姜黄素联合全反式维甲酸诱导耐药的急性早幼粒细胞白血病细胞分化的实验研究

本研究旨在探讨姜黄素联合全反式维甲酸(ATRA)对耐药的急性早幼粒细胞白血病细胞分化的影响及其分子机制。以耐药的NB4-R1细胞为实验对象,对细胞进行计数和细胞形态学观察,应用流式细胞术(FCM)检测姜黄素单用或联合ATRA对NB4-R1细胞增殖、分化的影响;用Western blot检测AKT磷酸化在细胞分化中的变化。结果显示,全反式维甲酸对NB4-R1细胞增殖无影响,但可增强姜黄素对NB4-R1生长的抑制作用。单用姜黄素或全反式维甲酸对细胞分化无影响,姜黄素联合全反式维甲酸可明显诱导细胞CD11b表达,细胞在形态上呈明显分化特征。全反式维甲酸可在短时间内促进NB4细胞AKT第473苏氨酸磷酸化,而对NB4-R1细胞中的AKT磷酸化影响不大。姜黄素可以促进NB4-R1细胞AKT磷酸化,而联合全反式维甲酸可进一步增强AKT磷酸化。结论:PI3K/AKT通路失活可能是导致APL细胞耐药的因素之一,而姜黄素通过活化PI3K/AKT信号通路逆转APL耐药,促进NB4-R1细胞分化。

生化仪检测系统精密度的评估方法与结果分析

目的探讨生化分析仪检测系统精密度的评估方法和评估结果的意义。方法用日立7180对混和血清每天分两批测定,两批间隔至少2小时。每批标本重复测定2次。连续20天,得到一系列结果。按照EP5-A2文件的要求,采用MVS软件进行统计分析,得出批内变异系数(CVwr)、批间变异系数(CVrr)、天间变异系数(CVdd)及总变异系数(CV总)。再按照文献提出的以CLIA'88的室间质评能力(PT)为参考标准,要求批内不精密度应小于1/4PT,天间不精密度应小于1/3PT,总不精密度应小于1/2PT作为判断日立7180检测系统精密度是否符合要求。结果用混和血清来评价日立7180测定的24个项目的精密度时,TG、LDH的批内不精密度大于1/4PT,不符合临床要求;ALT的天间不精密度大于1/3PT不符合临床要求。而24个项目的总精密度均小于1/2PT符合临床要求。结论精密度是检测系统最重要的性能之一,最好按照EP5-A2文件的方法评估检测系统的精密度,它更有利于评估检测系统临床应用的意义,而检测系统批内、天间及总精密度的临床标准要求参考CLIA'88室间质评能力(PT)的部分项目的标准设置是否合理,值得大家探讨。

应用MVS软件评价不同仪器测定电解质结果的可比性分析

医疗机构临床实验室管理办法规定“相同检验项目在不同仪器或检测系统上进行检测时，要对检验结果的可比性进行比对”．以便临床医师对检验结果进行分析判断．美同CLSI也发布了比对试验的方法——EP9-A2文件．为临床实验室评价不同仪器测定结果的可比性提供了方案．同时北京中创易达公司也参照EP9-A2文件要求开发了一套数据处理软件．方便了临床实验室应用EP9-A2文件进行比对试验结果数据的分析处理。

血清唾液酸检测对诊断消化性肿瘤的临床应用

目的:探讨血清唾液酸检测对诊断消化性肿瘤的临床应用及意义。方法:对206例消化性肿瘤患者和178例消化性非肿瘤患者及50例健康体检者,应用日立7600型全自动生化分析仪使用酶反应速率法,检测其血清唾液酸的含量,并对其结果进行回顾性分析。结果:①206例消化性肿瘤及178例消化性非肿瘤患者和50例健康对照组SA检测阳性数分别为158、3和0例,组间比较P<0.01,差异有显著性。②各种消化性肿瘤患者分别与消化性非肿瘤患者和健康对照组比较,均P<0.01,差异有显著性。肝硬化患者与对照组比较,P<0.05,差异有显著性。③206例消化性肿瘤患者及178例消化性非肿瘤患者和50例健康对照组SA检测阳性结果,以肝癌最高,阳性率为78.9%(60/76),肠癌最低,阳性率为64.3%(9/14)。各种消化性肿瘤患者与非肿瘤患者及健康对照组比较,均P<0.01,差异有显著性。结论:血清SA测定对消化性肿瘤的鉴别诊断和预后监测等方面具有重要的应用价值,并能用全自动生化分析仪检测,可作为普查消化性肿瘤的重要指标之一。

血清前白蛋白和白蛋白测定在烧伤患者中的临床应用研究

目的探讨烧伤患者血清前白蛋白(PA)和白蛋白(ALB)的变化规律,为临床诊治提供实验依据。方法以2008年6月～2008年12月入住我院的61例烧伤患者作为研究对象,以40例正常健康人为对照,检测烧伤患者和正常健康人血清前白蛋白和白蛋白水平,用统计学方法进行分析。结果烧伤患者血清前白蛋白和白蛋白水平与正常对照有显著性差异,烧伤患者血清前白蛋白比白蛋白下降多而恢复快。结论烧伤患者血清前白蛋白和白蛋白降低程度与烧伤程度呈正相关,血清前白蛋白持续严重下降则预后不良,动态监测烧伤患者血清前白蛋白比白蛋白更有意义。

心肌肌钙蛋白T检测在急性心肌梗死溶栓治疗中的临床应用

目的探讨心肌肌钙蛋白T(cTnT)检测在急性心肌梗死溶栓治疗中的临床应用。方法108例急性心肌梗死患者和40例健康体检者,采用金标法检测cTnT和应用日立7600型全自动生化分析仪使用酶反应速率法,分别检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶异型(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LD)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)。并对其结果进行回顾性分析。结果①108例AMI溶栓患者检测cTnT结果为61例阳性,40例健康体检者无1例阳性,经χ2检验,χ2=38.43,P<0.01结果有非常显著性差异。②108例AMI患者AST、CK、CK-MB、LD、α-HBDH均有不同程度升高,其结果分别为175.98±99.25IU/L、1103.20±818.41IU/L、157.32±98.39IU/L、478.88±318.19IU/L、598.67±341.56IU/L。与对照组比较,P值均<0.01,结果有非常显著性差异。结论cTnT是反映心肌细胞损伤具有较高敏感性和特异性的生化指标,它有利于对AMI患者的早期及溶栓治疗后血管再通的判断,以便于对AMI患者实施及时的救治措施,并有助于疗效的观察。

肝硬化患者血清前白蛋白、腺苷脱氨酶测定及临床应用评价

目的探讨肝硬化患者血清前白蛋白、腺苷脱氨酶测定及其临床意义。方法151例肝硬化患者和50例健康体检者,应用日立7600型全自动生化分析仪检测其血清前白蛋白(PA)和腺苷脱氨酶(ADA)的活力含量,并对其结果进行回顾性分析。结果151例肝硬化患者及50例对照组血清PA和ADA含量显示,代偿期为(228.5±74.1)mg/L和(11.2±4.8)IU/L,显著高于对照组(P<0.05),失代偿期为(159.5±109.8)mg/L和(16.8±6.8)IU/L,显著高于对照组(P<0.01)。结论PA和ADA测定可分别从肝脏的蛋白质、酶及胶原代谢三个方面辅助诊断肝硬化,同时由于PA和ADA的检测具有快速、价廉的特点,可作为肝硬化患者病情监测的有效指标。

不同生化分析仪检验结查可比性验证

目的对本科室四台生化分析仪进行可比性验证。方法参照WS/T407-2012对我科四台全自动生化分析仪(OLYMPUS AU5421、日立7180、日立7600、Dimension EXL)检测19项急诊常规项目(K^+、Na^+、Cl^-、Ca^(2+)、GLU、UREA、Cr、UA、ALT、AST、CK、ALP、GGT、TP、ALB、TBIL、DBIL、AMY、CK-MB)对三台全自动生化分析仪(OLYMPUS AU5421、日立7180、日立7600)检测另10项常规项目(P^(3-)、TC、TG、HDL、LDL、LDH、apo A1、apo B、LP(a)、Mg)的检测结果进行了比对,并对比对结果进行了分析。结果 1、四台生化分析仪检测高值样本的K+、Na+、Cl-、Ca^(2+)、GLU、UREA、Cr、TBIL、DBIL和CK-MB时其检验结果可比性不达标;四台生化分析仪检测低值样本的K^+、Na^+、Cl^-、Ca^(2+)、UREA、Cr、UA、ALT、TBIL、DBIL时其可比性检验结果不达标;2、三台生化分析仪检测高值的Cl^-、Ca^(2+)、P^(3-)和CK-MB,检测低值的Na^+、Cl^-、Ca^(2+)、P^(3-)、UREA和DBIL的可比性检验结果不达标;3、用高值样本进行可比性验证达标率要高于用低值样本进行可比性验证的达标率,且高低的R值相对偏小。结论从数理角度来分析用高值样本进行可比性验证达标率要高于用低值样本进行可比性验证的达标率是由于数据大时计算出的R就会相对偏小,认为从临床意义的角度考虑选择医学决定水平处的浓度样本进行比对应该是比较合理的;WS/T407-2012由于方法简便实际临床实验室可采用本方法进行比对验证并可增加比对频次。

XIAP表达在ATRA诱导APL细胞分化中的意义

目的探讨X染色体相关凋亡抑制蛋白在全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化过程中的表达意义。方法以急性早幼粒白血病细胞NB4为细胞模型,利用细胞计数、瑞氏染色、蛋白质免疫印记等方法,观察细胞经ATRA处理不同时间后细胞分化情况以及XIAP蛋白表达情况。结果 1μmol/L的ATRA可抑制NB4细胞的生长,在用药处理72h后细胞出现明显的分化,XIAP蛋白含量明显下降。结论在ATRA诱导APL细胞分化过程中,凋亡抑制蛋白XIAP表达明显下调。

westgard标准决定图在评价生化项目检测系统性能的研究

生化分析仪检测系统测定的结果准确与否，关键取决于生化分析仪检测系统的两个主要性能即精密度和准确度，分别用不精密度和不准确度表示，目前有多种方法分别用于评价定量检测系统的精密度和准确度^[1]，但缺乏对精密度和准确度两者综合性能的评价研究，而检测系统精密度和准确度两者的综合性能既关系到其在临床上可否接受，

2型糖尿病患者血糖、锌、铜和镁水平的临床分析

目的探讨2型糖尿病(type Ⅱ Non insulin dependent diabetes mellitus,NIDDM)患者血糖、血清锌、铜、镁含量水平及临床意义。方法对58例2型糖尿病患者和40例健康体检者应用日立7600型全自动生化分析仪使用酶反应速率法对其空腹血糖(FPG),锌、铜、镁分别进行检测,分析糖尿病患者血糖、锌、铜、镁异常改变的情况,并对其结果进行回顾性分析。结果2型糖尿病患者的血糖均显著性高于健康人(P<0.01);糖尿病患者血清锌和镁均低于健康人(P<0.05),分别为(1.01±0.51)μg/ml和(0.68±0.35)mmol/ml;而血清铜则为(1.39±0.35)μg/ml高于健康人(P<0.05)。结论NIDDM患者血清锌、铜、镁与血糖浓度密切相关,血清中锌、镁浓度与血糖水平呈负相关,铜则相反,因此,改善患者血糖情况可能在一定程度上缓解体内微量元素的代谢紊乱。

100例变态反应性疾病过敏原检测分析

目的检测变态反应性疾病患者血清中过敏性特异性IgE抗体,筛选相关过敏原,为临床诊断和治疗提供依据。方法采用美国ASI公司生产的IVT过敏原体外检测试剂盒进行检测。结果100例变态反应性疾病患者,食物性过敏原阳性35例(阳性率35%),以虾、蟹,鱼,蛋白、蛋黄为主,阳性率分别为16%、10%、8%。吸入物过敏原阳性70例(阳性率70%),吸入物过敏原除白桦等阳性稍低外,其余过敏原差异不大。在荨麻疹、过敏性鼻炎、哮喘三种变态反应性疾病中,食物性过敏原阳性率分别为35.8%、14.3%、16.6%,吸入物过敏原阳性率分别为89.5%、42.8%、50%,荨麻疹患者两组过敏原阳性率均高于其他两种疾病。结论IVT法检测过敏原,操作简便、结果可靠、患者痛苦少且安全,过敏原的筛选可为临床诊断、治疗及患者饮食忌口,避免接触相关过敏原提供非常有益的帮助。

2型糖尿病患者血清VEGF水平与颈动脉内膜中层厚度的关系

目的探讨2型糖尿病患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelia growth factor;VEGF)水平与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness,IMT)的关系。方法采用双抗体夹心ELISA法检测2型糖尿病患者83例(其中IMT正常组42例、IMT升高组41例)及糖耐量正常者58例(正常对照组)血清中VEGF的含量。结果糖尿病患者IMT升高组血清VEGF水平为(698.78±158.34)ng.L-1,明显高于IMT正常组(467.56±121.31)ng.L-1(P<0.05),且二者又明显高于正常对照组(292.37±96.56)ng.L-1(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者血清VEGF水平可能成为临床上一种新的反映糖尿病大血管病变的早期敏感指标之一。

mTOR特异性siRNA重组表达载体的构建及鉴定

目的构建mTOR siRNA重组表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制巨噬细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法设计具有短发夹结构的DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,并进行序列测定。再转染入巨噬细胞RAW264.7,进行荧光摄像和阳性克隆筛选。Western blot方法检测巨噬细胞mTOR蛋白表达。结果 DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR siRNA重组表达载体。Western blot结果显示转染该重组载体的巨噬细胞mTOR蛋白表达下降约41%。结论mTOR靶向RNA干扰重组表达载体构建成功,可以进行稳定筛选,该载体对巨噬细胞mTOR蛋白表达有抑制作用。