拟穴青蟹不同卵巢发育时期各组织的脂肪酸组成

甲壳动物卵巢成熟期的脂质积累是人工繁殖和繁育成功的重要基础.本研究对人工池塘养殖拟穴青蟹(Scylla paramamosain)不同卵巢发育时期的卵巢、肝胰腺和肌肉组织的脂类脂肪酸组成进行了分析.结果表明,卵巢指数随着卵巢发育成熟而显著增加(P<0.05),而肝胰腺指数则无明显变化;在卵黄发生期,卵巢总脂及极性脂含量显著高于卵黄发生前期(P<0.05);而肝胰腺的脂类主要为中性脂,且在卵巢发育前期显著升高,后逐渐降低;肌肉的脂类80%以上是极性脂,在卵巢发育过程中其含量无明显变化.随着卵巢的发育成熟,卵巢脂类n-3 PUFA尤其是DHA的含量逐渐增加,而n-6 PUFA的含量逐渐减少,其中极性脂LC-PUFA的含量明显高于中性脂;肝胰腺脂类脂肪酸主要为饱和脂肪酸,含量在40%以上,而LC-PUFA含量较低,最高仅为10.37%;肌肉脂类脂肪酸主要为SFA和LC-PUFA,尤其是极性脂中的LC-PUFA,其含量最高可达49.84%.研究表明,在拟穴青蟹不同卵巢发育时期,各主要组织的脂类脂肪酸呈现不同的蓄积模式.研究结果可为人工养殖拟穴青蟹亲蟹的培育及其人工配合饲料的开发提供一定的理论依据.

黄斑蓝子鱼Δ6Δ5 Fads2蛋白重组表达和多克隆抗体的制备

黄斑蓝子鱼(Siganus canaliculatus)是首个被发现具有长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)合成能力的海水鱼类,而脂肪酸去饱和酶(Fads2)是内源性合成LC-PUFA的关键限速酶.为深入研究鱼类Δ6Δ5 Fads2的生物学功能及其表达调控机制,本研究选取黄斑蓝子鱼Δ6Δ5 fads2基因的编码区序列长255 bp,通过限制性内切酶EcoR I和BamH I双酶切,将其插入质粒pGEX-6p-1,获得Δ6Δ5 fads2基因的重组表达载体,经IPTG诱导表达获得大量重组表达蛋白.以纯化后的Δ6Δ5 Fads2重组蛋白为抗原注射免疫KM小鼠后提取血清,并进行Western blot鉴定产生多克隆抗体的特异性.结果表明,本研究成功构建了pGEX-6p-1-Δ6Δ5 Fads2原核表达载体,表达纯化后获得大小约35.4 ku的Δ6Δ5 Fads2重组表达蛋白,利用KM小鼠得到的多克隆抗体特异性好,其效价约为1∶3.2×104.该抗体可为深入研究鱼类Δ6Δ5 Fads2的生物学功能及其表达调控机制提供基础条件,从而有助于研发提高鱼体内源性LC-PUFA合成能力的方法,降低养殖鱼类饲料中鱼油添加比例,促进养殖业的健康发展.