流行性感冒病毒裂解疫苗质量控制与稳定性研究

[目的 ] 研制安全有效的流行性感冒病毒裂解疫苗。 [方法 ] 将A1,A3和B三株流感病毒分别接种鸡胚 ,收取尿囊液 ,经乙醚裂解病毒 ,制成疫苗。 [结果 ] 该疫苗主要技术指标均符合WHO规程要求 ,并具有良好的免疫效果 ,同时稳定性试验取得令人满意的结果。 [结论

微载体系统中采用不同感染方法对麻疹病毒产量的影响

微载体系统培养麻疹的一个关键参数是病毒感染方式 ,实验采用间接感染、33℃直接感染、4℃直接感染等三种方式以比较病毒产量的影响。实验结果表明间接感染和 33℃直接感染方式所得收获液的滴度和收获量基本相同 ,而

Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养

目的探索Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养条件。方法在搅拌瓶中,选择合适的微载体,在无血清条件下培养Vero细胞和流感病毒。观察Vero细胞的生长状况,并检测流感病毒的血凝滴度。结果Vero细胞在Cytodex 3上生长最好,每个微载体上接种10个细胞为最佳接种浓度,以MOI=0.005和0.010 CCID50/细胞接种H1N1流感病毒后,在72h时,培养上清病毒血凝滴度达到最高。结论无血清条件下,Vero细胞在Cytodex 3上生长良好,流感病毒能在Vero细胞上成功培养。

麻疹疫苗转瓶培养多次收液生产工艺的探索

应用转瓶加病毒稳定剂培养麻疹病毒可连续收液8～12天，病毒滴度不变，疫苗的质量明显提高，且有利于质量控制和减低劳动强度等优点。用新配制的冻干保护剂可降低疫苗含水量。

国产水痘减毒活疫苗在免疫损害病人中的应用

目的观察国产Oka株水痘减毒活疫苗在急性白血病、实体肿瘤和接受免疫抑制剂治疗的免疫损害病人中的反应原性和抗体应答。方法国产Oka株水痘减毒活疫苗接种于3种免疫损害病人,用ELISA法检测免疫前和免疫后抗体水平,并观察副反应情况。结果接种疫苗的3种病人均无异常反应发生,仅有少数病人在观察期内有中强程度发热,其中以实体肿瘤病人略多。3种病人接种前多数抗体阳性,经疫苗免疫后,抗体滴度均有不同程度上升,正在使用免疫抑制剂者抗体滴度上升不明显。结论免疫损害病人接种国产水痘减毒活疫苗是安全有效的。

Vero细胞微载体培养乙型脑炎疫苗提纯方法的研究

首次应用国产20L Cellcul-20A型反应器和CT-2微载体Vero细胞培养乙型脑炎病毒。病毒液经福马林灭活后,澄清、浓缩、差速离心和除菌过滤,试制提纯乙型脑炎疫苗,抗原效价提高10倍以上,并建立提纯疫苗的检定方法。

流感裂解疫苗H3N2-抗H3N2免疫原性复合物滴鼻诱导小鼠黏膜免疫应答的研究

目的研究流感裂解病毒疫苗抗原抗体复合物滴鼻诱生小鼠黏膜免疫应答。方法分别以15μgH3N2、H3N2- CpG、H3N2-鼠抗H3N2及H3N2-PEG滴鼻免疫小鼠,检测肺泡灌洗液抗H3N2 IgA、血清抗H3N2 IgG效价。取免疫小鼠脾细胞,体外抗原刺激,用定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液IFN-γ及IL-4分泌水平。结果H3N2-抗H3N2免疫原性复合物诱生的抗H3N2 IgA效价明显高于H3N2单独免疫组(P<0．01),而与H3N2-CpG组无显著性差异。此外,复合物诱生的血清抗H3N2也高于H3N2单独免疫组(P<0．05)。H3N2-CpG组诱生的IFN-γ水平明显升高,而其他组之间无明显差异。结论流感病毒血凝素抗原抗体复合物、血凝素抗原加CpG佐剂可以诱生较强的局部黏膜免疫和体液免疫。这两组诱生的IgA效价均明显高于H3N2单独免疫组。另外,H3N2-CoG组小鼠的脾脏细胞经特异性抗原诱导后培养上清液中的IFN-γ水平明显升高。

流行性感冒病毒裂解疫苗的研制和质量控制

[目的 ] 研制新型的流行性感冒病毒裂解疫苗 ,并评价其免疫效果。 [方法 ] 利用乙醚裂解流行性感冒病毒 ,制得该疫苗。 [结果 ] 三批流行性感冒病毒裂解疫苗经中国药品生物制品检定所检定合格 ,并通过临床考核 ,取得令人满意的免疫效果。 [结论 ] 该疫苗具有良好的安全性和免疫原性。

微载体培养Vero细胞工艺条件初探

本文研究了细胞生长过程中微载体的种类,浓度及细胞的接种量、溶解氧水平对培养Vero细胞的影响。在pH为7.0～7.4,液解氧水平为30%～50%空气饱和浓度,搅拌速度为25～35r/min,温度为37℃时,在1.5升Celligen^(TM)系统中,连续培养7天,可使细胞浓度达到2.5×10~6 Cells/ml,为接种量的12倍,细胞生长旺盛,形态正常。

一种鉴相型感应同步器数显表信号处理方法

论述应用inte18254实现鉴相型感应同步器数显表信号处理的方法,利用计数器可编程的特点实现分辨率可调等功能.

微载体系统Vero细胞及乙型脑炎病毒培养的研究

采用国产20L反应器（Cellcul-20A）及国产微载体（GT-2）进行Vero细胞及乙型脑炎病毒培养,细胞浓度可达到1.0×107cells/ml,形态良好;病毒滴度LogLD50/0.04ml在4.67～7.5之间,并确立了细胞及乙型脑炎病毒培养工艺。

微载体系统Vero细胞培养日本乙型脑炎病毒的电镜观察

本文通过扫描和透射电镜分别可观察到微载体系统表面的Vero细胞及其内部的日本乙型脑炎病毒的形态,病毒的装配繁殖部位可能在线粒体,通过内质网形成有包膜的完整病毒颗粒,病毒大小为30～46nm。感染病毒后2～3天为繁殖高峰。本试验工作为乙型脑炎病毒在Vero细胞及微载体系统中的繁殖提供了形态学证据。

VERO细胞—微载体系统制备乙脑疫苗的研究

我们用 New Brunswick soientifieCo.Celligen 系统1.5L 反应器和 Cytodex 1,化工—1（国产）微载体试行了 VERO 细胞的培养,摸索了有关参数,观察细胞附着、生长动态。此外,对接种乙脑病毒 P3 株的细胞病变（CPE）、疫苗滴度及效价进行了初步试验。

微载体培养中不同感染剂量的麻疹病毒对病毒产量的影响

用微载体培养法在搅拌瓶和生物反应罐中小规模培养麻疹病毒，以探索在可能实现的大规模工业化麻疹生产中不同感染剂量ＭｕｌｔｉｐｌｙｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｎ（ｍ．ｏ．ｉ）的麻疹病毒对病毒产量的影响。增加ｍ．ｏ．ｉ可以将病毒的高峰期提前两到三天，但病毒产量却并不因此而提高，还有可能引起微载体上贴附的细胞层损坏加剧，从而被迫过早终止培养，导致病毒总产量下降。

国产生物反应器及其在病毒培养中的应用

本文简要介绍了华东化工学院研制的CellCul-20细胞培养生物反应器,报道了此反应器用于细胞和病毒培养的情况。经严格的无菌试验和一年多的培养表明:CellCul-20反应器具有优良的抗污染性能,其主要参数的控制完全满足细胞培养的要求,并能根据培养过程的实际情况,随时对参数进行修正。用所开发的培养工艺进行Vero细胞和乙脑病毒培养,细胞在较短时间内达到高密度,乙脑病毒滴度和抗原效价均取得了较为满意的结果。在国际上第一次成功地应用vero细胞大规模培养乙脑病毒原制苗。

用国产生物反应器大规模高密度培养Vero细胞

本文考察了在2.5LCelliGen细胞培养器和国产20LCellCul-20细胞培养生物反应器中采用微载体技术培养细胞的情况。分析了用CellCul-20细胞培养生物反应器进行大规模培养时细胞的生长、代谢规律,研究了从2.5L扩大到20L规模的细胞转移条件。采用微载体球间直接转移技术,提高了接种效率,减少了接种步骤和污染机会。当国产GT-25微载体用尾为5g/L,采用连续灌注工艺培养Vero细胞,在国产20L CellCul-20细胞培养生物反应器中,连续培养5天,细胞数增加7倍,细胞密度超过1.0×10~7cells/ml。本文开发的细胞培养工艺,对于中试及工业规模的动物细胞大量培养具有一定的指导意义。

水痘减毒活疫苗安全性与免疫原性观察

目的评价水痘减毒活疫苗的安全性及免疫原性。方法按随机、双盲的抽样原则,以国产水痘疫苗为对照,对600名1～12岁儿童接种水痘减毒活疫苗,在接种前后分别采集受试者血清,同时观察其临床反应,利用膜免疫荧光法(FAMA法)检测收集到的血清的水痘抗体滴度,并用统计学方法对结果进行分析。结果试验苗和对照苗不良事件总反应率分别为30.5%和35.0%,二者比较无统计学差异。水痘易感者血清抗体阳转率分别为100.0%和98.73%;抗体GMT分别为1:48.6和1:39.0。水痘非易感者血清抗体4倍增长率分别为89.33%和77.42%;抗体GMT分别为1:139.10和1:153.07。两组抗体阳转率无显著性差异,但易感者接种试验疫苗组受试者抗体GMT高于接种对照疫苗组。结论试验疫苗有良好的安全性和免疫原性,可用于预防水痘-带状疱疹病毒感染。

流行性感冒病毒裂解疫苗甲醛含量的探讨

为了探索流行性感冒 (流感 )病毒裂解疫苗中灭活剂甲醛的最适浓度 ,单价病毒液采用不同浓度的甲醛进行灭活后 ,分别跟踪测定单价病毒液和配制的疫苗液中血凝素 (HA)含量的变化。结果显示 :用 0 0 1%甲醛灭活的单价病毒液和配制的疫苗液 ,HA含量下降明显 ;用 0 0 0 4 %甲醛灭活的单价病毒液和配制的疫苗液 ,HA含量则较为稳定。提示流感疫苗宜采用较低浓度的甲醛进行灭活。

水痘减毒活疫苗的质量控制及稳定性研究

水痘减毒活疫苗的质量控制及稳定性研究 ,是确保疫苗安全有效的重要组成部分。将Oka水痘病毒株接种于MRC 5人二倍体细胞 ,制成冻干水痘疫苗并进行检测。结果显示 :该疫苗主要技术指标 (病毒滴度、残余水分等 )均符合世界卫生组织规程要求 ,具有良好的免疫效果 ,同时稳定性试验取得令人满意的结果。