张能有效治疗NPC放疗后UES狭窄导致的吞咽障碍。