怡肾汤对大鼠5/6肾切除术后残肾肾功能及组织形态学的影响

目的研究怡肾汤对5/6肾切除大鼠肾功能、残肾组织形态的影响。方法将72只SD大鼠随机分成正常对照组(n=8)、模型组(n=32)及怡肾汤治疗组(n=32),各组内再随机分为8周、7周、6周、5周4组。模型组和治疗组大鼠行5/6肾切除术。术后1d即给于模型组大鼠予生理盐水灌胃,怡肾汤治疗组予以大鼠怡肾汤灌胃[0.3g/(100g·d)],每天1次,于术后第5、6、7、8周4个时间点分别分批处死大鼠;正常组予以自由饮食、饮水,于喂养5周、6周、7周、8周时分批处死。用PAS染色观察大鼠残肾肾组织形态学改变,并检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。结果细胞形态学观察示:模型组中肾小球内细胞数目增多明显,基质增多,有新月体形成。系膜区增宽染色深,毛细血管开放不良甚至闭塞,肾小囊囊壁增厚。治疗组细胞增生明显轻于模型组,毛细血管开放较好,肾小管结构基本正常。血液生化检查表明血清BUN、Cr明显上升,但治疗组升高程度不如模型组。结论怡肾汤可减轻肾组织中炎性细胞浸润和细胞增生,达到延缓肾小球硬化进程和肾功能恶化的速度。

三七总皂苷对脑缺血再灌注后海马CA1区损伤的影响

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经元损伤的病理改变及三七总皂苷 (PNS)对其的影响。方法采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断 (MCAO)局灶性脑缺血模型 ,缺血 2h,再灌注 46h。大鼠随机分为假手术组、缺血再灌模型组、PNSⅠ组和PNSⅡ组。以神经症状缺损记分、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等作为评价指标。结果三七总皂苷组神经症状明显减轻或接近正常 ,其行为评分得分明显低 ;三七总皂苷组海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加 ,与模型组间有显著性差异。结论三七总皂苷能减轻脑缺血再灌注引起的损伤性神经症状及海马CA1区神经元损伤的程度。

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后Caspase表达的影响

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8)蛋白表达的变化,以及三七总皂苷(PNS)对其表达的影响。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。实验动物随机分为假手术组、模型组、三七总皂苷组和尼莫地平对照组,于缺血前5 m in、缺血后12、24、36 h给药,共给药4次。缺血2 h再灌注46 h后,采用免疫组织化学方法检测脑组织中Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达的变化。结果缺血2 h再灌注46 h后,可诱导脑组织Caspase-1、Caspase-3表达增强,PNS能下调Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达;但对Caspase-8的表达无影响。结论PNS能抑制脑缺血再灌注后Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,这可能是其促进脑缺血后神经元存活及损伤后修复的机制之一。

补阳还五汤及有效组分对大鼠增生血管内膜细胞外基质蛋白表达的影响

目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱治疗组、苷治疗组、补阳还五汤原方治疗组和阿托伐他汀治疗组,以球囊导管损伤主动脉内膜后第2d开始灌胃给药,连续14d,未次给药后第2d(术后第16d)取胸主动脉损伤段,以免疫组化法测定增生内膜中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和MMP-9、TIMP-1的表达。结果:(1)模型组Col-Ⅰ表达增强(P<0.01);补阳还五汤原方治疗组、生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组Col-Ⅰ表达显著低于模型组(P<0.01)。模型组FN表达增强(P<0.01);生物碱治疗组和阿托伐他汀治疗组FN表达强度显著低于模型组(P<0.01)。而各组LN表达强度的变化差异均无显著(P>0.05)。(2)模型组TIMP-1表达增强(P<0.05);生物碱治疗可使TIMP-1表达降低(P<0.05);而原方、苷和阿托伐他汀对TIMP-1表达的增强无显著影响(P>0.05)。模型组MMP-9表达无显著变化(P>0.05);生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组MMP-9表达强度显著高于模型组(P<0.05);而补阳还五汤原方治疗组MMP-9表达无显著变化(P>0.05)。结论:补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可抑制增生内膜中Col-Ⅰ的表达,生物碱还可抑制FN的表达。生物碱和苷可增强MMP-9的表达,生物碱还可抑制TIMP-1的表达。提示补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可能通过抑制增生内膜中ECM的合成,促进ECM成分的清除和降解以对抗血管内膜增生。

青光安颗粒剂对慢性高眼压兔眼滤过性手术后作用的实验研究

青光安颗粒剂是一种治疗抗青光眼手术后患者的药物,具有益气养阴、活血利水的作用。临床研究表明,该药能明显提高抗青光眼手术后患者的视功能,预防术后慢性高眼压的产生;动物实验研究表明,该药具有保护和改善急性高眼压后大鼠视网膜细胞色素氧化酶活性节细胞的作用,且无明显毒副作用,用药较为安全。为了进一步了解青光安颗粒剂的作用机制,我们观察了该药对慢性高眼压兔眼滤过性手术后的作用,报告如下。材料与方法1 动物选取健康成年新西兰长耳白兔15只,月龄3～4个月,体重(1.78±0.16)kg,雌雄不拘,随机分为术后用青光安组、术后对照组与正常对照组3组,每组各5只兔(10只眼)。

补阳还五汤有效部位对局灶性脑缺血再灌注后caspase表达的作用

目的研究补阳还五汤中4类有效部位抗脑缺血再灌注损伤作用是否是通过抑制脑组织cas- pase表达而实现的。方法采用大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,缺血2 h再灌注46 h,分别于缺血前和缺血后12、24、36 h给予由补阳还五汤提取的生物碱、苷、多糖和苷元,以尼莫地平为对照药。以免疫组化法检测caspase-1、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结果脑缺血再灌注后,缺血侧脑组织caspase-1、caspase- 3蛋白表达增强,caspase-1主要表达在脉络膜,caspase-3在海马、皮质和髓质均有表达。补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元均可抑制caspase-1表达,尼莫地平对caspase-1表达无显著影响。生物碱可抑制海马和髓质区caspase-3表达,苷和苷元可抑制海马、皮质和髓质caspase-3表达,尼莫地平可抑制海马和髓质caspase-3表达,而多糖对其无显著影响。各组caspase-8表达均无显著差异。结论补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元可能通过抑制caspase-1表达,减少炎性细胞因子的产生,从而对抗缺血后炎症反应。生物碱、苷和苷元可能通过抑制caspase-3表达,抑制缺血后神经元凋亡,从而对抗神经元迟发性死亡。生物碱、苷、多糖和苷元可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的主要物质基础。

三七总皂苷对脑缺血再灌注后细胞外基质破坏及氧化应激的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对脑缺血再灌注后细胞外基质破坏及氧化应激的影响,探讨三七总皂苷抗缺血性脑损伤的机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分成假手术组、模型组、PNS组及依达拉奉组,连续给药4天后结扎双侧颈总动脉20min,再灌注24h后检测基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及组织基质金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of meta11oproteinase-1,TIMP-1)在脑组织的表达;脑缺血20min再灌注60min后测定脑组织丙二醛(Malonaldehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、一氧化氮(NitricOxide,NO)含量和超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)活性。结果:.脑缺血再灌注后,脑织织MMP-9表达增强,与假手术组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),而TIMP-1表达无显著性变化;脑缺血再灌注后脑组织MDA含量显著升高,SOD活性和GSH含量显著降低,NO含量和NOS活性均显著升高,与假手术组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。PNS可显著升高脑缺血再灌注后TIMP-1蛋白表达,降低MMP-9蛋白表达,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);PNS可显著降低MDA和NO含量,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05),但对SOD、NOS活性和GSH含量无显著影响。结论:三七总皂苷对脑缺血再灌注后的细胞外基质破坏及氧化应激损伤具有抑制作用。

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后脑内NGF和bFGF表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血再灌注后脑组织神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响。方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。实验动物随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、模型+PNS治疗组和模型+尼莫地平治疗组。用免疫组织化学方法检测脑内皮质、海马等区域NGF和bFGF蛋白表达。结果:缺血2h再灌注46 h后,脑内海马和皮质区的NGF表达降低,PNS能显著上调海马、皮质区及丘脑区域NGF的表达。缺血2h再灌注46h后,bFGF的表达各脑区无明显差异;但PNS能显著上调缺血再灌注损伤后胼胝体区域内bFGF的表达。结论:局灶性脑缺血再灌注后,PNS能上调缺血脑组织内NGF和bFGF表达,尤其是促进了NGF的表达,这可能是PNS对脑缺血后损伤神经元的保护机制之一。

补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷对大鼠血管内膜损伤后主动脉内膜增生和增殖细胞核抗原表达的影响

目的:探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷类对大鼠血管内膜损伤后主动脉内膜增生和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法:用国产2.0F球囊导管建立大鼠主动脉内皮剥脱模型,术后第1天开始灌胃给药,术后第15天取胸主动脉血管损伤段测定内膜增生程度及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:剥脱术后第15天,模型组大鼠主动脉内膜出现显著增生。与假手术组比较,术后各组中膜增生不明显(P>0.05),内膜增生明显(P<0.01)。生物碱组、苷组、补阳还五汤原方组和阿伐他汀组血管内膜增生程度轻于模型组(P<0.01)。模型组PCNA表达高于假手术组(P<0.01)。生物碱组、苷组、阿托伐他汀组PCNA表达高于假手术组(P<0.05,P<0.01),但均低于模型组(P<0.01)。补阳还五汤原方组大鼠PCNA表达高于假手术组(P<0.01),虽低于模型组,但差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补阳还五汤有效组分生物碱和苷类均可抑制血管内皮剥脱后的血管内膜增生,可能为补阳还五汤抗血管内膜增生的药效物质基础之一,其抗血管内膜增生的作用可能与降低PCNA表达有关。

常用苦寒药的急性毒性实验研究

目的 研究了解常用苦寒代表药的急性毒性。方法 取大黄、黄连、黄芩、黄柏、栀子、防己、苦参、龙胆草、山豆根水提液给小鼠灌胃,测定LD_(50)或最大耐受量(MTD),观察动物所出现的毒性反应。结果 以生药量计,黄连、苦参和山豆根的LD_(50)分别为4.89、9.36和40.06 g·kg^(-1);黄芩、栀子、大黄、汉防己、黄柏和龙胆草的MTD分别为160、160、120、120、80和80 g·kg^(-1)。服药后动物均表现有活动减少,大黄、黄连、黄芩、黄柏、栀子5味药直接对胃肠道有刺激,引起稀便甚至或腹泻。结论 9味药物均存在不同程度的急性毒性,一定剂量时可致动物死亡。

加味温胆汤对亚急性衰老大鼠血GSH-Px及肝、脑MAO、LPF的影响

目的探讨加味温胆汤对衰老的作用机理。方法采用Ｄ－半乳糖大鼠亚急性衰老模型，观察加味温胆汤抗衰老的作用。大鼠皮下注射Ｄ－半乳糖（４８ｍｇ／Ｋｇ）连续４０ｄ可使其脑组织ＭＡＯ活性升高（Ｐ＜０．０５），肝脏ＬＰＦ含量升高（Ｐ＜０．０５），而其血中ＧＳＨ－Ｐｘ活性降低（Ｐ＜０．０１）。在注射Ｄ－半乳糖同时灌胃加味温胆汤（φ（生药）＝１８．５ｇ／ｋｇ），可抑制模型动物肝ＬＰＦ含量的升高（Ｐ＜０．０５）和脑ＭＡＯ活性的升高（Ｐ＜０．０１），提高血中ＧＳＨ－Ｐｘ活性（Ｐ＜０．０１）。提示加味温胆汤具有抗衰老的作用，其作用机理可能与其抑制自由基反应。

三七总皂苷对脑缺血再灌注后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与组织基质金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of meta11oproteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分成假手术组、模型组、PNS组及依达拉奉组,连续给药4 d后结扎双侧颈总动脉20 min,再灌注24 h,建立脑缺血再灌注模型,用HE染色检测海马区神经细胞形态,用western-blot法检测MMP-9与TIMP-1蛋白在脑组织的表达。结果脑缺血再灌注24 h后,海马区神经元存活率减少,脑组织MMP-9表达增强,与假手术组比较,差异均具有统计学意义(P﹤0.01),而TIMP-1表达无显著性变化;三七总皂苷组脑组织神经元存活率增加,TIMP-1蛋白表达升高,MMP-9蛋白表达降低,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P﹤0.01,P﹤0.05)。结论脑缺血再灌注后,可通过激活MMP-9,引起细胞外基质破坏,导致神经元损伤。三七总皂苷可抑制脑缺血再灌注后脑组织MMP-9表达,增强TIMP-1表达。

青光安对高眼压兔眼滤过性手术后作用的研究

目的 :探讨青光安颗粒剂对慢性高眼压兔眼滤过性手术后作用的机制。方法 :通过与术后不用药组和正常兔眼的对照 ,观察青光安颗粒剂对慢性高眼压兔眼滤过性手术后眼压、滤过泡形态、结膜下瘢痕和视网膜组织结构的影响。结果 :与术后不用药组相比 ,青光安颗粒剂组术后眼压控制较好 ,滤过泡形态维持较好 ,在术后 1周 ,2周和 3周 ,两组眼压、滤过泡均有显著性差异 (P<0 .0 5～ 0 .0 1) ;青光安组兔眼手术区结膜下瘢痕面积和增殖的成纤维细胞明显少于术后不用药组 ;青光安组兔眼视网膜各层细胞的超微结构保存较好 ,而术后不用药组视网膜各层细胞均有空泡样改变。结论 :青光安颗粒剂能明显控制慢性高眼压兔眼滤过性手术后的眼压 ,维持术后滤过泡的形态 ,减少术后结膜下瘢痕的形成 ,恢复慢性高眼压后兔眼视网膜各层细胞的超微结构。

月华胶囊对耐多药结核鼠T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响

目的观察月华胶囊对耐多药结核鼠T淋巴细胞亚群、TH1/TH2细胞因子的影响及其机理。方法将耐多药结核鼠随机分成模型组、月华胶囊组、抗结核药(OEZD)组、月华胶囊+抗结核药组,另设正常组。测各组中的CD4、CD8、CD4/CD8、IFN-γ、IL-2、IL-10、TNF-α。结果①与模型组比较,月华胶囊组、抗结核药组、月华胶囊+抗结核药组均明显减少CD4、CD4/CD8、INF-γ、IL-2降低(P<0.01),明显改善IL-10、INF-α升高(P<0.05);②与抗结核药组比较,月华胶囊+抗结核药组各指标差异均有显著性(P<0.05)。结论月华胶囊对耐多药结核鼠有治疗作用,其机理是通过调控T淋巴细胞亚群CD4、CD4/CD8及其TH1型细胞因子IFN-γ、IL-2,TH2型细胞因子IL-10和TNF-α的水平而实现的。

定喘汤对哮喘大鼠肺组织和胸腺神经生长因子表达的影响

目的探讨定喘汤对哮喘大鼠肺组织及胸腺神经生长因子(NGF)表达的影响。方法将Wistar大鼠32只随机分为正常对照组、模型组、定喘汤组、必可酮组,每组8只。除正常对照组外,其余各组制备哮喘模型,并分别用药,共15d。采用免疫组织化学方法,观察大鼠肺和胸腺NGF表达的变化。结果模型组大鼠NGF在肺组织和胸腺表达明显高于正常对照组,而定喘汤组则明显低于模型组。结论NGF可能参与哮喘的发病过程,定喘汤抑制哮喘大鼠NGF的表达可能是其治疗哮喘的机制之一。

针刺筋会穴阳陵泉对帕金森模型小鼠黑质TH和GFAP表达的影响

目的观察比较1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森小鼠模型及其接受针刺治疗后黑质酪氨酸羟化酶(TH)和星形胶质细胞的胶质原纤维性蛋白(GFAP)的表达变化。方法以腹腔注射(30 mg/kg)MPTP诱导7 d形成帕金森小鼠模型,针刺双侧筋会穴"阳陵泉"及"舞蹈震颤区",每日1次共治疗21 d。针刺结束后,采用免疫荧光组化检测小鼠脑黑质TH的和GFAP的表达变化。结果在7 d造模后,模型组和针刺组TH阳性细胞显著丢失;治疗结束后,与模型组比较,针刺组TH阳性细胞数量增加,正常组和针刺组GFAP的阳性细胞数量减少。结论 MPTP可促进帕金森模型小鼠表达;针刺筋会穴阳陵泉可对MPTP诱导小鼠黑质多巴胺能神经有保护作用,能明显地减弱MPTP伤害性刺激引起的行为反应。

慢性应激大鼠肝郁脾虚证水通道蛋白的表达

目的:观测水通道蛋白在慢性应激肝郁脾虚证模型大鼠胃肠黏膜中的表达。方法:30只大鼠随机分为正常组、模型组及逍遥丸组,采用慢性应激加过度疲劳及饮食失节法复制大鼠肝郁脾虚证模型。采用免疫组化法检测各组大鼠胃肠黏膜组织中AQP3、AQP8的表达。结果:1胃肠黏膜AQP3:与正常组比较,模型组大鼠胃、小肠、结肠黏膜中AQP3表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,逍遥丸组胃、小肠、结肠黏膜中AQP3表达均上调(P<0.05,P<0.01)。2胃肠黏膜AQP8:与正常组比较,模型组大鼠胃、小肠、结肠黏膜中AQP8表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,逍遥丸组胃、小肠、结肠黏膜中AQP8表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:抑郁症肝郁脾虚模型大鼠胃肠黏膜组织中AQPs的表达出现异常。

化痰开窍方对D-半乳糖大鼠衰老模型自由基的影响

随着年龄的增加，机体各脏腑功能衰退，导致痰饮瘀血等病理产物在体内积聚，可加速衰老进程并导致一系列老年病的发生。因此，采用化痰、活血等治法可通过清除体内的代谢产物而延缓衰老［１］。自由基是导致机体衰老的重要物质［２］，Ｄ－半乳糖可以促进自由基的产生，增...

补阳还五汤四类有效部位对大鼠脑缺血再灌注后Caspase表达的作用

目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3)蛋白表达的变化,探讨补阳还五汤四类有效部位对它的影响。方法:采用线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱组、苷组、苷元组、多糖组和尼莫地平对照组,采用免疫组化法测定脑组织Caspase-1、Caspase-3蛋白表达的变化。结果:脑缺血2 h再灌注46 h后,在脉络膜可以见到Caspase-1表达增强,生物碱、苷、多糖、苷元可以抑制Caspase-1表达;在海马区、皮质区和髓质区均可见到Caspase-3蛋白表达增强,生物碱、苷、苷元和尼莫地平可以抑制Caspase-3表达。结论:补阳还五汤具有抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,生物碱、苷、多糖和苷元可能为其抗缺血性脑损伤的主要物质基础,其作用机制可能与抑制Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,拮抗脑缺血后神经元凋亡有关。