幽门螺杆菌对原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)刺激胃癌细胞AGS后,对细胞内原癌基因c-Fos和c-Jun表达的影响。方法:分别将从不同种类(胃炎,溃疡及胃癌)患者分离到的H.pylori与AGS细胞共同培养1 h,用Western blot方法检测细胞内c-Fos和c-Jun基因表达的变化。结果:不同类型的菌株刺激细胞后,c-Fos和c-Jun蛋白的表达变化存在明显差异。溃疡类菌株只促进c-Fos表达的升高,胃炎类菌株只促进c-Jun表达的升高,而胃癌菌株刺激的细胞c-Fos和c-Jun表达均无明显升高。在不同类型菌株混合刺激下,即胃炎和溃疡菌株,及胃炎、溃疡和胃癌菌株3重混合,刺激后的细胞中c-Fos和c-Jun的表达量均升高。结论:不同H.pylori刺激ACTS细胞后原癌基因c-Fos和c-Jun的表达变化有差异,多类型菌株的混合刺激下c-Fos和c-Jun的表达量同时升高。提示多种类型菌株的复合刺激可能更易促进癌变的发生。

乙型肝炎合并血吸虫肝病1例分析

近年来，笔者所在医院收治1例乙型肝炎合并血吸虫肝病患者，现将诊治体会报告如下。1病例介绍患者，男，35岁，江西籍。因“发现乙肝表面抗原阳性5年”人院，患者于5年前发现乙肝表面抗原阳性，肝功能正常，腹部超声未见异常，亦无临床症状，此后每年均复查肝功能、腹部超声，与前比较无明显变化。直至此次入院前6个月腹部超声提示“肝纤维化”，肝功能仍在正常范围。此次入院时超声示：“肝回声增粗，包膜呈锯齿状，考虑肝硬化”；

融合结构域MM蛋白在杆状病毒中的表达和细胞定位

目的将C-Myb的DNA结合域与MEF的AML1结合区组合成的MM融合基因在杆状病毒中进行表达和细胞定位。方法将氨基酸融合有绿色荧光蛋白的MM基因插入到杆状病毒转移载体中,通过重组质粒和亲本病毒AcPak6共转染昆虫Tn5细胞,获得重组病毒AcNPV-GFP-MM,并对该重组病毒在Tn5细胞中进行表达和定位观察。结果通过荧光显微镜观察,在病毒感染48h后的Tn5细胞中,可见表达产物大量集聚在细胞核内,Westernblot证明表达的融合蛋白在相对分子质量约60000处出现特异条带,与预计的蛋白理论值相符。结论由杆状病毒表达系统表达的MM蛋白比较稳定,能正确地趋向于核内。可以通过这种表达方式获得大量产物。

不同地区幽门螺杆菌cagA基因羧基端可变区及其蛋白序列差异分析

目的:比较不同地区H pylori cagA 3'端可变区序列差异及序列的地域特征,分析差异与疾病的相关性.方法:选择本实验室所收集的20例cagA+的PCR产物进行测序,并通过ExPASy-Translation软件推测其氨基酸序列,搜索并收集GenBank中已公布的不同地区3-6个H pyloricagA 3'端可变区序列及其氨基酸序列进行比较分析.结果:cagA蛋白的氨基酸序列可分为具有明显地域特征的东亚型和西方型两类;部分东亚型菌株表现出西方型变异.87.4%的菌株具有3个串联排列的EPIYA基序,8.2%的菌株具有4个或以上EPIYA基序.新发现1条具有区域特征的含有3个氨基酸的序列.cagA蛋白氨基酸序列中的EPIYA数目与临床结果没有相关性.结论:H pylori cagA基因及其cagA蛋白序列具有明显多态性,可以根据H pylori cagA 3'端可变区的主要序列差异进行地域分型,cagA 3'端可变区的EPIYA基序的数目与临床结果没有相关性.

镇江地区H pylori的cagA基因及其3′可变区结构的变化

目的:评估镇江地区H pylori临床株的cagA基因阳性率、了解菌株CagA蛋白的可能分型、其羧端可变区EPIYA的数目以及与临床结果之间有无关联.方法:培养分离来自临床胃十二指肠疾病患者的H pvlori,提取基因组DNA,通过PCR方法检测H pylori cagA基因的状况.随机选择不同病种的cagA基因阳性(cagA^+)的PCR产物.通过转化质粒,进行cagA^+PCR产物测序,通过ExPASY-Tranlation软件获得cagA基因相应的CagA蛋白的氨基酸序列.国际标准株NCTC11637的cagA基因以及CagA蛋白序列通过搜索NCBI(www.ncbi.nlm.nih.gov)数据库获得.结果:60株H pylori临床株中,56例为cagA^+,阳性率达93.3%.20例测序的结果表明,CagA蛋白结构可分为2种类型,19株东亚型和1株西方型.所有19株东亚型均为Yamaoka分型的A型,所有20例菌株的EPIYA的数目均为3个,与临床结果无关联.结论:cagA基因阳性率在不同病种之间无差异.镇江地区H pylori临床株的CagA蛋白的一级结构,与日本、韩国菌株一样,主要为东亚型,其CagA蛋白羧端可变区EPIYA数目均为3个,与临床结果无关联.

30K蛋白对家蚕细胞及幼虫存活的作用

利用杆状病毒表达系统在家蚕BombyxmoriL.细胞BmN中表达家蚕30K蛋白,以亲本病毒BmPAK6为对照,将重组病毒Bm/r-30K分别感染BmN细胞及家蚕幼虫,观察其感染后不同时间的凋亡及存活率。与对照相比,重组病毒感染后的BmN细胞的存活率明显高于对照组,并且感染的家蚕幼虫存活时间也较长,表明体内过量表达家蚕30K蛋白有助于延长其细胞及幼虫的存活。

家蚕iap基因在原核表达系统中的表达

为研究IAP蛋白抑制细胞凋亡的作用,用PCR法扩增出家蚕iap基因的cDNA,然后插入pET28a载体,得到阳性质粒pET28a-iap,并转化感受态细胞BL21,使用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导IAP蛋白的表达,应用SDS-PAGE和Western Blotting法分析目的蛋白,得到一条分子量约为38.8 kDa的特异表达条带,与表达产物的理论值相符。为进一步研究BmIAP蛋白的功能奠定了基础。

利用杆状病毒系统在昆虫细胞TN5中表达家蚕30K蛋白

为研究30K蛋白抑制细胞凋亡的作用,利用RT-PCR从家蚕总RNA中扩增到30KC19基因,对其进行了序列分析并克隆到杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,构建成重组转座载体pFastBacHTb-30KC19。利用杆状病毒(Bac-to-Bac)表达系统筛选重组杆状病毒,在昆虫细胞TN5中进行了表达和蛋白检测。结果表明30K蛋白在昆虫细胞中得到了高效表达。

肝硬化后门静脉血栓形成的临床特点研究

目的研究肝硬化(liver cirrhosis,LC)后门静脉血栓(portal vein thrombosis,PVT)形成的临床特点。方法对9678例LC患者进行回顾性分析,采用腹部B超/腹部增强CT及腹部增强MRI检查门脉主干或左右分支,筛选出LC伴PVT形成者(PVT组),同时将LC后无PVT患者纳为对照组,比较2组的Child-Pugh分级、门静脉及脾静脉宽度、脾脏面积及厚度、腹水、上消化道出血、肝性脑病和肝肾综合征等并发症。结果 LC患者中有396例(4.09%)PVT形成。PVT组中LC的病因主要有乙型肝炎、酒精性及丙型肝炎LC,PVT主要分布在门静脉主干、门静脉右支、肠系膜上静脉、门静脉左支和脾静脉。按Child-Pugh进行分级,PVT组与对照组比较,肝损伤较重(P<0.01)。PVT组合并腹水、上消化道出血、肝性脑病及肝肾综合征等并发症的发病率均较对照组高(P<0.01)。PVT组门静脉和脾静脉宽度分别为(1.50±0.23)cm和(1.25±0.34)cm,对照组为(1.38±0.23)cm和(1.06±0.29)cm。PVT组脾脏面积为(97.48±32.90)cm2,脾脏厚度为(6.09±1.21)cm;对照组分别为(81.19±29.10)cm2和(5.26±0.99)cm。PVT组门静脉及脾静脉宽度和脾脏厚度均大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PVT组有侧支循环开放的患者占96.21%,对照组为78.25%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LC后PVT形成对LC患者的临床转归有重要影响。

对1例行内镜下注射硬化剂治疗的食管静脉曲张患者的疗效的分析

食管静脉曲张是肝硬化患者常见的并发症。进行内镜下注射硬化剂治疗是近年来临床上新兴起的一种食管静脉曲张治疗法。为了探讨此疗法的效果,我们对2011年在我院进行内镜下注射硬化剂治疗的食管静脉曲张患者的治疗效果进行了分析。

小剂量聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗失代偿期丙型肝炎肝硬化的临床分析

目的:探讨小剂量聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗失代偿期丙型肝炎肝硬化的临床效果。方法:分析我院收治的失代偿丙型肝炎肝硬化患者临床资料,依据治疗方式不同进行分组,对照组(普通治疗组)30例和观察组(小剂量聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗组)30例。结果:观察组失代偿丙型肝炎肝硬化患者ALT、AST、ALB、TBIL、child pugh评分、HA、PCⅢ、LN均优于对照组,P<0.05,研究结果差异有统计学意义。结论:小剂量聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林抗病毒治疗失代偿丙型肝炎肝硬化临床症状改善明显,抗纤维化效果较好。

肝硬化非常见侧支循环临床特点研究

目的 探讨肝硬化患者门体循环之间非常见侧支循环形成的临床特点及意义。方法 对临床确诊为肝硬化的患者运用64排螺旋CT和三维血管成像结合电子胃镜检查,观察其门体循环之间非常见侧支循环的形成。结果 ①700例肝硬化患者中118例(16.86%)存在非常见侧支循环,依次为脾肾静脉分流、胃肾静脉分流、椎旁静脉分流、腹膜后静脉分流、胃脾分流和心膈角静脉分流。②非常见侧支循环形成与肝硬化Child-Pugh分级相关(P<0.01)。③与常见侧支循环形成组比较,非常见侧支循环组较少出现重度食管和(或)胃底静脉曲张、重度门静脉高压性胃病及大量腹水(P<0.01)。④非常见侧支循环组中肝性脑病和慢性血氨升高的发生率高于常见侧支循环组(P<0.01)。结论 ①肝硬化患者中非常见侧支循环并不"非常见";②非常见侧支循环形成与肝功能Child-Pugh分级有关;③非常见侧支循环形成可缓解门静脉高压引起的相关并发症,但增大了肝性脑病和慢性血氨升高的发病率。

幽门螺杆菌对胃癌细胞RhoA表达和活性的影响

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对胃癌细胞中的RhoA的表达和活性的影响,探讨Hp与胃癌之间的相互关系。方法:Hp由人胃黏膜组织中分离,固体培养,收获后用超声波方法裂解Hp,以裂解液刺激胃癌细胞SGC-7901,用pull-down方法来获得细胞裂解液中的活性RhoA,用Western blot方法来检测细胞裂解蛋白中的活性RhoA的变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法半定量法测定RhoA mRNA相对量。结果:用Hp裂解液刺激细胞10 min,总RhoA无明显变化,而活性RhoA升高。结论:Hp裂解液能增加胃癌细胞中活性RhoA的表达,呈剂量-效应关系,但总RhoA无明显变化,它可能是参与胃癌细胞的迁移。

胃镜下射频治疗疣状胃炎76例观察

目的:观察胃镜下射频治疗疣状胃炎的效果。方法:胃镜常规检查发现疣状隆起改变时,在胃窦及疣体上取组织分别做尿素酶实验和病理检查,并同时对应给予制酸、胃粘膜保护剂和(或)抗幽门螺杆菌等治疗。3个月后复查胃镜,对隆起不消失的患者,胃镜下行射频治疗,术后常规给予质子泵抑制剂等治疗2周,追踪记录症状,6个月后复查胃镜。结果:疣状胃炎214例中3个月后行射频治疗76例,症状缓解率96.1%,半年后内镜复查隆起消失率100%,术中、术后无1例出现出血、穿孔等并发症。结论:胃镜下射频治疗疣状胃炎是一种安全有效的方法,对药物治疗无效的疣状胃炎,应用射频治疗能达到根治目的。

一种与细胞周期素A1互作的新基因的克隆和表达

目的:了解与细胞周期素A1互作的一个EST的组成结构和蛋白质细胞定位。方法:通过酵母双杂交试验获得了一个与细胞周期素A1互作的新EST,进一步获得了全长基因foca1,其读码框长度为666 bp,编码221个氨基酸。将该基因克隆进杆状病毒AcNPV及真核表达质粒pcDNA3中,分别进行了表达和定位。结果:获得了表达该基因的重组杆状病毒和融合了EGFP的真核表达质粒。蛋白印迹试验证明该基因在昆虫Tn5细胞中得到了表达;并发现该基因的产物在COS-7细胞中定向于细胞核内。结论:该蛋白与cyc lin A1(核蛋白)存在互作的可能性。此结果为深入研究foca1基因的功能打下了基础。

莫沙必利及铝镁加混悬液治疗胆汁反流性胃炎的临床研究

【目的】探讨莫沙必利及铝镁加混悬液对胆汁反流性胃炎的疗效及胃内24 h胆汁的影响。【方法】55例经胃内24 h胆汁监测证实的胆汁反流性胃炎患者随机分3组。A组20例,予以莫沙必利5 mg,每天3次,治疗4周;B组15例,予以铝镁加混悬液15 mL,每天3次,治疗4周;C组20例,予以莫沙必利5mg,每天3次,及铝镁加混悬液15 mL,每天3次,治疗4周。分别于治疗前及治疗4周后观察3组患者腹胀、上腹痛、恶心及呕吐症状变化,并于治疗后复查胃内24 h胆汁监测。【结果】治疗后3组患者症状均明显减轻(P<0.05),但各组间症状有效率的比较差异无显著性。3组患者治疗后胃内24 h胆汁反流总时间百分比均显著减小(P<0.05),但减小幅度各组间比较差异无显著性(P>0.05)。【结论】莫沙必利可减少胃内胆汁反流,铝镁加混悬液可结合胆酸,均为治疗胆汁反流性胃炎的有效药物。

基于SCL-90心理量表对北京市城市社区居民有消化道症状人群的心理健康状况调查研究

背景:心理健康状况对消化道症状的影响已逐渐引起关注,长期伴有消化道症状人群的心理状况目前尚不明确。目的:探讨伴有消化道症状的北京社区居民的心理健康状况。方法:选取2016年3月—2017年12月首都医科大学附属复兴医院周边自愿参加社区消化道普通检诊服务的6个社区205名居民,并分为有消化道症状组与无消化道症状组,利用症状自评量表(SCL-90)评估心理状况。结果:与无消化道症状组相比,有消化道症状组躯体化、强迫症状、人际关系敏感、焦虑、敌对评分显著增高(P<0.05),而两组抑郁、恐怖、偏执、精神病性评分差异无统计学意义(P>0.05)。进一步分析发现,有腹胀的居民躯体化、强迫症状、焦虑、敌对评分显著高于无腹胀的居民(P<0.05);伴有反酸、烧心、嗳气者的所有因子评分均显著高于不伴有反酸、烧心、嗳气者(P<0.05);伴有餐后不适者躯体化、强迫症状、人际关系敏感、抑郁评分显著高于不伴有餐后不适者(P<0.05)。文化程度对有消化道症状的居民的躯体化、强迫症状、敌对有一定的影响(P<0.05)。结论:有消化道症状的北京社区居民较无消化道症状者有明显的心理健康问题,尤其是躯体化、强迫症状。

教师模仿标准化病人在消化科临床考试中的意义

目的探讨教师模拟标准化病人在消化科临床各类考试中的应用及价值。方法对教师扮演的标准化学员组与传统教学组的理论考试成绩、病例综合分析能力、临床技能考核成绩进行比较分析。结果两组学员的理论考试成绩差异无统计学意义;但是标准化学员组病例分析成绩及临床技能考核成绩均高于传统教学组。结论教师扮演的SP应用于消化临床出科考核有助于提高学员的临床技能和临床综合诊疗思维,可以使考核更公平,可作为一种重要的教学手段。