现代古籍保护技术的进展与应用

古籍文献资料是传承中华文化的载体,具有推动现代公共文化建设的积极作用,由于古籍资料是具有不可再生的这些特征,因此我们需要积极运用现代保护技术,为古籍保护提供有效良好的保障。如何通过现代古籍保护技术延长古籍的使用寿命,是当前古籍保护的重要内容。本文主要是围绕现代古籍保护技术的进展与应用情况展开的探讨,以期为古籍保护技术的良好应用提供参考,促使更多的古籍通过现代保护技术“再生”。

日本血吸虫重组铁蛋白的粘膜免疫效果研究

目的 构建日本血吸虫铁蛋白 (SjFer)原核表达质粒。以壳聚糖作佐剂 ,探讨重组日本血吸虫铁蛋白(rSjFer)粘膜免疫诱导小鼠抗血吸虫感染的保护力。 方法 用PCR扩增SjFer基因 ,亚克隆入原核表达载体pTWIN1上intein 2的N端 ,经PCR、限制性酶切筛选阳性重组子并经测序鉴定。将阳性重组子转化大肠埃希菌 ,在低温和低浓度的异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)条件下诱导表达可溶性重组融合蛋白。利用重组融合蛋白的壳聚糖结合功能域 (CBD)结合位点 ,使其与壳聚糖结合 ,经滴鼻免疫小鼠 ,于第 3次免疫后 2周攻击感染 ,用减虫率和减卵率表示保护力。感染前采血和唾液用ELISA检测抗体。 结果 成功克隆并表达了rSjFer。rSjFer以壳聚糖作佐剂经滴鼻免疫获得了 3 5 .5 1%的减虫率和 5 2 .17%的减卵率。免疫后小鼠血清IgG和IgA及唾液SIgA抗体水平与对照组比较均明显升高。 结论 获得了rSjFer ,该蛋白以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫能诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。

日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究

为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和真核表达载体pcDNA3,经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将pTWIN1/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2566,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白(rSj-F1/intein2),并经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析鉴定. 将pcDNA3/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2502,大量制备DNA疫苗. 用重组融合蛋白和DNA疫苗免疫小鼠,末次免疫后2周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后42天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用ELISA法检测抗体. 免疫保护效果测定显示:重组蛋白疫苗以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了28.07%、24.69%的减虫率和48.30%、46.38%的减卵率;DNA疫苗(pcDNA3/Sj-F1)单独免疫获得了18.47%的减虫率和35.06%的减卵率;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了40.42%和56.17%;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了42.38%和62.

HCMV感染对HEL细胞HOXB2,HOXB3,HOXB4及HOX8基因表达的影响

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB8基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对HEL细胞HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB8基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :HEL细胞表达HOXB2 ,HOXB3,HOXB4及HOXB8;HOXB2基因于HCMV感染后 15h表达增加 ,4 8h达高峰 ,随后回落 ,至 12 0h再达高峰。HEL细胞HOXB3和HOXB4基因的表达在HCMV感染后不同时间无明显变化。HOXB8基因于HCMV感染后 15～ 4 8h表达轻微下调 ,72h回升 ,96h表达增加 ,12 0h达高峰 ;ATRA能轻微上调HCMV感染晚期HEL细胞HOXB8基因的表达 ,但对HCMV感染后HOXB2和HOXB4基因的表达无明显调节作用。结论 :HCMV能诱导HOXB2及HOXB8基因表达异常 ,这可能在先天性HCMV感染导致胚胎发育畸形中起重要作用。

人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常 。

日本血吸虫新基因SjF1的克隆、表达及免疫保护效果研究

目的 构建日本血吸虫中国大陆株SjF1原核表达重组质粒,并进行免疫保护效果测定。方法 用聚合酶链反应(PCR)法将SjF1基因从已剪切阳性克隆中扩增出来,克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端,经PCR和限制性酶切筛选阳性重组子。将阳性重组子转化大肠杆菌,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白。经鉴定后分别以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经黏膜免疫昆明鼠,观察诱导产生的减虫和减卵效果。感染前采血和唾液用ELISA法检测抗体。结果 成功克隆并表达了rSjF1。rSjF1以FCA作佐剂经皮下免疫获得了29.92％的减虫率和51.08％的减卵率;rSjF1以壳聚糖作佐剂经滴鼻免疫获得了25.74％的减虫率和44.04％的减卵率。结论 获得了rSjF1,该蛋白以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经黏膜免疫均能诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。

从课程学习中培养病原生物学研究生的创新能力

课程学习对研究生创新能力培养具有重要意义,尝试从课程学习入手,通过优化课程知识结构,科学安排教学内容,更新教学方法等手段,提升病原生物学研究生的科研思维和创新能力。

日本血吸虫雌虫抗原免疫血清筛选成虫cDNA文库

目的 筛选日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因。 方法 用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清 ,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选 ,将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增 ,采用Sanger双脱氧核苷酸末端终止法对阳性克隆插入子进行测序 ,与GeneBank中的已知序列进行比对分析。 结果 共获得 2 6个阳性克隆 ,其PCR产物大小约 0 .5～ 3kb。在进行测序的 8个阳性克隆中发现了GeneBank未报道的Sj肌球蛋白的部分基因序列 (GeneBank登录号为AY3 2 2 14 8)和 1个新基因 (命名为Sj F1,GeneBank登录号为AY2 61995 )。Sj F1编码的蛋白理论分子质量为 13 .45ku ,等电点为 6.2 9,富含α螺旋和随机卷曲 ,含多个蛋白激酶磷酸化位点 ,1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点和 1个豆蔻酸位点。 结论 Sj雌虫免疫血清可识别Sj特异性抗原分子 ,该抗原基因是否为雌虫性别特异性基因及其作为日本血吸虫病疫苗候选基因的价值 ,有待进一步研究。

免疫学课堂教学中如何激发学习兴趣

多年教学实践中，我体会到，要提高免疫学教学质量要从多方面激发学生学习兴趣，诱导求知欲。１从历史入手免疫学是一门新兴学科。它的形成与发展凝聚了许多免疫学家的智慧和汗水，至今世界上已有二十多位科学家由于对免疫学的贡献获得了诺贝尔医学奖。获奖者敏锐的感觉、...

提高医学生实验室生物安全知识与技能的实践

尝试在医学生中以理论讲授、专题讲座、参观实践、网络教学、自学等多种形式实施病原微生物实验室生物安全知识与技能的教学,使医学生掌握病原微生物实验室生物安全知识,掌握实验室操作的正确规程,了解实验室突发事件的应对措施,提高医学生实验室生物安全意识和自我防护能力。

人类巨细胞病毒感染人胚肺细胞对HOXB基因表达影响的研究

目的 研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB基因的表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对HEL细胞HOXB基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的分子机制。方法 采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 ①HEL细胞表达HOXB2 ,HOXB3,HOXB4 ,HOXB5 ,HOXB6 ,HOXB7和HOXB8,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞被诱导表达HOXB9;且HOXB2 ,HOXB6 ,HOXB7和HOXB8基因的表达上调 ,而HOXB3,HOXB4和HOXB5基因的表达在HCMV感染后不同时间无明显变化 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;结论 HCMV能诱导HOXB2 ,HOXB6 ,HOXB7,HOXB8和HOXB9基因表达异常 。

重组单核细胞增多性李斯特菌作为活疫苗载体的研究进展

单核细胞增多性李斯特菌(LM)能在专职吞噬细胞和非专职吞噬细胞内存活并繁殖,其抗原既可经MHC-Ⅰ类分子途径递呈,也可经MHC-Ⅱ类分子途径递呈。将外源性抗原的DNA引入LM,可构建重组LM活疫苗。目前构建重组LM的方法主要有转座子插入法、质粒转化法和同源重组法。研究证明表达特异性靶抗原的重组LM是非常有效的诱导细胞免疫应答的活疫苗载体,在激发抗病毒免疫和抗肿瘤免疫.甚至在诱导肿瘤消退方面均有作用。

单核细胞增多型李氏忒菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡

以流式细胞仪 (FCM)分析 ,DNA琼脂糖凝胶电泳分析及细胞形态学改变为指标 ,研究单核细胞增多型李氏忒菌 (LM)感染对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用。结果发现 ,LM能诱导小鼠胸腺细胞产生典型的细胞凋亡形态学改变 ;FCM分析显示特征性的凋亡峰 ;琼脂糖凝胶电泳分析显示胸腺细胞出现典型的DNA“梯状带” ;胸腺细胞凋亡于LM(5× 10 5CFU)感染后 8h出现 ,48h达高峰 ;胸腺萎缩于LM感染后 16h出现 ,48h达最低水平 ;胸腺细胞凋亡百分率随LM感染剂量增加而增高。提示 ,LM以时间和剂量依赖方式诱导小鼠胸腺细胞凋亡。

淋巴细胞的胞外酶:CD26的结构与功能

CD2 6是一种胞外酶 ,为Ⅱ型跨膜糖蛋白。其胞外区具有二肽肽酶Ⅳ活性 ,能将含脯氨酸或甘氨酸的多肽从N端第二个氨基酸处裂解。CD2 6是一种多功能分子 ,除参与营养物质的转运与再循环并作为一种粘附分子结合胶原蛋白和纤维连接蛋白外 ,最近的进展表明CD2 6对免疫系统具有重要作用 ,特别是在T细胞活化、SCID、HIV感染及自身免疫病等方面有重要的意义。

16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌

目的:运用16S rRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法:提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果:12种细菌可以鉴定到"种",2种细菌可以鉴定到"属"。结论:16SrRNA基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。

人巨细胞病毒AD_(169)株引起小鼠脑部畸形的初步探讨

目的 :探讨人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)感染昆明小鼠的敏感性 ,建立HCMV致畸的动物模型。方法 :昆明系小鼠 4 0只 ,随机分为两组 :对照组 (8只 )和接种病毒组 (32只 ) ,病毒感染途径为脑内注射。在接种病毒 7,1 5 ,30 ,6 0d后不同时期分别以病理学方法观察动物脑部发育特点 ,以免疫组织化学方法检查病毒抗原 ,PCR方法检测动物脑组织中HCMV基因。结果 :接种HCMVAD1 69株的小鼠脑组织在不同时期发生了病理改变和脑部发育畸形 ,用免疫组织化学方法和PCR方法在脑组织细胞内检获HCMV抗原和基因。结论 :HCMVAD1 69株可引起小鼠脑部发育畸形 。

人类巨细胞病毒感染对U251细胞HOXB1基因表达的影响

目的 :通过研究人神经胶质瘤U2 5 1细胞株的HOX基因表达状态及人类巨细胞病毒 (HCMV)感染对U2 5 1细胞HOXB1基因表达的影响 ,以探讨HCMV致畸的可能机制。方法 :应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :U2 5 1细胞表达HOXB1基因 ;HCMV感染后 ,U2 5 1细胞HOXB1基因表达明显上调 ;ATRA能显著上调HCMV感染后U2 5 1细胞HOXB1基因的表达。结论 :HCMV感染能诱导U2 5 1细胞HOXB1基因表达上调 ,HCMV有可能通过调控HOXB基因表达异常引起胚胎发育畸形。

医学微生物学多媒体教学课件设计与制作的体会

本文首先介绍了教学多媒体制作软件的选择,然后从素材准备、版面设计、音频及动画素材的使用及课件的交互性设计方面对利用Powerpoint软件制作医学微生物学多媒体教学课件的一些技巧进行了简单的介绍。

医学微生物学双语教学的思考与探索

双语教学是我国高等院校教育改革的一项重要内容,为适应我国社会高速发展对人才的更高要求,提高学生自身专业外语水平,本文阐述了医学院校开展医学微生物学双语教学的重要性和必要性,总结了双语教学的英文教材,教学课件与授课方法,初步探讨了医学微生物学双语教学模式,从而使医学院校学生达到既学习本专业基础知识又提高英语水平的目的。