辛伐他汀预防小鼠高脂血症合并脑缺血损伤及其对时钟基因的调控

目的探讨辛伐他汀对小鼠高血脂合并脑缺血再灌注损伤(CIRI)的预防作用及机制。方法将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、CIRI组〔采用大脑中动脉阻塞再灌注法(MCAO/R)制备小鼠CIRI模型〕、高脂组(ip给予泊洛沙姆407)、高脂+CIRI组(ip给予泊洛沙姆407,24 h后MCAO/R造模)、高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg^(-1)组(先ig给予辛伐他汀连续7 d,后按照高脂+CIRI组处理)。再灌注24 h后,对各组小鼠进行神经功能缺损评分;转棒实验测定掉落潜伏期;自主活动测试小鼠活动次数;TTC染色测定脑梗死体积;激光散斑血流成像检测小鼠脑血流量;取全血分离血清,并测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量;实时荧光定量PCR和Westen印迹法检测小鼠右脑皮质时钟基因Rev-erbα和Bmal1 mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组相比,CIRI组小鼠神经功能缺损评分升高(P<0.01),掉落潜伏期缩短(P<0.01),活动次数减少(P<0.01)。与CIRI组相比,高脂+CIRI组小鼠神经功能损伤加重(P<0.01);脑梗死体积显著增加(P<0.01);脑血流量显著降低(P<0.01);血清中TC,TG,LDL-C及MDA含量显著升高(P<0.01),GSH-PX水平显著降低(P<0.01);脑皮质Rev-erbαmRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01);Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。与高脂+CIRI组相比,高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg^(-1)组小鼠神经功能损伤减轻(P<0.01);脑梗死体积显著减小(P<0.01);脑血流量显著增加(P<0.01);血清中TC,TG,LDL-C及MDA含量显著降低(P<0.01),GSH-PX水平显著升高(P<0.01);脑皮质Rev-erbαmRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论辛伐他汀预防性给药能有效减轻小鼠高脂血症合并CIRI,其机制与其降血脂及调节时钟基因表达有关。

H_2O_2氧化损伤血管内皮模型的构建及超氧化物歧化酶对损伤的逆转作用

目的构建离体血管H2O2氧化损伤模型,并初步探讨其损伤机制,实验超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对该损伤的修复作用。方法采用大鼠离体胸主动脉环,构建H2O2氧化损伤血管模型,通过乙酰胆碱(acetylcho-line,ACh)引起的舒张评价该模型的内皮功能;通过硝普钠(nitroprusside sodium,SNP)引起的舒张及苯肾上腺素(phenylephrine,PE)引起的收缩评价该模型的平滑肌功能。同时,用120U·ml-1的SOD作用于该模型30min,评价SOD对模型损伤的修复作用。结果H2O2氧化损伤的血管,对SNP引起的舒张及PE引起的收缩无影响,而对ACh引起的内皮依赖性舒张程度降低,120U·ml-1 SOD作用后,能明显改善该模型的氧化损伤状态。结论H2O2 1mmol·L-110min能够氧化损伤大鼠胸主动脉内皮,120U·ml-1的SOD可以较好地修复H2O2造成的内皮损伤。

蛋白质特殊氧化与疾病关系的研究进展

由于蛋白质氨基酸组成及氧化因素的多样性,导致蛋白质多样性氧化产物的生成,如酪氨酸氧化成3硝-基酪氨酸或3氯-酪氨酸,蛋氨酸氧化生成亚砜等。蛋白质特殊氧化产物的生成及水平的增高,在一定程度上反映并影响着疾病的发生与发展状态。深入研究蛋白质特殊氧化与疾病的关系,有望为相关疾病的预防和治疗提供有效的科研依据。

蛋白质羰基化与疾病关系的研究进展

多种疾病的病理过程伴随着蛋白质的氧化,同时,蛋白质的氧化产物在一定程度也反映并影响着疾病的发生与发展状态。蛋白质的羰基化水平是评价蛋白总的氧化程度的常用方法,深入研究蛋白质羰基化与疾病的关系,有望为相关疾病的预防和治疗提供有效的科研依据。

肢体后适应对高糖状态下大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨肢体后适应(limb remote ischemic postconditioning,LRIP)对急性高糖状态下大鼠脑缺血/再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用,并初步阐明其机制。方法大鼠腹腔注射50%葡萄糖(6 m L·kg-1)造成急性高血糖模型,采用线栓法复制大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将大脑中动脉栓塞1.5 h后再灌注,且同时刻给LRIP组大鼠LRIP操作,将大鼠左后肢股动脉夹闭5 min/再通5 min(此为1个循环),连续3个循环。再灌注2 h后,检测各组大鼠行为学指标,摘眼球取血,测定血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;取全脑切片后氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyhetrazolium chloride,TTC)染色检测脑梗死面积。结果 LRIP能改善急性高血糖状态下脑IRI大鼠的行为学评分,升高血清中NO浓度及SOD活力,能减小脑梗死面积,以上指标LRIP组与IRI模型组比较差异均具有显著性(P<0.05)。结论 LRIP对急性高血糖状态大鼠的脑IRI有保护作用,该作用部分通过升高血清SOD活力及NO水平实现。

野菊花提取物舒张血管及抗炎机制研究

目的研究野菊花舒张血管及抗炎机制,同时探索其活性物质基础。方法通过离体血管环张力实验观察野菊花提取物及其主要单体对大鼠胸主动脉环经苯肾上腺素引起血管环收缩的影响。以Griess反应检测野菊花提取物及其单体对LPS(1μg/ml)/IFN-γ(10U/ml)刺激巨噬细胞RAW264.7释放NO的抑制作用;噻唑兰(MTT)比色法检测二者对细胞活力的影响;western blot检测二者对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及环氧合酶-2(COX-2)的抑制作用。结果野菊花提取物、木犀草素对血管的舒张效应为部分内皮依赖性、部分非内皮依赖性;二者对均能剂量依赖性地抑制炎症巨噬细胞生成NO、抑制iNOS表达,同时无细胞毒性,对COX-2表达无影响。结论野菊花提取物的血管舒张效应,抑制炎症细胞内NO及其诱导型合酶iNOS表达可能是其药理作用机制。

云南白药对自发性高血压大鼠肾脏炎症状态的改善作用

目的观察云南白药(YNBY)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏炎症状态的影响,探讨其对高血压肾脏疾病的防治作用及机制。方法将6周龄SHR分为YNBY治疗组和高血压模型对照组,在3个时间点(给药6周,给药14周,停药后9周)研究YNBY对SHR血压值、肾脏炎性因子表达和氧化应激水平的影响。结果YNBY对SHR无明显降压作用(P>0.05)。YNBY在mRNA和蛋白水平抑制了细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在SHR肾脏的高表达(P<0.05)。YNBY在给药14周和停药9周时降低了过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的mRNA表达(P<0.05),在给药14周时明显降低了PPARγ的蛋白表达(P<0.05)。YNBY给药后显著降低了SHR肾脏组织蛋白羰基化水平(P<0.05),在给药14周及停药9周后均可显著提高SHR肾脏总抗氧化能力(P<0.05)。结论YNBY给药后能够显著减轻SHR肾脏炎症反应和氧化应激水平,YNBY可能在防治高血压肾病方面具有一定的疗效。

麝香保心丸对自发性高血压大鼠心脏保护作用的研究

目的探讨麝香保心丸(HMP)对自发性高血压大鼠(SHR)心脏保护作用及其可能的机制。方法将6周龄SHR分为HMP治疗组、高血压模型组,将WKY大鼠作为正常血压组,每组分3批在3个时间点(给药6周、给药14周、停药9周)处死大鼠,尾套法测定血压;FRAP法进行心脏组织总抗氧化能力测定;采用RT-PCR考察炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1、IL-1β和TNFαmRNA表达;Western Blot与ELISA法分别考察炎症相关因子ICAM-1、VCAM-1及IL-1β、TNFα蛋白表达。结果HMP对SHR无明显降压作用,但能提高SHR心脏组织总抗氧化能力。PCR、Western Blot与ELISA显示给予HMP 6周和14周后,均能显著抑制SHR心脏炎性相关因子ICAM-1、VCAM-1 m RNA表达及ICAM-1蛋白表达;给药14周后,能显著抑制炎性相关因子IL-1β、TNFαmRNA表达及蛋白表达;停药9周后,仍能抑制炎性相关因子ICAM-1、TNFαmRNA表达及ICAM-1蛋白表达。结论HMP具有独立降压以外的对SHR心脏保护作用,其机制可能与抑制心脏组织炎症反应及降低组织氧化应激有关。

麝香保心丸对自发性高血压大鼠肾脏炎症状态的改善作用

目的:观察麝香保心丸(HMP)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏炎症状态的影响,探讨其对高血压肾脏疾病的防治作用及机制。方法:将6周龄SHR分为HMP治疗组和高血压模型对照组,以同周龄的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为正常对照,在3个时间点(给药6周,给药14周,停药9周)研究HMP对SHR血压值、肾脏炎性因子表达和氧化应激水平的影响。结果:在整个实验过程中HMP对SHR无明显降压作用(P>0.05)。HMP在mRNA和蛋白水平抑制了细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在SHR肾脏的高表达(P<0.05),在mRNA水平抑制了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的高表达(P<0.05)。HMP在给药14周和停药9周时降低了过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的mRNA表达(P<0.05),而在给药6周和给药14周时明显降低了PPARγ的蛋白表达(P<0.05)。HMP给药14周及停药9周后均可显著提高SHR肾脏组织总抗氧化能力(P<0.05),给药14周时能显著降低SHR肾脏组织蛋白羰基化水平(P<0.05)。结论:HMP给药后能够显著减轻SHR肾脏炎症反应,并且伴随着肾脏氧化应激水平的降低,这可能是HMP在防治高血压肾病方面具有应用潜能的作用机理。

浅析中药药理学教考分离和试题库建设

实施教考分离是评价教师教学质量和学生学习效果的有效手段,对教师的教学和学生的学习均具有良好的促进作用。我们在中药药理学教学实践中,重新制定了考试大纲,建立了考试题库,在教考分离教改实践中取得了较好的效果,测试结果显示学生考试成绩基本符合正态分布,可较好地反映教师的教学情况和学生的学习情况。

鲁斯可皂苷元对脑缺血再灌注损伤小鼠时钟基因的调控作用

目的研究鲁斯可皂苷元(Rus)对小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的改善作用及其机制。方法C57BL/6J小鼠分为假手术组、假手术+Rus组、I/R组和I/R+Rus组,采用大脑中动脉栓塞线栓法制备小鼠I/R模型,小鼠在术前1 h ig给予Rus 10 mg·kg^(-1)或同体积溶媒(0.5%羧甲纤维素钠)。再灌注24 h后,进行神经功能评分并测定脑梗死体积,采用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测时钟基因Per1,Clock和Bmal1 mRNA和蛋白表达水平。结果与假手术组相比,I/R组神经功能评分增高(P<0.01),脑梗死体积增大(P<0.01),Per1,Clock和Bmal1 mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.05,P<0.01);与I/R组相比,I/R+Rus组的脑梗死体积减小(P<0.01),神经功能评分降低(P<0.01),Per1,Clock和Bmal1 mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.05,P<0.01)。结论 Rus可减轻小鼠脑I/R损伤,其机制可能与调控时钟基因的表达有关。

新疆芍药醋酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究新疆芍药Paeonia anomala subsp.anomala根茎醋酸乙酯部位的化学成分。方法:采用各种色谱方法进行分离纯化,结合波谱数据和化学方法进行结构鉴定。结果:从新疆芍药根茎的85%乙醇提取物的醋酸乙酯部位中分离鉴定了8个化合物,分别为没食子酰基芍药苷(1)、白芍苷R1(2)、2,5-二羟基肉桂酸甲酯(3)、β-谷甾醇棕榈酸酯(4)、肉豆蔻酸甲酯(5)、常春藤皂苷元(6)、1,2,3,4,6-五没食子酰基葡萄糖(7)、芹菜素(8)。结论:化合物3为首次从芍药科植物中分离得到,除了化合物1和2外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。

芍药苷对血管内皮生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞小管形成的影响

目的利用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)研究芍药苷(PF)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的HUVECs小管形成的影响。方法将HUVECs细胞株复苏培养,采用噻唑兰(MTT)法测定不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对HUVECs细胞活力及对VEGF引起的细胞活力上升的影响,采用体外小管形成实验评价不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF引起的HUVECs小管形成的影响,采用细胞划痕实验评价不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF所致的HUVECs迁移的影响。结果与空白组比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对HUVECs的细胞活力影响差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组(给予10 ng/mL的VEGF,下同)比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)对VEGF所致的HUVECs细胞活力升高的影响差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,不同浓度PF(1、3、10、30、100μmol/L)均能抑制VEGF所致的HUVECs体外小管形成作用。与模型组比较,10、30、100μmol/L PF剂量组24 h划痕/0 h划痕宽度比值均显著高于模型组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。结论PF具有抑制VEGF诱导的HUVECs体外小管形成的作用,该作用可能通过抑制VEGF所致的HUVECs迁移而实现。

高尿酸血症相关靶点研究进展

高尿酸血症是因嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍所致的慢性代谢性疾病,与痛风、代谢综合征的发生关系密切。综述高尿酸血症相关作用靶点,为高尿酸血症的研究和治疗提供参考。

时钟基因Rev-erbα在疾病中作用的研究进展

Rev-erbα是生物钟系统的时钟基因,广泛表达于生物体各组织器官。作为核受体超家族中的成员,Rev-erbα可被GSK4112,SR9009,SR9011和SR8278等配体调控并发挥转录抑制作用。研究表明,Rev-erbα可通过调控脂质代谢、抑制炎症反应和氧化应激及增强β淀粉样蛋白的吞噬在心脑血管疾病和神经退行性疾病的发生发展中发挥重要的作用。此外,Rev-erbα可通过抑制自噬和细胞增殖发挥抗癌作用。Rev-erbα的配体被广泛应用于多种疾病的防治研究中。本文对Rev-erbα及其配体在心脑血管疾病、神经退行性疾病和癌症等疾病中的作用进行综述,同时对Rev-erbα作为药物靶标的可行性作简要探讨。

芍药苷对Lewis肺癌自发肺转移小鼠的抑瘤作用

目的:应用Lewis肺癌移植瘤小鼠模型,观察芍药苷的抑瘤及抗肿瘤转移作用。方法:C57BL/6J小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌瘤株,隔天腹腔注射环磷酰胺,共3次,治疗组连续灌胃芍药苷24天,检测小鼠体重、瘤体大小,实验结束后处死动物,摘取瘤体称重,计算肿瘤生长抑制率。剥离鼠肺,解剖镜下计数肺部正反面及肺叶间的转移瘤集落数。结果:环磷酰胺60 mg/kg及芍药苷40 mg/kg对荷瘤小鼠肿瘤的生长均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为57.26%和69.24%。环磷酰胺组及芍药苷组Lewis肺癌荷瘤小鼠肺转移集落明显少于模型组。结论:芍药苷能抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长,并可抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠的肺转移。

桃红四物汤防治缺血性中风作用研究

目的:探讨桃红四物汤防治缺血性中风的作用并初步阐明其机制。方法:灌胃给予大鼠大、中、小(17.00 g/kg、8.50g/kg、4.25 g/kg)剂量的桃红四物水提物连续15天,采用线栓法复制大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将中动脉闭塞1.5 h再灌注24h后,检测各组大鼠行为学指标,摘眼球取血测定血清中NO2-浓度,取全脑切片后TTC染色检测脑梗死面积,取梗死区域脑提取mRNA检测神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达情况。结果:17.00 g/kg、8.50 g/kg、4.25 g/kg的桃红四物水提物均能改善行为学评分,与模型组比较差异具有显著性意义;17.00 g/kg、4.25 g/kg的桃红四物水提物能升高MCAO模型大鼠血清中NO2-浓度,与模型组比较差异具有显著性意义;17.00 g/kg、8.50 g/kg、4.25 g/kg的桃红四物水提物均能减小MCAO大鼠的脑梗死面积,与模型组比较差异具有显著性意义;17.00 g/kg、4.25 g/kg的桃红四物水提物能恢复MCAO模型大鼠梗死区域脑内的nNOS表达,与模型组比较差异具有显著性意义。结论:桃红四物水提物能减轻MCAO大鼠脑缺血再灌注损伤,减少脑梗死面积,同时改善模型大鼠的行为学评分。

中性粒细胞NADPH氧化酶与组织缺血再灌注关系的研究进展

缺血再灌注损伤为心肌梗死,器官移植,肠道灌注不足,脑中风等疾病或手术的常见并发症,是导致危重病人死亡的重要因素,然而至今临床上仍未有十分理想的治疗方法。在组织缺血再灌注过程中,中性粒细胞通过NADPH(Nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate)氧化酶的活化产生大量活性氧(Reactive oxygen species,ROS),一方面参与氧化应激,另一方面进一步招募中性粒细胞,扩大炎症反应,造成组织损伤。本文综述了国外期刊报道的中性粒细胞NADPH氧化酶与组织缺血再灌注损伤的相关研究进展,以期为心脑血管等重大疾病防治提供一定线索。

阿托伐他汀对高血压肾脏并发症炎性损伤的治疗作用(英文)

通过考察阿托伐他汀(atorvastatin, ATO) 对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR) 肾脏炎性损害的影响, 探讨了 ATO 对高血压肾脏并发症的防治作用。将4周龄SHR分为高血压模型组和ATO治疗组(8mg/kg),以同周龄的Wistar-Kyoto大鼠为正常对照。灌胃给药8周后, 采用酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay)测定血浆和肾组织血管紧张素Ⅱ(angiotensin, AngⅡ)含量;测定诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1) 的蛋白表达和亚硝酸阴离子(nitrite, NO2-)含量,以评价肾脏炎症状态; 以苏木素伊红(hematoxylin and eosin)和过碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine) 染色示SHR肾小球和肾间质形态学病变,并以尿蛋白含量为指标衡量肾脏功能。结果显示,ATO给药后显著降低了SHR肾组织 AngⅡ含量;肾组织iNOS和ICAM-1的蛋白表达及NO2-含量明显降低,同时伴随着SHR肾脏病理形态的改善和肾功能的提高。该研究表明,ATO可显著改善SHR肾脏炎性损害,ATO可能在高血压肾脏并发症的防治方面有一定的疗效。