血清miR-382-5p在丙型肝炎病毒相关性肝细胞癌患者中的表达及其临床意义

目的 探究血清miR-382-5p在丙型肝炎病毒(HCV)相关性肝细胞癌(HCC)患者中的表达及其联合甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原-Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)对HCC的诊断价值。方法 选择2020年1月至2023年9月儋州市人民医院收治的102例HCV相关性HCC患者作为研究对象(设为HCC组),另选择同期在该院就诊的55例病因为HCV感染的肝硬化患者作为肝硬化组,以及同期该院体检中心的45名健康体检者作为健康对照组。比较3组的血清miR-382-5p、AFP和PIVKA-Ⅱ表达水平,并分析血清miR-382-5p表达水平与HCV相关性HCC患者临床病理特征的关系。采用ROC曲线分析血清mi R-382-5p、AFP和PIVKA-Ⅱ表达水平对HCV相关性HCC的诊断价值。采用Pearson相关性分析探讨血清miR-382-5p与AFP、PIVKA-Ⅱ表达水平的关系。结果HCC组的血清miR-382-5p、AFP和PIVKA-Ⅱ表达水平均分别高于肝硬化组和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.001)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、Child-Pugh分级C级、低分化、有门静脉癌栓和有远处转移的HCV相关性HCC患者的血清mi R-382-5p表达水平分别高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、Child-Pugh分级A~B级、中高分化、无门静脉癌栓和无远处转移者,差异均有统计学意义(P均<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-382-5p、AFP和PIVKA-Ⅱ联合检测诊断HCV相关性HCC的AUC分别大于单项检测,且联合检测的敏感度最高。Pearson相关性分析结果显示,HCV相关性HCC患者的血清miR-382-5p与AFP、PIVKA-Ⅱ表达水平均呈正相关(P均<0.001)。结论 HCV相关性HCC患者的血清miR-382-5p表达上调,其联合血清AFP和PIVKA-Ⅱ检测对HCV相关性HCC具有较高的诊断价值。

lncRNA HOXC-AS3吸附miR-216a-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的:探讨lncRNA HOXC-AS3对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:HOXC-AS3小干扰RNA(si-HOXC-AS3)、HOXC-AS3过表达载体(pcDNA-HOXC-AS3)或miR-216a-5p抑制剂(anti-miR-216a-5p)Western blot检测细胞增殖抗原Ki-67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达,双荧光素酶报告系统验证lncRNA H1299、A549和GLC-12中lncRNA HOXC-AS3水平上升,miR-216a-5p水平降低(P<0.05);沉默lncRNA HOXC-AS3可抑制A549高E-cadherin蛋白表达,过表达lncRNA HOXC-AS3可促进A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT;lncRNA HOXC-AS3靶向吸附cRNA HOXC-AS3通过吸附miR-216a-5p促进NSCLC A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,是肺癌的潜在分子靶点。

miR-98调节IL-6/STAT3通路对肺癌HCC827细胞吉非替尼耐药的影响

目的:探究microRNA-98(miR-98)调节白细胞介素-6/信号传导与转录激活因子3(IL-6/STAT3)通路对肺癌HCC827细胞吉非替尼耐药(GR)的影响。方法:体外培养肺癌HCC827细胞(NC组),采用肝细胞生长因子(HGF)联合吉非替尼反复诱导肺癌HCC827细胞建立吉非替尼耐药HCC827细胞(GR组),转染miR-98 mimics/NC,分别设为mimic组和mimic-NC组,另外将亲本HCC827细胞作为对照组(Con组)。采用噻唑蓝(MTT)试剂盒检测细胞活性,流式细胞仪检查细胞凋亡情况,实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-98、IL-6、STAT3 mRNA表达,免疫印迹(WB)检测细胞IL-6、STAT3蛋白表达。结果:随吉非替尼处理浓度增加,HCC827细胞、HCC827 GR细胞活性依次降低(P<0.05),同一浓度,HCC827 GR细胞活性高于HCC827细胞(P<0.05)。与Con组比较,NC组、mimics-NC组细胞中miR-98水平降低,而mimics组细胞中miR-98水平明显高于Con组、NC组、mimics-NC组(P<0.05);与Con组比较,NC组、mimics-NC组、mimics组细胞中IL-6、STAT3 mRNA及蛋白水平、细胞活性明显升高,而细胞凋亡率明显降低(P<0.05),且mimics组细胞中IL-6、STAT3 mRNA及蛋白水平、细胞活性明显低于NC组、mimics-NC组,而细胞凋亡率明显高于NC组、mimics-NC组(P<0.05)。结论:miR-98过表达可扭转HCC827细胞吉非替尼耐药,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3通路活化有关。

薯莨提取物通过KTN1反义RNA 1对食管癌细胞生物行为的影响

目的研究薯莨提取物是否影响食管癌细胞的生物学行为。方法自2019年1月至2020年1月,采用(10、20和30 mg/L)浓度的薯莨提取物处理食管癌Eca109细胞,分别记为薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组,另以未加薯莨提取物的Eca109细胞作为对照组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定细胞增殖,克隆形成实验分析细胞克隆能力,蛋白质印迹法检测周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)、上皮钙黏素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达,Transwell分析细胞迁移、侵袭,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测长链非编码RNA(lncRNA)KTN1反义RNA 1(KTN1-AS1)表达。在Eca109细胞中转染KTN1-AS1小干扰RNA(si-KTN1-AS1),或转染KTN1-AS1过表达质粒(pcDNA3.1-KTN1-AS1)并使用薯莨提取物处理,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与对照组相比,薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组Eca109细胞的抑制率[(1.06±0.21)%比(19.25±1.68)%比(38.57±3.69)%比(62.14±6.06)%]、P21、E-cadherin蛋白水平明显提高,细胞的克隆形成数、迁移细胞数[(142.00±11.59)比(121.00±11.07)比(94.00±9.26)比(73.00±7.15)]、侵袭细胞数[(81.00±8.03)比(67.00±6.21)比(50.00±5.04)比(37.00±3.56)]、MMP-2蛋白表达量、KTN1-AS1表达量显著减少(P<0.05),均呈浓度依赖性。抑制KTN1-AS1明显增加Eca109细胞的抑制率[(1.04±0.17)%比(47.81±4.55)%]、E-cadherin、P21蛋白表达量,显著降低迁移细胞数[(144.00±13.52)比(85.00±8.51)]、侵袭细胞数[(80.00±8.11)比(47.00±4.36)]、克隆形成数和MMP-2蛋白水平(P<0.05)。过表达KTN1-AS1能减弱薯莨提取物对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论薯莨提取物通过下调食管癌细胞中KTN1-AS1的表达,发挥抑制细胞增殖、迁移和侵袭的作用。

参芪扶正注射液联合CAF方案化疗对乳腺癌患者造血功能、免疫功能和生活质量的影响

目的：探讨参芪扶正注射液联合CAF方案化疗对乳腺癌患者造血功能、免疫功能和生活质量的影响。方法：选择2叭2年1月-2017年1月在医院进行治疗的乳腺癌者128例，按照随机数字的方法分为对照组和观察组，每组64例患者，对照组患者采用cAF的化疗方案，观察组患者在对照组化疗方案的基础上使用参芪扶正注射液，对治疗的效果进行对比。结果：两组患者的造血功能和免疫功能指标均出现了不同程度的恶化，但是观察组患者恶化的程度低于对照组患者，各类指标的数据差异具有统计学意义（P〈0．05）。观察组患者的治疗效果，治疗有效率，疾病控制率，生活质量改善程度均优于对照组，数据差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：利用参芪扶正注射液联合CAF方案对乳腺癌患者进行干预，可以缓解患者造血功能的衰退和免疫功能的破坏，使患者的生活质量得到改善，值得在临床范围内进行推广。

ICOS与4-1BB共刺激域增强CAR-T细胞在肺癌中的抗肿瘤活性

目的:探究整合ICOS共刺激结构域的三代CAR-T细胞是否可对肺癌产生显著抗肿瘤活性。方法:采用慢病毒感染法构建二代CAR-T细胞(MSLN-BBz CAR-T)及三代CAR-T细胞(MSLN-ICOSBBz CAR-T),流式细胞术检测CAR-T细胞阳性率、效靶细胞共孵育后T细胞CD69表达以及肿瘤浸润T细胞抗肿瘤表型;荧光显微镜观察效靶细胞共孵育后T细胞增殖情况;活体成像检测肺癌细胞在小鼠体内的生长情况;HE染色检测CAR-T细胞对主要脏器的毒性。结果:流式细胞术结果显示,成功采用慢病毒构建MSLN-BBz CAR-T及MSLN-ICOSBBz CAR-T,阳性率约为40%;效靶细胞共孵育后,MSLN-ICOSBBz CAR-T较MSLN-BBz CAR-T CD69表达显著升高(P<0.001),同时MSLN-ICOSBBz CAR-T靶细胞杀伤能力更强(P<0.001);小鼠移植瘤模型显示,MSLN-ICOSBBz CAR-T比MSLN-BBz CAR-T拥有更强的体内抑瘤能力(P<0.01);肿瘤浸润T细胞分析发现,相较于MSLN-BBz CAR-T,MSLN-ICOSBBz CAR-T IFN-γ表达更高(P<0.0001),PD-1表达则较低(P<0.0001),提示其肿瘤杀伤活性更好;HE染色结果显示,MSLN-BBz CAR-T及MSLN-ICOSBBz CAR-T均未对主要脏器造成明显损伤。结论:ICOS协同4-BB共刺激结构域可显著提高CAR-T细胞对肺癌的抗肿瘤活性,为MSLN-ICOSBBz CAR-T对肺癌治疗的进一步探索提供了依据。

博来霉素联合电化学疗法治疗颜面部巨大皮肤癌临床观察

目的探讨博来霉素联合电化学疗法治疗颜面部巨大皮肤癌的临床效果。方法选取医院2016年1月至2018年10月医院收治的颜面部巨大皮肤癌(病灶基底宽>3 cm)患者137例,按随机数字表法分为联合组(45例)、电化学组(46例)及博来霉素组(46例)。电化学组患者单用电化学治疗,博来霉素组患者予注射用盐酸博来霉素治疗,联合组患者联用上述2种疗法。3组均治疗1个月,随访2年。结果治疗后,联合组及电化学组患者瘤体脱落时间、结痂时间均显著短于博来霉素组,结痂直径均显著小于博来霉素组(P<0.05);联合组患者疾病的总控制率(100.00%)及总缓解率(86.67%)显著高于电化学组(78.26%,58.70%)及博来霉素组(71.74%,45.65%)(P<0.05);3组患者不良反应发生率比较无显著差异(P>0.05);联合组患者随访期间复发率及再治疗率显著低于电化学组及博来霉素组(χ^(2)=5.829,6.604,7.143,4.828,P=0.016,0.010,0.008,0.028),电化学组与博来霉素组比较无显著差异(χ^(2)=0.019,0.006,P=0.892,0.936)。结论博来霉素联合电化学疗法治疗颜面部巨大皮肤癌近远期疗效均较好,且方法简便易行。

甲状腺微小乳头状癌hsa_circRNA_001059表达及其临床价值研究

目的 分析hsa_circRNA_001059在甲状腺微小乳头状癌(PTMC)中的表达情况,探讨其与PTMC患者颈部淋巴结转移的关系,并分析其对PTMC的诊断价值。方法 收集2018年1月至2021年5月儋州市人民医院收治的102例PTMC患者(PTMC组)及同期在本院体检正常者50名(对照组)血液标本,以及PTMC组患者的PTMC组织与配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法检测血浆及组织hsa_circRNA_001059表达水平;比较PTMC颈部淋巴结转移患者与无颈部淋巴结转移患者癌组织、血浆hsa_circRNA_001059表达水平;分析hsa_circRNA_001059表达水平对PTMC的诊断价值及对PTMC患者颈部淋巴结转移的诊断价值。结果 PTMC组血浆hsa_circRNA_001059表达水平高于对照组[(2.40±1.02)比(0.74±0.16),P<0.05]。PTMC组织hsa_circRNA_001059表达水平高于癌旁正常组织[(2.87±1.15)比(0.81±0.20),P<0.05]。PTMC颈部淋巴结转移患者血浆、组织hsa_circRNA_001059表达水平均明显高于无颈部淋巴结转移患者(均P<0.05)。ROC曲线显示,血浆、癌组织hsa_circRNA_001059诊断PTMC的最佳截断值为1.50、1.72,AUC为0.813(95%CI:0.755~0.874)、0.855(95%CI:0.794~0.912),灵敏度为0.816、0.830,特异度为0.782、0.857。血浆、癌组织hsa_circRNA_001059诊断PTMC患者颈部淋巴结转移的最佳截断值为2.65、3.17,AUC为0.860(95%CI:0.802~0.924)、0.894(95%CI:0.836~0.957),灵敏度为0.816、0.830,特异度为0.863、0.882。结论 hsa_circRNA_001059在PTMC患者中呈高表达,对诊断PTMC及淋巴结转移有较好的临床价值。