PBL结合SP教学法在肩关节体格检查教学中的应用

肩痛是排在颈痛和腰背痛之后第三常见的骨骼肌肉疾病[1]。据统计,每年的发病率为2.93%,一般人群的终生患病率高达66.7%[2]。肩痛有很多原因,比如肩袖损伤、肩峰撞击综合征等等。但是临床上肩痛常被误诊为“肩周炎”,不仅延误病情,影响患者的生活质量,还增加了患者及社会的负担。目前虽然有各种设备应用于临床帮助诊断,但是病史和体格检查始终是鉴别诊断的基础。

麦冬皂苷B通过p38信号通路诱导人骨肉瘤143B细胞凋亡

目的:探究麦冬皂苷B对人骨肉瘤143B细胞的增殖抑制作用及相关分子机制。方法:采用CCK-8实验检测麦冬皂苷B对143B细胞活力的影响,确定IC50与给药剂量。采用集落形成实验考察药物对细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst 33258染色探索药物对肿瘤细胞凋亡的影响;Transwell细胞迁移实验研究药物对细胞迁移能力的影响;Western blot法观察凋亡相关蛋白的变化,以及药物与p38信号通路的相关性。通过p38抑制剂SB203580进一步验证凋亡与上述通路的关系。裸鼠皮下成瘤实验评价肿瘤生长能力变化。结果:麦冬皂苷B能抑制人骨肉瘤143B细胞的增殖与迁移能力,并诱导凋亡,且效应与药物剂量和作用时间正相关。Western blot结果显示,麦冬皂苷B激活了凋亡相关蛋白与p38信号通路,同时抑制了Bcl-2表达。使用p38抑制剂SB203580能缓解药物介导的凋亡与增殖抑制。此外,麦冬皂苷B能抑制裸鼠皮下成瘤。结论:麦冬皂苷B可通过p38信号通路抑制人骨肉瘤143B细胞增殖,并能诱导细胞凋亡的发生。

circTNPO1通过下调miR-338-3p的表达促进骨肉瘤增殖迁移

目的探讨circTNPO1通过下调miR-338-3p的表达促进骨肉瘤细胞增殖迁移的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中circTNPO1、miR-338-3p、Ki-67和Vimentin的表达水平。构建circTNPO1稳定敲降的143B细胞系,细胞计数试剂盒8实验与细胞划痕实验检测细胞增殖迁移能力,荧光素酶报告基因实验验证circTNPO1与miR-338-3p的关系。建立裸鼠sh-circTNPO1143B细胞皮下成瘤模型,瘤内注射miR-338-3p抑制剂与miR阴性对照,观察肿瘤重量与体积的变化。免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67的表达。结果骨肉瘤细胞系U2OS、HOS、MG63、143B、ZOS和ZOSM中circTNPO1 mRNA表达水平分别为2.73±0.27、3.18±0.54、4.33±0.52、5.75±0.65、4.50±0.49和3.96±0.35,均高于成骨细胞hFOB1.19(1.00±0.09,均P<0.05)。培养48和72 h后,sh-circTNPO1#1组143B细胞吸光度(A)值分别为0.81±0.05和1.09±0.06,sh-circTNPO1#2组143B细胞A值分别为0.84±0.04和1.2±0.04,均低于对照组(1.00±0.06和1.49±0.06,均P<0.05)。转染48和72 h时,sh-circTNPO1#1+miR-338-3p抑制剂组143B细胞A值分别为0.92±0.06和1.32±0.07,均高于sh-circTNPO1#1+miR阴性对照组(分别为0.82±0.04和1.07±0.08,均P<0.05)。细胞划痕实验显示,sh-circTNPO1#1组和sh-circTNPO1#2组143B细胞迁移率分别为(24.43±2.15)%和(39.70±4.20)%,均低于对照组[(56.51±3.27)%,均P<0.05]。sh-circTNPO1#1+miR-338-3p抑制剂组143B细胞迁移率[(46.10±5.71)%]高于sh-circTNPO1#1+miR阴性对照组[(26.70±2.21)%,P=0.005]。sh-circTNPO1#1+miR阴性对照组裸鼠肿瘤重量[(262.50±82.09)mg]与体积[(203.30±144.20)mm^(3)]均低于对照+miR阴性对照组[分别为(458.80±158.10)mg和(593.00±228.40)mm^(3),均P<0.05]。sh-circTNPO1#1+miR-338-3p抑制剂组裸鼠肿瘤重量[(395.40±137.60)mg]与体积[(488.60±208.60)mm^(3)]均高于sh-circTNPO1#1+miR阴性对照组(均P<0.05)。结论circTNPO1通过靶向吸附miR-338-3p并下调miR-338-3p的表达促进骨肉瘤细胞的增殖与迁移,circTNPO1下调miR-338-3p可能是参与骨肉瘤进展的新机制。