大鼠尿素转运蛋白B基因克隆及真核表达载体的构建

目的克隆sD大鼠尿素转运蛋白B（ureatransporterB，UT-B）的CDS全长基因并构建其真核表达载体。方法从SD大鼠肾髓质中提取总RNA并经逆转录反应获取总cDNA，以cDNA为模板，PCR扩增UT-B基因的CDS区全长片段，PCR产物加＂A＂尾后克隆至pMD-18T克隆载体，双酶切后获取UT-B片段，T4DNA连接酶将UT-B片段与KpnI和BamHI双酶切后的真核表达载体pcDNA3-1（-）连接，构建大鼠UT-B真核表达载体pcDNA3．1（-）-UT-B。结果成功克隆了sD大鼠UT-B基因，构建的pcDNA3．1（-）-UT-B载体经PCR扩增、KpnI和BamHI双酶切鉴定及测序验证，表达载体包含UT-B基因，且UT-B碱基序列与GeneBank中收录的大鼠UT-B序列-致。结论成功克隆了该基因并构建了其真核表达载体pcDNA3．1（-）-UT-B，为进-步进行UT-B基因转染治疗尿毒症的研究奠定了基础。

慢性心力衰竭急性发作院内死亡相关危险因素的研究

目的 对因慢性心力衰竭急性发作而入院患者的院内死亡率及与其相关的危险因素进行分析,旨在找出有价值的预警指标指导临床实践.方法 对434例慢性心力衰竭急性发作患者进行回顾性分析,检测其入院时的各项指标,包括性别、年龄及入院后的第一次临床检查和实验室检查指标.结果 慢性心力衰竭急性发作的院内死亡率为11.9%;发现6个与院内死亡率相关的危险因素：冠心病史（OR值1.845,95%置信区间1.016～3.351）、高钠血症（OR值3.631,95%置信区间1.571～8.391）、低钠血症（OR值2.310,95%置信区间1.133～4.713）、高钾血症（OR值3.188,95%置信区间1.542～6.590）、血尿素氮升高（OR值3.450,95%置信区间1.699～7.005）和血肌酐升高（ OR值2.334,95%置信区间1.256～4.339）.结论 既往冠心病史、合并肾功能不全、异常血钠、高钾血症提示慢性心力衰竭患者预后不良.

床边快速超声检查对胸腹部闭合性创伤患者的诊断价值

目的：研究床边快速超声检查（ focussed assessment sonograph trauma,FAST）对胸腹部闭合性创伤患者的临床价值。方法选取本院收治的胸腹部闭合性创伤患者64例,对患者进行胸腹部 CT 检查与FAST检查,研究FAST检查的临床诊断价值。结果 FAST检查耗时1.4-5.9分钟,平均（3.4＆#177;1.2）分钟；CT所需的时间为16-58分钟,平均（28.9＆#177;13.1）分钟。 FAST检查时间显著优于CT检查时间。 FAST检查的敏感性为99.89%,特异性为82.14%,阳性预测值为86.49%,阴性预测值为85.19%,假阳性率为13.51%,假阴性率为14.81%,准确性为85.94%。 FAST检查的受试者工作特征（ROC）曲线下面积为0.73,准确度极高。结论 FAST检查对胸腹部闭合性创伤患者具有极高的敏感度,并且诊断迅速,能够对胸腹腔内存在游离液体进行诊断,还能初步判断有无明显气胸,临床上对急诊患者具有一定的意义。

重症急性胰腺炎的早期综合治疗

目的探讨重症急性胰腺炎的早期综合治疗方法,以提高治愈率,降低并发症和死亡率。方法回顾分析28例重症急性胰腺炎的诊治过程,分析早期综合治疗的临床疗效。结果 24例治愈,4例死亡;连续性血液净化组早期临床表现改善明显。结论重症急性胰腺炎的早期个体化综合治疗尤为重要,早期阻断全身性炎症反应综合症的发生能明显改善患者的预后。

对急诊管理方法的思考与尝试

急诊是医院的重要窗口，随着社会的进步、人民生活水平的提高，人们对医院的医疗服务质量也提出了更高的要求。急诊患者往往病情重、变化快，从事急诊工作的医护人员在掌握大量先进设备和技术应用的同时，而且还要有良好的医患沟通能力和法制意识。本文是作者通过思考在急诊管理方法上所做的尝试。

我国上市公司可转债定价及实证研究

可转债是由债券和奇异期权组成的混合金融衍生工具。文章运用蒙特卡洛模拟方法模拟股价运动路径并在此基础上为可转债定价。其中,运用GARCH(1,1)模型对股票价格的波动率进行动态刻画,并考虑了利率的期限结构和违约风险对贴现率的影响。实证结果表明,此模型对可转债的定价表现较好。

大鼠UT-B重组腺病毒载体的构建及体外转染Caco-2细胞后基因表达

目的采用GatewayTM技术构建含大鼠尿素转运蛋白B(Urea transporter B,UT-B)和增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fuorescent protein,EGFP)的重组腺病毒载体,并以该载体体外转染Caco-2细胞,观察Caco-2细胞内UT-B的表达。方法分别以pMD18-UT-B和IRES2-EGFP质粒为模板,PCR扩增UT-B和IRES-EGFP序列,通过引物重叠区进行PCR拼接,并在UT-B-IRES-EGFP两端引入attB1、attB2重组臂序列。PCR产物经BP重组系统将UT-B-IRES-EGFP融合基因重组到入门载体pDONR221中,构建入门克隆。入门克隆与表达载体pAD/CMV/V5-DEST使用LR重组系统进行体外重组,构建表达克隆pAD-UT-B-IRES-EGFP,pAD-UT-B-IRES-EGFP转化DH-5α,筛选阳性克隆,PCR及测序验证。pAD-UT-BIRES-EGFP用Pac I酶切线性化后由Lipofectamine 2000介导转染293A细胞,包装病毒,收集病毒液并测定滴度。重组的腺病毒体外感染培养的Caco-2细胞,RT-PCR观察Caco-2细胞中UT-B mRNA的表达。结果成功构建了pAD-UT-B-IRES-EGFP载体,经PCR及测序验证,表达载体包含UT-B基因,且序列与GeneBank中收录的大鼠UT-B序列一致。重组的腺病毒感染Caco-2细胞后可检测到UT-B mRNA的表达。结论利用GatewayTM系统成功构建了包含UT-B和IRES-EGFP的腺病毒表达载体,为进一步研究其功能奠定了基础。

关于高校素描教学创新的措施与思考

随着高校基础素描教学改革的不断深入,传统的素描教学体系已经不能满足当代中国艺术教学的要求,需要不断改进创新,以更好地促进艺术教学的发展。通过论述传统素描教学模式在新时期素描教学中的弊端和负面影响,提出学习国画、书法、民间艺术、文学、音乐等相关学科,以解决素描教学中存在的问题,这是对基础素描教学的有益补充。

梦为男生

恨不能是男儿身……蒙胧中我如愿了。帅帅的酷酷的我走进了初三(3)班的教室。首先是有几分张扬的自我介绍:“我叫陈亮,花季,拥有道明寺的执著,花泽类的身高,美作的微笑,西门的品位。擅长所有学科,爱好篮球。还有,我将成为年级的头号人物,取代眼下的年级第一。”

急性肾损伤患者连续肾脏替代治疗预后因素分析

目的分析急诊重症监护室(emergency intensive care unit, EICU)内行连续肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy, CRRT)的急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)患者的预后危险因素。方法采用回顾性研究方法,收集2012年5月至2016年12月在上海交通大学医学院附属新华医院EICU住院并行CRRT治疗的138例AKI患者的临床资料。根据患者住院28 d的存活情况,分为死亡组(58例)和存活组(80例),采用多元logistic回归分析两组患者的临床资料,分析影响患者预后的危险因素。结果138例患者中有58例死亡,病死率为42.0%。与存活组相比,死亡组年龄更大,男性更多,入院时急性生理与慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)和血乳酸值更高,既往有冠心病史以及使用机械通气和血管活性药物的比例更大,但入院时血清肌酐值较存活组低。多元logistic回归分析显示年龄(OR=1.064,95%CI:1.022~1.108,P=0.002)、APACHE Ⅱ评分(OR=1.127,95%CI:1.003~1.265,P=0.044)、机械通气(OR=7.432,95%CI:2.183~25.308,P=0.001)和使用血管活性药物(OR=24.558,95%CI:7.651~78.825,P<0.01)是影响EICU内需CRRT治疗的AKI患者预后的独立危险因素。结论高龄、高APACHE Ⅱ评分、行机械通气和使用血管活性药物是预测EICU内需CRRT治疗AKI患者的死亡危险因素。

急诊医师使用超声仪判断左心功能的准确性评价

目的探讨急诊科医生使用便携式超声评估左心室收缩功能的准确性。方法前瞻性、观察性研究，连续选取2011年11月至2012年2月期间以急性呼吸困难主诉收入上海交通大学医学院附属新华医院急诊科的81例患者，排除创伤和急性心肌梗死患者。4名急诊科医生经过强化超声心动图培训后，使用便携式超声仪对81例患者行床旁超声心动图检查，获取左胸骨旁长短轴、心尖四腔和剑突下二维图像，使用目测法估计左心室射血分数，将患者左心室收缩功能分为正常、轻中度减低和严重减低三个类别，与超声科医生的超声心动图测量结果相比较。使用SPSS13．0统计软件进行kappa检验来分析二者的诊断一致性。结果以超声科医生测量的左心室射血分数为“金标准”，急诊科医生区分左心室收缩功能正常和减低的准确率为89％，急诊科医生判断患者左心室收缩功能减低的阳性预测值为83％，阴性预测值为93％，急诊科医生和超声科医生诊断一致性检验kappa系数为0．77（95％CI：0．70～0．84，P〈0．01）。对左心室收缩功能三个不同类别的判断，急诊科医生的准确率为84％，诊断一致性检验kappa系数为0．71（95％CI：0．64—0．78，P〈0．01）。结论急诊科医生经过超声心动图强化培训后，使用便携式超声仪能够准确地评估左心室收缩功能。

血液灌流对急性中毒患者凝血功能的影响

目的探讨血液灌流(hemoperfusion,HP)对急性毒物中毒患者凝血功能的影响。方法急性毒物中毒患者32例均在洗胃、导泻、利尿及对症支持等常规治疗基础上行HP治疗,分别于第1次行HP前及行HP治疗后1,2h检测凝血酶原时间(prothrombin time,PT),部分凝血酶原时间(activated partial thromboplastin time,APTT),凝血酶原时间的国际正常化比率(international normalized ratio,INR)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB),D-二聚体(D-dimer,D-D)及血小板计数(platelet,PLT),并观察患者出血情况。结果 HP治疗1,2h时PLT均低于治疗前(P<0.05),治疗2h时PLT较治疗1h时增高(P<0.05);HP治疗2h时D-D水平与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);HP治疗1,2h时PT,APTT,INR,FIB与治疗前比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗过程中发生透析导管处渗血2例,消化道出血1例,血尿1例,口腔出血1例,皮肤大片瘀斑1例。结论 HP治疗可导致患者血小板计数下降,不影响其他凝血功能。

感染性心内膜炎16例误诊分析

目的:分析感染性心内膜炎(IE)的临床特点及误诊原因、防范措施。方法:对16例曾误诊的感染性心内膜炎的临床资料进行回顾性分析。结果:本组确诊前出现发热16例,咳嗽、咳痰等呼吸道症状10例,胸闷、气促5例,腹泻1例,头痛1例,腹痛1例;16例心脏听诊均可闻及心脏杂音。因发热、咳嗽、咳痰、胸闷、气促、腹痛、腹泻、头痛等被误诊为肺部感染8例,肺部感染伴心功能不全5例,胃肠炎1例,脑梗死合并肺部感染1例,脾脓肿1例。本组平均误诊时间9.4 d。本组按误诊疾病治疗后均效果不佳,后根据病史、临床表现、体格检查及心脏超声检查结果明确诊断IE,14例行手术治疗,2例为药物治疗,治疗2~3周后患者症状好转、生命体征平稳出院,门诊随访6~12个月,14例均预后好,2例死亡。结论:感染性心内膜炎临床表现多样,容易漏诊误诊。临床接诊发热患者特别是原因不明发热时,应加强心脏查体有助于诊断此病。加强病史询问及查体、及时完善相关检查是避免误诊误治的关键。