赖氨酸去甲基化酶5C对肾癌转移的作用研究

目的·研究失活的蛋白赖氨酸去甲基化酶5C(lysine demethylase 5C,KDM5C)对肾透明细胞癌迁移、侵袭的作用,分析它调控的基因,探索其失活后促癌的机制。方法·使用慢病毒构建KDM5C稳定敲除的人肾透明细胞癌786-O、Caki-1细胞株,通过Transwell小室观察肾癌细胞KDM5C敲除后迁移、侵袭的变化,蛋白质印迹法检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达的变化;用786-O Control-sg、KDM5C-sg 2组细胞RNA测序数据和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)公共数据库做差异基因分析、功能通路富集分析,进一步探索KDM5C缺失后的促癌机制。根据EMT基因集筛选出测序数据中上调的EMT相关基因,并通过生存分析、单因素COX分析对基因进行初步筛选,最后通过LASSO回归分析、风险森林模型进一步筛选与KDM5C敲除后表型高度相关的基因。结果·KDM5C敲除后786-O和Caki-1细胞较对照组细胞表现出较为明显的迁移和侵袭表型(P=0.000)。TCGA数据库分析表明肾癌患者KDM5C突变会导致患者的预后情况变差(P=0.042)。RNA测序分析表明KDM5C敲除后可能通过影响黏附相关分子、上调上皮-间充质转化相关基因。通过蛋白质印迹法检测到2组细胞在敲除KDM5C后β-catenin、Vimentin、Snail蛋白表达水平均发生上调。最后将生存分析、单因素COX分析中得到的10个上调EMT基因进行LASSO回归分析、风险森林模型预测,结果表明KDM5C可能对PLAUR基因具有调控作用。结论·KDM5C在肾癌中突变可通过增强肿瘤迁移和侵袭促进肾癌的发生发展。

蛋白精氨酸甲基转移酶5在肺癌中的表达及其促进肺癌的作用机制

目的·探讨蛋白精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的作用。方法·采用免疫组织化学法检测73对肺癌及癌旁组织中PRMT5的表达,并与患者的临床特征行相关性分析。在肺癌细胞NCI-H1299中下调PRMT5后,通过CCK8法和Transwell小室观察PRMT5对细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响,并采用蛋白质印迹法检测上皮细胞-间充质转化相关蛋白(E钙黏蛋白、波形蛋白和转录因子SNAI1)的表达。利用公共数据库GEO(Gene Expression Omnibus,基因表达综合)和TCGA(The Cancer Genome Atlas,癌症基因组图谱)分别分析PRMT5在肿瘤细胞系、肺癌组织中的表达,并进一步分析组织中PRMT5表达和肺癌患者预后的关系。结果·免疫组织化学法检测结果显示,PRMT5在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P=0.000),且在肿瘤Ⅲ~Ⅳ期的表达高于Ⅰ~Ⅱ期(P=0.033)。下调PRMT5后,NCI-H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,E钙黏蛋白表达增加、波形蛋白及转录因子SNAI1表达减少。TCGA数据库的肺癌测序数据显示PRMT5在肺癌组织中表达显著高于正常肺组织;且PRMT5高表达的肺腺癌患者总生存率较低(P=0.005),PRMT5高表达的肺鳞癌患者无复发生存率较低(P=0.028)。结论·PRMT5在肺癌组织中表达较高,可促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,PRMT5高表达和肺癌的不良预后有关。

两分钟像弹簧

今天，蒋老师说：“我们今天来做三个游戏哦!”接着她又说，“第一个游戏是在两分钟内写一段文章，看你们能写多少字。”游戏开始，我拼命地写，心想：“我一定要把这篇文章写完!”可没过多久，蒋老师就喊停。我才写了四十八个字。我想：“肯定是蒋老师没有按照约定的时间，故意快一点，想让我们少写一点。”可抬头一看时间，老师并没有作假。

大战食人树

我穿着特制的“深入地下服”，深入到地下N公里深的地方探险。我最先到达的地方是一条熔岩河的岸边，炙热的岩浆正从不远处涌来。天啊，我可不想被岩浆融化掉．于是我操纵着“深入地下服”不停地喷发冰柱，