锌指蛋白281对肝癌细胞增殖的影响

目的:研究锌指蛋白281(zinc finger protein 281,ZNF281)对肝癌细胞增殖的作用。方法:用realtime PCR检测80例健康人群及206例肝癌患者外周血单个核细胞中ZNF281的mRNA表达水平,并分析肝癌患者单个核细胞中ZNF281的表达水平与多个临床病理参数的相关性。采用real-time PCR及Western blot实验分别检测ZNF281在肝癌细胞和永生化肝细胞中的mRNA及蛋白表达水平。利用小干扰RNA靶向沉默Huh-7细胞和SKHep-1细胞中ZNF281的表达,然后用MTS法检测肝癌细胞活力的变化;EdU标记实验检测肝癌细胞增殖能力的变化;平板集落形成实验检测肝癌细胞集落形成能力的变化;软琼脂集落形成实验检测肝癌细胞锚定非依赖生长能力的变化。结果:与正常健康人群相比,肝癌患者的外周血单个核细胞中ZNF281的mRNA表达水平明显增高,且其增高水平与肿瘤的大小、分期以及血管侵袭性存在正相关。肝癌细胞中ZNF281表达水平高于永生化肝细胞(P<0.05)。沉默ZNF281可以抑制肝癌细胞的活力,抑制肝癌细胞增殖,DNA合成降低,集落数量减少,锚定非依赖性生长能力减弱(P<0.05)。结论:ZNF281可促进肝癌细胞的增殖。

4380株医院感染病原菌的临床分布及耐药性分析

目的了解4 380株医院感染病原菌的临床分布及其耐药性。方法对重庆市急救医疗中心住院患者的标本按常规进行病原菌分离、鉴定和抗菌药物敏感性试验,结果用WHONET5.6软件进行分析。结果医院感染检出率前5位的科室为神经外科、神经内科、创伤科、肿瘤科和中心重症监护病房;7 326例临床送检标本中,分离到4 380株病原菌,检出率约为59.8%,其中革兰阴性杆菌占75.3%(3 300/4 380),革兰阳性球菌占19.0%(831/4 380),真菌占5.7%(249/4 380),排名前10位病原菌依次为:铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌属、阴沟肠杆菌、洛菲不动杆菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为49.1%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为81.2%,均未检出对糖肽类耐药的葡萄球菌,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性的大肠埃希菌检出率为58.9%,ESBLs阳性肺炎克雷伯菌检出率为28.9%。结论多种因素致患者免疫力低下,是条件致病菌引起医院感染的主要原因;病原菌以革兰阴性杆菌为主,其中铜绿假单胞菌上升尤为明显,真菌感染比例也有明显上升趋势。肠杆菌科细菌对碳青霉烯酶类、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物耐药率较低,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌呈现多重耐药趋势。

HMMR通过MEK/ERK信号通路促进肝细胞癌侵袭转移

目的探讨透明质酸介导的细胞游走受体(hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR)对肝细胞癌侵袭转移的影响及潜在机制。方法采用qRT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞系和肝癌组织,以及免疫组化检测肝癌组织中HMMR的表达;通过划痕实验、Transwell小室观察沉默/过表达HMMR对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;通过小鼠肝癌肺转移模型观察沉默HMMR对肝癌肺转移的影响;采用Western blot检测HMMR对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-MEK、p-ERK等蛋白水平的影响。结果肝癌细胞系中HMMR呈高表达。肝癌组织中HMMR的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),并且转移组癌组织中HMMR的水平明显高于非转移组(P<0.05)。沉默HMMR后细胞的迁移侵袭能力明显低于对照组(P<0.01),并且E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调(P<0.01);而过表达HMMR后细胞迁移侵袭能力显著增强(P<0.01),并且N-cadherin、Vimentin表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01)。体内实验结果显示基因敲减HMMR的肝癌细胞导致的肺转移病灶数显著低于对照组(P<0.05);过表达HMMR后p-MEK和p-ERK表达上调(P<0.01),而MEK、EKR无明显变化(P>0.05)。MEK抑制剂削弱了过表达HMMR介导的细胞的迁移侵袭(P<0.01)。结论HMMR在肝癌中高表达并且可能通过调控MEK/ERK信号通路从而促进肝细胞癌侵袭转移。

全断面爆破开挖支护在水库交通洞施工中的应用

本文以托帕水库交通洞爆破开挖支护工程作为研究背景,针对洞室围岩以Ⅲ级和Ⅳ级为主的现状,制定了全断面爆破开挖方案,采用光面爆破方案,制定了爆破设计参数,重点对较破碎的Ⅳ级围岩的爆破参数进行了优化和安全复核。对洞室支护使用喷混凝土,挂网喷混凝土和锚杆支护的方案,并采用注浆小导管和砂浆锚杆的加固方案,高效地解决了水库交通洞的安全施工问题,可为类似水库交通洞施工提供技术参考。

渠首工程除险分析及加固补强技术研究

以新疆叶县江卡渠首除险加固项目作为研究背景,针对工程现状泄洪闸冲沙闸老旧损毁严重、泄洪道冲刷岸坡垮塌的现状,在工程地质条件基础上,对河道的冲淤演变进行了分析,复核了渠首的规模和调动能力,并提出拆除闸室底板浆砌石而后浇筑混凝土,拆除重建冲砂闸和泄洪闸后消能设施及导流堤,对上游导流堤进行护坡加固的系统方案。有效解决了江卡渠首的稳定性安全问题。

蛋白酶激活受体2对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨蛋白酶激活受体2(protease activated receptor 2,PAR2)对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。方法 RT-qPCR检测100例肝癌组织及相应的癌旁组织中PAR2 mRNA的表达,并分析肝癌患者临床病理参数与PAR2表达水平之间的相关性。RT-qPCR及Western blot检测原代肝细胞、永生化肝细胞及肝癌细胞中PAR2 mRNA及蛋白的表达。采用siRNA靶向沉默PAR2的表达,MTS法及软琼脂集落形成实验检测沉默PAR2对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术及PARP的剪切检测沉默PAR2对肝癌细胞凋亡的影响。RT-qPCR筛选PAR2调控的凋亡靶基因,并用Western blot进行验证。结果肝癌组织中PAR2 mRNA的相对表达量为(1.86±1.26),明显高于癌旁组织(0.96±0.66,P<0.001),且PAR2在肝癌组织中表达上调与肿瘤的长径以及分期均相关(P=0.002)。PAR2在肝癌细胞中的表达高于永生化肝细胞和原代肝细胞(P<0.05)。沉默PAR2抑制肝癌细胞SK-Hep-1和PLC/PRF/5的活性(P<0.01)及集落形成能力(P<0.01),沉默PAR2导致SK-Hep-1和PLC/PRF/5细胞凋亡比例分别增加109%(P<0.01)和112%(P<0.01);且沉默PAR2增加了Bax mRNA和蛋白表达水平。结论 PAR2可通过影响Bax的表达而影响肝癌细胞的增殖与凋亡。

学会学习：流动儿童学法指导教育实践探索

开展学法指导，让学生学会学习，是实现人的自主发展的需要。在流动儿童比例达到90％的重庆市南岸区海棠溪小学开展学法指导，让流动儿童学会学习，既是学校发展的需要，更是提高这些孩子素质的需要。经过几年来与流动儿童的接触，对于如何让他们学会主城小学的学习方式，尽快融入城市和陌生的学校，笔者有了一些感悟与探索。

问题解决与数学探究活动的开展

21世纪的劳动者将是善于吸取新思想,能适应各种变化会解决各种复杂问题的一代人.他们所处的社会是信息社会,瞬息万变的信息社会需要巧干、会适应复杂情景的劳动者.“问题解决”教学模式对于英才教育和大众教育都是需要的.问题解决在教学中为学生提供了一个发现、创新的环境和机会,为教师提供了一条培养学生解题能力、自控能力和应用数学知识能力的有效途径.那么我们在教学过程中该如何开展问题解决与数学探索活动,以提高学生的数学素质呢？

小学生参与学校校园文化建设活动方案及反思

一、活动背景 自2013年9月起，学校申请了南岸区教育科学规划幸福教育专项课题的子课题《小学生参与新建学校校园文化建设的实践研究》，以新建学校校园文化建设为契机，创造性地开展一系列学生活动，丰富学生的校园生活，给孩子们搭建一个培养能力、展现才华的舞台，增强学生在学校的愉悦感，真正实现快乐学习，幸福生活。

血清碱性磷酸酶水平检测对原发性高血压患者靶器官损伤的相关性研究

目的分析原发性高血压患者血清碱性磷酸酶(ALP)水平与患者靶器官损伤的相关性。方法回顾性分析该院心血管内科收治的186例原发性高血压患者(观察组)和同期在该院体检的35例体检健康者(健康对照组)的临床资料,依据头颅CT检查结果将患者分为并发腔隙性脑梗死组(n=63)和未并发腔隙性脑梗死组(n=123),根据肾功能生化结果分为并发肾功能损害组(n=52)和未并发肾功能损害组(n=134),检测各组血清ALP水平,比较各组临床资料,并分析ALP水平与原发性高血压患者靶器官损伤的相关性。结果并发腔隙性脑梗死组、并发肾功能损害组血清ALP分别高于未并发腔隙性脑梗死组、未并发肾功能损害组,且均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ALP、年龄、饮酒史、血压是原发性高血压患者靶器官损伤的影响因素(P<0.05),原发性高血压患者靶器官损伤与血压和ALP有显著相关性(r=0.305、0.321,P<0.05)。结论原发性高血压靶器官损伤患者血清ALP水平明显升高,血清ALP水平与原发性高血压患者靶器官损伤存在明显的相关性,临床可定期监测原发性高血压患者血清ALP水平以延缓疾病进展。

长链醇类和油类物质洗涤液在磁珠法DNA和RNA共提取中的应用

目的探讨长链醇类和油类物质作为洗涤液在磁珠法核酸提取中的应用价值。方法分别以5种长链醇类物质(十一醇、正癸醇、正辛醇、1-壬醇、2-十二烷醇)和3种油类物质(二甲基硅油、FC-40、石蜡油)作为洗涤液,采用磁珠法对102~105拷贝/μL的DNA和RNA混合物进行共提取,以传统的70%乙醇洗涤液作为对照。采用聚合酶链反应(PCR)或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对提取的核酸进行扩增,采用循环阈值(Ct)评价不同洗涤液的核酸提取效率。以油类物质为洗涤液,比较不同试剂状态(干式试剂、湿式试剂)、不同混匀方式(涡旋混匀、移液枪混匀、颠倒混匀)的核酸提取性能,并分析其用于提取临床样本病原体基因组核酸的性能。结果8种洗涤液中,二甲基硅油和FC-40的核酸提取性能与传统的70%乙醇基本一致,可有效提取出102~105拷贝/μL DNA或RNA,对PCR和RT-PCR均无抑制作用。以70%乙醇洗涤液为对照,将二甲基硅油或FC-40作为核酸提取洗涤液时,无论是配合干式试剂还是湿式试剂,无论采用哪种混匀方式,提取103拷贝/μL DNA和RNA模板的Ct值差异均无统计学意义(P>0.05);提取肺炎支原体模拟临床样本DNA的Ct值差异无统计学意义(P>0.05),且与商品化核酸提取试剂盒基本一致。结论二甲基硅油和FC-40可作为磁珠法核酸共提取的洗涤液,并可用于微流控产品的开发。

聚焦体育与健康学科核心素养全面提升学生课外体育训练及智育价值探索与实践创新

本研究旨在探讨课外体育训练对学生的身心健康和综合素养的影响,以及如何通过创新实践提高训练质量和效果。通过调查现状和问题分析,我们提出了科学设置训练内容、合理组织训练形式和注重过程管理等创新实践对策。实施效果显示,这些对策有助于培养学生的兴趣,提高专项能力,促进素质全面发展。本研究强调了课外体育训练在学生教育中的重要性,为未来研究和实践提供了有益的参考。

跨境理财通机制构建刍议

自2019年《粤港澳大湾区规划纲要》发布后,市场立即对“有序推进金融市场和金融基础设施互联互通,扩大香港与内地居民和机构跨境投资及两地居民投资对方金融产品的方式与渠道”展开了热议和探讨。2020年5月14日,人民银行等四部委发布《关于金融支持粤港澳大湾区建设的意见》(银发(2020)95号),首次正式提出探索建立跨境理财通机制。

大跨度地下洞室开挖施工

大跨度地下洞室开挖一直以来都是地下工程施工的重点和难点,其松弛塌落范围比单拱洞室要大得多,作用在支护衬砌结构上的荷载也要比单拱洞室大得多,如何保持围岩的稳定性成了急需解决的技术难题。文章通过结合某水电站地下洞室开挖工程实例,该工程难点在于地下洞室大跨度、高边墙的开挖稳定问题,为确保开挖施工安全,针对各个洞室采取严格的开挖施工技术措施,为同类工程提供参考实例。

市政工程深基坑施工工艺及质控措施

基坑支护技术顾名思义就是在基坑内的支护工作,并且大量的基坑工作都和现存的地下建筑有关,与城市的现代发展问题息息相关。所以,为了缓解城市建设中所遇到的问题,更好地满足人们对居住环境的需求,为人们创造出更理想的城市环境,尤其表现在地下设计的施工建设工程成为城市建设的主体,越来越多的城市建设趋向于地下工程。