酶联免疫吸附方法分析海水和贝类中的滴滴涕及代谢物

采用间接竞争酶联免疫吸附分析（Ind irect Competitive Enzym e-linked Immunosorbent Assay,ELISA）方法测定海水样品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕及其主要代谢产物的含量。采用碳二亚胺法,将半抗原DDA分别与载体蛋白牛血清白蛋白（Bovine serum album in,BSA）和卵清蛋白（Ovalbu-m in,OVA）偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DDA-OVA作为免疫抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,免疫数次后,测定血清中抗体效价。以DDA-BSA为包被抗原,免疫多克隆抗血清为多克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附方法分析检测海水样品和海洋贝类中的有机氯农药二氯二苯三氯乙烷（DDT）及其代谢产物2,2-双（4-氯苯基）乙酸（DDA）、2,2-双（4-氯苯基）-1,1-二氯乙烷（DDD）、2,2-双（4-氯苯基）-1,1-二氯乙烯（DDE）的方法。最低检出限分别为DDT：25 ng/m l,DDA：1.56 ng/m l,DDD：25 ng/m l,DDE：25 ng/m l。贝类样品DDA回收率为96.37%~100.88%,批内变异系数为2.28%～5．13％；贝类样品DDT回收率为93．86％～100．08％，批内变异系数为4．71％～7．68％；海水样品DDT回收率88．23％，批内变异系数6．60％。

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究

腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/mL(0.96纳克/条)。

腹泻性贝毒软海绵酸单克隆抗体的制备和酶联免疫检测方法的建立

采用细胞融合技术制备抗赤潮毒素腹泻性贝毒软海绵酸的单克隆抗体,应用此抗体发展建立了软海绵酸的间接竞争酶联免疫检测方法。采用碳二亚胺法,将半抗原与载体蛋白偶联,得到免疫抗原和包被抗原。免疫BALB/c小鼠,用免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,ELISA方法筛选阳性克隆,经多次克隆化,获得了4株能稳定分泌抗软海绵酸单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过小鼠体内诱生腹水方法获得单克隆抗体,建立分析检测软海绵酸的间接竞争酶联免疫方法。最低检出限为31.2ng/ml,批内平均变异系数8.1%,回收率为87%-112%。

胶体金免疫层析方法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的初步研究

建立了赤潮毒素腹泻性贝毒软海绵酸的快速胶体金免疫层析检测方法。通过细胞融合,制备抗软海绵酸单克隆抗体,胶体金标记抗体,建立快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。检出限500 ng/mL(50 ng/条),探讨了影响测试方法的因素和提高灵敏度的可能手段。

饲料中黄曲霉毒素B_1快速检测试剂盒的研制与应用

建立一种简单、快速、灵敏、准确的黄曲霉毒素B1的ELISA检测方法,并使其在饲料检验中广泛应用。在生产抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出饲料中黄曲霉毒素B1快速检测试剂盒。该试剂盒对黄曲霉毒素B1最低检出浓度为0.05 ng/mL,标准曲线的线性范围为0.05~2.00ng/mL;对3种饲料做3个加标水平添加回收率试验,回收率在79.5%~106.2%之间。

虹鳟鱼三倍体的育种技术

虹鳟鱼(salmo irideus)是鲑科鱼类中适应性很强的冷水性鱼类.虹鳟鱼原产于美国加利福尼亚西海岸夏思塔山的山涧溪流中,为陆封性的淡水鱼类.自1874年经人工移植驯化,现在已在世界各地进行养殖.

人工智能赋能互联网医疗高质量发展研究

人工智能对于互联网医疗高质量发展具有深刻意义。当前互联网医疗相关政策不断完善,应用范围不断延伸,但在其发展过程中也存在医疗法律监管缺失、医疗诊后供给不足以及医疗信息系统亟待完善等问题。因此,提出未来应加强人工智能协同法律监管、保护个人隐私,加强互联网医疗诊后平台搭建、引进医疗“虚拟助理”,推动人工智能赋能医疗信息系统、建立高效安全的信息共享体制等建议与策略,以推动互联网医疗高质量发展。

抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及ELISA检测试剂盒的研制

制备并鉴定抗玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体杂交瘤细胞株,研制检测谷物中ZEN的ELISA检测试剂盒。将ZEN肟化成ZEN-6-CMO,ZEN-6-CMO在DCC与NHS作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联合成完全抗原。以ZEN-6-CMO-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,用ELISA筛选并建立分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株。测定单抗免疫球蛋白亚类、单抗效价及特异性。在ZEN单克隆抗体(Z9C3)的基础上,用间接竞争ELISA研究试剂盒的各项指标。试验结果表明:建立了2株稳定分泌抗ZEN抗体的杂交瘤细胞株(Z9C3和Z7E6),该细胞株所分泌的单隆抗体Ig亚类均为IgG1,ELISA检测结果表明:抗ZEN抗体可与ZEN发生特异性反应,IC50为3ng/mL和1.3ng/mL,该抗体与玉米赤霉醇(ZEL)的交叉反应分别为15.9%和9.8%。试剂盒最低检出质量浓度为0.5ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～50ng/mL;对玉米和小麦的平均添加回收率分别是92.5%和91.7%,变异系数分别是8.5%和10.5%。

莱州湾船舶航行富余水深的研究

莱州湾是渤海湾南部的重要水域,是进出天津港、黄骅港、潍坊港的重要航道。为确保进出该水域船舶的航行安全,根据现有国内外船舶航行水深参考标准及船舶航行富余水深的影响因素,并参考芳村公式和诺宾(Norbin)公式对船舶的下沉量进行计算,在计算富余水深时同时考虑风浪中船舶的最大纵横倾角的影响。莱州湾船舶航行富余水深的建议值为船舶吃水量的7.9%,为驾驶员科学合理地规划航路和有关主管机关确定该航区的通航标准提供了主要依据。

人因因素海难事故致因组合模式仿真预测研究

在海运高度发达的新时代,海上交通事故频发,为解决目前海上交通尚未深入到海事事故诱发因素预测难题,采用建立“瑞士奶酪”模型原理的方法,合理利用海上交通事故信息及诱发事故因素的内在机理,结合HFACS方法,建立系统的人因因素海上交通事故诱因分体系,挖掘数据技术人因因素致因海事事故组合模式,利用Bootstrap法对青岛海域人因因素海事诱发因素组合模式仿真预测,预测结果和实际发生海上交通事故相符。实践证明,人因因素海难事故仿真预测,具有针对性的提出防控重点,为船舶航行安全提供了理论依据。

船舶碰撞风险因素分析研究

针对海上船舶碰撞原因复杂程度大且各影响因素关联度大的特点,为了海上航行船舶减少船舶碰撞风险,提出利用耦合效应的船舶碰撞原因影响因素辨别方法.通过航海专家事故原因分析问卷调查资料的二元语义评价2-可加模糊测度延伸处理,分析辨别船舶碰撞风险影响因素.分析结果为:单个影响因素分析,最大影响因素为气象与海况和航区船舶密度,任意两影响因素间耦合效应最大为气象与海况和航区船舶密度及气象与海况和海事部门监管.

黄曲霉毒素直接竞争法ELISA试剂盒的研制及其在花生和花生制品中的应用

本实验基于在黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,建立酶联免疫(ELISA)直接法检测花生及其制品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的含量。应用黄曲霉毒素抗体和酶标记的黄曲霉毒素建立酶联免疫直接竞争法。试剂盒最低检出浓度为0.5ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～10.0ng/mL;对花生和花生粕的添加回收率为70.0%～110.0%,变异系数小于20%。本实验制备的黄曲霉毒素试剂盒能够应用于花生及其制品的检测,酶联免疫直接法是一种简单、快速、灵敏、准确的检测方法。

DcELISA检测泥鳅、鲫鱼中氯霉素残留方法的应用

应用直接竞争酶联免疫吸附试验方法(dcELISA)快速定量测定泥鳅、鲫鱼肌肉中氯霉素(CAP)残留量。氯霉素浓度在0.05～10ng/g范围内具有良好的线性关系,线性方程为y=-0.33-1.88x,r^2=0.995,向样品中分别添加0.1、0.3、0.9ng/g三个浓度水平的氯霉素标准品,泥鳅样品的平均回收率分别为87.2%、88.9%、93.0%。鲫鱼样品的平均回收率分别为86.1%、79.9%、99.0%,最低检测限为0.05ng/g,批内变异系数为8.0%,批间变异系数为7.2%,结果表明该方法灵敏度高,重复性好,适合在泥鳅、鲫鱼肉样中氯霉素残留筛选检测。

肠衣中醋酸甲羟孕酮残留ELISA检测方法的应用

〔目的〕为醋酸甲羟孕酮残留检测提供一种快速、灵敏的分析方法。〔方法〕利用MPA-BSA免疫新西兰大耳白兔获得抗醋酸甲羟孕酮的多克隆抗体。建立了MPA的ciELSIA方法,并对肠衣样品进行了样品添加回收试验。〔结果〕MPA浓度在0.4～50ng/ml范围内具有良好的线性关系,线性方程为y=6.29-1.7!,r2=0.9995,IC50为3.7ng/ml,向样品中分别添加1、2、5ng/g3个浓度水平的MPA标准品,回收率为85%～110%之间,变异系数为7.1%～9.9%,最低检测限0.8ng/g。药物交叉反应性试验符合要求。〔结论〕该ELSIA方法快速、灵敏、方便,满足了醋酸甲羟孕酮残留检测的要求。

抗T-2毒素单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备并鉴定抗T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,以期为T-2毒素的快速检测提供有力的抗体工具。方法:采用琥珀酸酐法将T-2毒素活化为T-2HS,T-2HS在DCC与NHS作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联合成完全抗原。以T-2HS-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,用ELISA筛选、建立分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株。测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价,用间接竞争法检测单克隆抗体细胞株的特异性。结果:建立了1株稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株T-1B3,该细胞株所分泌的单隆抗体Ig亚类为IgG1,ELISA检测结果表明抗T-2毒素抗体可以与T-2毒素发生特异性反应,工作浓度为1:6.5×104,IC50为3.6 ng/ml。该抗体与HT-2毒素的交叉反应为65.9%,与黄曲霉毒素无交叉。结论:制备出能分泌具有较高特异性和亲和力的抗T-2毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

dcELISA检测泥鳅、鲫肌肉中氯霉素残留方法的应用

应用直接竞争酶联免疫吸附试验方法(dcELISA)快速定量测定泥鳅、鲫肌肉中氯霉素(CAP)残留量。氯霉素浓度在0.05～10 ng/g范围内具有良好的线性关系,线性方程为y=-0.33-1.88x,r^2=0.995,向样品中分别添加0.1、0.3、0.9 ng/g 3个浓度水平的氯霉素标准品,泥鳅样品的平均回收率分别为87.2%、88.9%、93.0%,鲫样品的平均回收率分别为86.1%、79.9%、99.0%,最低检测限为0.05 ng/g,批内变异系数为8.0%,批间变异系数为7.2%,结果表明该方法灵敏度高,重复性好,适合在泥鳅、鲫肉样中氯霉素残留筛选检测。