三种鳖线粒体DNA细胞色素b基因序列的比较分析

对中华鳖、砂鳖和山瑞鳖线粒体DNA细胞色素b基因进行了引物设计、PCR扩增、序列测定和PCR-PFLP(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)分析。研究结果表明中华鳖、砂鳖与山瑞鳖线粒体DNACytb基因的序列全长相同,均为1140bp,其A、C、G、T含量相似,分别为378个(33.2%)、322个(28.2%)1、22个(10.7%)、318个(27.9%)、373个(32.7%)、324个(28.4%)、124个(10.9%)、319个(28.0%)、380个(33.3%)3、30个(28.9%)、127个(11.1%)、303个(26.7%)。同源性及序列差异率分析表明:中华鳖与砂鳖b基因序列的同源性为92.3%,中华鳖、山瑞鳖的为85.0%,砂鳖、山瑞鳖的为84.1%;中华鳖与砂鳖b基因核苷酸序列间的差异率为7.7%,中华鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.0%,砂鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.9%,而中华鳖、砂鳖、山瑞鳖各自个体间的序列差异率分别为2.37%、0.88%和0.18%,种间差异显著。用内切酶酶切分析其扩增产物,结果表明:用内切酶NdeⅠ可准确鉴别砂鳖,而用内切酶BamHⅠ则可准确鉴别山瑞鳖。内切酶NdeⅠ和BamHⅠ的联用分析,可使这三种鳖在分子水平都得到明确的鉴定。从三种鳖线粒体DNACytb基因核苷酸序列的显著差异和酶切位点的变化,可以进一步证明砂鳖是不同于中华鳖的鳖属一新种。

中华鳖与砂鳖线粒体DNA 12S rRNA基因序列的比较分析和分子鉴定标记

对中华鳖和砂鳖线粒体DNA12SrRNA基因进行了引物设计、PCR扩增、序列测定和PCRRFLP分析。研究结果表明:中华鳖、砂鳖线粒体DNA12SrRNA基因片段的碱基序列长度相同,均为562bp,其A、T、C、G含量相似,分别为209个(37.2%)、121个(21.5%)、145个(25.8%)、87个(15.5%)和207个(36.8%)、120个(21.4%)、145个(25.8%)、90个(16%)。两序列间共有13处碱基不同,序列差异率为2.31%,中华鳖与砂鳖各自个体间的平均核苷酸序列差异率分别为0.53%和0.36%,种间差异显著;用内切酶MspI酶切两种鳖的12SrRNA基因片段,在砂鳖中可得到大小为519bp和43bp两个片段,而中华鳖无此酶切位点,这可作为准确鉴别中华鳖和砂鳖的分子鉴定标记。从两种鳖线粒体DNA12SrRNA基因片段碱基的显著差异和MspI酶切位点的变化,可以进一步证明砂鳖是不同于中华鳖的鳖属一新种。

中华鳖种群RAPD分析

选用14个随机引物对中华鳖基因组DNA进行了随机扩增DNA片段多态性(RAPD)分析.14个引物,在8个待检样品中共扩增出714条清晰的DNA片段,片段大小在200～3 000bp之间,平均每一引物在每个样品中扩增了6.0条带.统计结果表明,中华鳖群体内平均相似率0.857,总平均带纹频率0.773,遗传变异率为0.227.研究表明,中华鳖为遗传共享度较高的群体.

黄颡鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及特异性组织化学染色技术,研究了黄颡鱼成体眼、心脏、肾脏、肝脏、肌肉及尾鳍等6种组织中的4种同工酶(LDH、MDH、SOD、EST)分化表达模式。结果表明,黄颡鱼的同工酶EST、SOD、MDH具有明显的组织特异性,LDH无明显的组织差异,并对同工酶的组织表达特异性的生理意义进行分析和讨论。

miR-200c与肿瘤进展关系的研究进展

microRNA(miRNA)是内源性非编码单链小RNA,参与细胞增殖、凋亡与分化等多种重要生命活动的调控。近年来研究发现,miRNAs参与多种恶性肿瘤的演进,起抑癌基因或原癌基因的作用。miR-200c是上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal,EMT)过程中的重要调节基因,除了在正常细胞的表型转换中起作用,还在多种类型癌细胞的表型转换中起调节作用,能促进或者抑制肿瘤的侵袭转移能力。此外,关于miR-200c的研究还涉及肿瘤的耐药性和凋亡抗性。研究证实,miR-200c能够促进或抑制肿瘤的侵袭转移,逆转肿瘤细胞的耐药性和凋亡抗性。本文主要对不同肿瘤中miR-200c对肿瘤进展的影响进行综述。

miR-200c下调KRAS基因表达抑制膀胱癌细胞体外增殖能力

目的探讨miR-200c对膀胱癌细胞体外增殖能力的作用及机制。方法慢病毒感染法建立稳定过表达和稳定低表达miR-200c膀胱癌细胞,分为对照组、稳定过表达miR-200c组(miR-200c组)、稳定低表达miR-200c组(miR-200c-inhibit组),实时定量qRT-PCR和Western blot检测不同实验组膀胱癌细胞中miR-200c、KRAS的表达量,克隆试验检测不同组膀胱癌细胞系的增殖能力。结果CCK-8试验显示对照组T24和UM-UC-3与miR-200c组分别为0.833 3±0.062 1、0.650 3±0.088 7和0.939 0±0.018 1、0.806 0±0.021 6,2组间差异有统计学意义(T24,P<0.05;UM-UC-3,P<0.01)。稳定过表达miR-200c后,膀胱癌细胞系内KRAS蛋白的表达降低(P<0.05)。结论 miR-200c在体外通过下调KRAS基因降低膀胱癌细胞的增殖能力。

MicroRNA-135在肿瘤中的研究进展

Mircro RNA(mi RNAs)通过与信使RNA(m RNA)的序列互补来降解靶m RNA并抑制蛋白质翻译,在细胞增殖、分化、发育和凋亡等方面起着重要的作用。许多mi RNA可作为原癌基因或抑癌基因,在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用。越来越多的研究表明,微mi R-135(mi R-135)与肿瘤的发生发展密切相关,本文主要对近年来mi R-135参与调节肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、转移、耐药和预后等方面的机制作一综述,期望能对肿瘤的早期诊断、治疗和预后判断有所帮助。

金鱼蛋白磷酸酶2A-B″家族Alpha和Gamma调节基因的cDNA克隆及mRNA表达

以金鱼卵巢组织作为材料,运用RT—PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆得到蛋白磷酸酶2A(PP2A)调节亚基B″家族中γ基因(G5PR)cDNA全序列和α基因(PR130)cDNA部分序列.结果显示γ基因cDNA全长1885bp,编码一个含457个氨基酸的蛋白质.而α基因cDNA长1781bp,编码的多肽共含426个氨基酸,系α亚基的部分蛋白序列.它们与已知其他物种对应的B″家族蛋白质均有着很高的同源性.结构预测分析发现,α和γ两条多肽均存在PP2A调节亚基B″家族成员共有的两个EF-HAND结构域.用RT-PCR的方法检测了这两个基因在金鱼不同组织和胚胎发育不同时期的mRNA表达水平.结果表明,γ亚基在金鱼多种组织和各个胚胎发育时期中均有较高表达且表达量比较平均,仅在卵巢和精巢组织中最为丰富.与γ亚基表达模式相比,α亚基表达呈现明显的组织和胚胎发育阶段差异性,在卵巢和肌肉组织中最高,在肾脏和鳃中最低,在原肠胚、神经胚、脑泡分化和体色素等胚胎发育时期的表达较弱,而在其他时期中的表达较强.据此,推测α、γ两调节亚基可能在金鱼不同组织和胚胎发育过程中起着特定的作用.此外,进一步的分析发现,α基因除参与PP2A全酶功能外还可能具有独立的功能.

一氧化氮前体药物与前列腺癌的研究进展

前列腺癌是男性最常见的肿瘤之一。一氧化氮(nitric oxide,NO)作为生物信使或效应分子在体内发挥重要的生理作用,且其体内水平异常与多种疾病的发生和发展密切相关。因此,一氧化氮前体型药物的研究备受关注。一些NO前体药物已被证实具有良好的抗肿瘤活性,显示出广泛的临床应用潜力和价值。目前,NO前体药物中显示出显著抗肿瘤效应的主要有有机硝酸酯、硝普盐、S-亚硝基硫醇和偶氮二醇烯鎓盐等。一氧化氮前体药可通过靶向释放NO,直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡、增强免疫系统作用、削弱肿瘤细胞增殖及侵袭能力,并抑制其转移,提高肿瘤细胞对放化疗的敏感度,从而发挥抗肿瘤作用。本文就近年来NO前体药物对前列腺癌作用的研究进展作一综述。

金属钌复合物在泌尿系肿瘤中的研究进展

金属铂类药物作为抗肿瘤药物已经广泛应用于临床,然而铂类药物存在许多缺点,比如明显的毒副作用、药物耐受性以及低水溶性,产生了寻找替代含过渡金属的抗肿瘤药物的需要。为了克服这些缺点,金属钌复合物应运而生并且展现出良好的前景。金属钌复合物在体内和体外都显示了良好的药物学性能,同时具有低毒和良好选择性,并且能克服顺铂耐受的缺点。因此,针对金属钌复合物的良好抗肿瘤性能,有望改善泌尿系肿瘤的治疗现状。本文主要对近年来金属钌复合物在泌尿系肿瘤中的研究进展进行综述。

前列腺癌患者生存质量及影响因素分析

目的 探讨影响前列腺癌患者生存质量的相关因素.方法 采用世界卫生组织生存质量简表（WHOQOL-BREF）、家庭功能评估量表（APGAP）和抑郁自评量表（SDS）对我院泌尿外科住院的113名前列腺癌患者进行问卷调查.结果 全部113名前列腺癌患者生存质量得分生理、心理、社会关系和环境领域得分分别为（48.57±13.25）、（41.42±11.93）、（52.34±12.65）和（60.63±13.94）分;生理、心理、社会关系、环境领域生存质量得分高收入患者高于低收入患者（F=3.55、4.17、3.99、3.72,P＜0.05）,医保、新农合患者高于自费患者（F=5.44、3.94、6.04、6.22,P＜0.05）,无尿道压迫症状患者高于有尿道压迫症状患者（t =-2.22、-2.98、-2.03、-2.44,P＜0.05）;生理、心理和环境领域生存质量得分高文化程度患者高于低文化程度患者（F=3.16、3.67、8.68,P＜0.05）;生理、心理和社会关系领域生存质量得分病程短的患者高于病程长的患者（F=3.92、4.30、3.53,P＜0.05）,单纯手术患者高于其他治疗方式的患者（F=10.42、7.37、4.42,P＜0.05）;家庭功能障碍越严重,生存质量得分越低（F=6.66、4.02、3.79、1.68,P＜0.05）,抑郁状况越严重,生存质量得分越低（F=4.36、6.43、3.45、4.81,P＜0.05）;Logistic回归分析显示经济状况、尿道压迫症状、家庭功能和抑郁状况是前列腺癌患者生存质量自我综合评分的影响因素.结论 前列腺患者生存质量的影响因素主要有经济状况、付费方式、文化程度等.家庭功能、抑郁状况与前列腺癌患者生存质量明显相关.应充分利用家庭和社会的力量重视患者的身心健康,以提高前列腺患者的生存质量.