甲胺磷的核酸适体筛选

目的筛选识别甲胺磷的DNA适体。方法体外合成ssDNA文库,将其固相化于琼脂糖凝胶颗粒表面,液相中甲胺磷与其结合的DNA分子从固相表面分离,进而建立非固相化SELEX技术,最终获得识别甲胺磷的适体,采用DNAMAN和RNAstructure软件对适体进行一、二级结构分析。结果经过10轮筛选,ssDNA文库与甲胺磷的亲和力呈上升趋势,随机挑选的20个阳性克隆适体根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环结构为主。结论本方法大大提高了适体的筛选效率,最终筛选得到能识别甲胺磷的DNA适体。

PCR实验操作影响因素

聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction—PCR）是美国PE—Cetus公司的科学家K．B，Mulis于1985年发明的一项可在体外快速扩增特定基因或DNA序列的新技术[1]。

DNA适体筛选中双链DNA拆分方法研究

目的研究能够用于DNA适体筛选的双链DNA拆分方法。方法采用琼脂糖凝胶电泳,观察和比较λ核酸外切酶法、不对称PCR法、磁珠法以及琼脂糖凝胶法的拆分效果。结果琼脂糖凝胶电泳显示,λ核酸外切酶法不能充分拆分双链DNA形成单链DNA;不对称PCR法产生的非特异性单链DNA较多;磁珠法拆分双链DNA获得单链DNA的量较低,且成本较高;琼脂糖凝胶法拆分双链DNA较为充分,单链DNA纯度较高。结论琼脂糖凝胶法可用于DNA适体筛选中双链DNA的拆分。

安徽省某地一例人感染H5N1禽流感病例流行病学调查分析

目的 通过对安徽省某地一例人感染H5N1禽流感病例的调查分析,探索可能的感染来源以及暴露因素,为疫情防控提供科学依据.方法 采用现场流行病学调查和实验室检测相结合的方法,调查病例发病、就诊经过以及居住环境,排查密切接触者并进行医学观察,采集密切接触者及相关环境样本开展实验室检测.结果 确诊一例人感染H5N1禽流感病例,经救治于2023年3月16日出院.密切接触者均未出现发热等异常临床表现,禽流感病毒核酸检测结果均为阴性,未发现人传人证据.患者有病死禽接触史,患者家禽及其环境30份样本中经检测有7份H5阳性.结论 确诊病例的感染来源可能与其家中饲养的病死鸡有关,鉴于患者住宅离候鸟迁徙的中转地较近,不排除候鸟迁徙途中带入H5N1病毒导致患者家中饲养的鸡感染,后患者因意外暴露导致感染的可能.

安徽省安庆市涉禽外环境禽流感病毒监测分析

【目的】了解安徽省安庆市涉禽外环境中禽流感病毒污染情况,为预防控制人感染动物源性流感提供科学依据。【方法】采用单纯随机抽样方法,抽取安徽省安庆市10个县(市、区)共28家农贸市场/养殖场作为监测点。连续6周采集禽类粪便等相关标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测甲型流感病毒核酸,对阳性标本再进行H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸检测。【结果】共采样426份,检测阳性113份,阳性率为26.53%。其中H9亚型104份,占92.04%。主城区和非主城区阳性率的差异无统计学意义(χ^(2)<0.01,P>0.05)。不同周次采集的标本阳性率的差异无统计学意义(χ^(2)=7.57,P>0.05),但第3周与其他周次采集的标本阳性率的差异有统计学意义(χ^(2)=6.89,P<0.05)。不同采样场所中,养殖场阳性率最高,为46.67%。不同来源标本中,禽类笼具表面擦拭标本阳性率最高,为34.78%。【结论】安庆市涉禽外环境中存在禽流感病毒。应加强监测和风险评估,降低外环境中病毒含量,减少人感染动物源性流感的风险。