临床血液学检验课程中融入医学人文素质教育的改革与实践

医学离不开人文关怀,医学教育应体现医学人文精神。医学检验是医学中的一个重要分支,培养的人才也必须具备一定的人文素养。作为医学检验专业的主干课程,临床血液学检验课程中有必要融入医学人文教育。为此,本课程通过实施一系列的课程改革,包括选择和培养适宜的教师教学、开展医学检验人文知识讲座、开展病例讨论及将人文知识融入日常课程教学之中等方法,着力于培养学生的人文情怀,打造符合医学检验岗位需求的合格人才。

海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌的多位点序列分型

目的研究海南省类鼻疽伯克霍尔德菌多位点序列类型(STs)多态性,了解该省与其他类鼻疽流行地区菌株间的遗传背景差异.方法选取7个管家基因位点ace、gltB、gmhD、lepA、lipA、narK、ndh进行PCR扩增、测序,与MLST数据库中的等位基因序列进行比对,确定菌株的序列型.结果18株类鼻疽伯克霍尔德菌属于12个不同的STs,其中ST50有4株,检出率占22.2%,ST58、ST232、ST1094各检出2株,发现一株新STs命名为ST1676.结论海南省类鼻疽伯克霍尔德菌具有高度遗传多样性,gmhD是7个管家基因中变异最大的等位基因,表明gmhD突变可能是该地区菌株STs多样性的原因.

格雷夫斯病患者抗甲状腺药物治疗后骨代谢指标、血糖、胰岛素抵抗变化

目的观察初诊格雷夫斯病患者抗甲状腺药物治疗后骨代谢指标、血糖、胰岛素抵抗指数的变化。方法32例初诊格雷夫斯病患者进行为期1年的纵向观察,在抗甲状腺药物治疗前及治疗后4、8和12个月分别采集空腹血样本,采用生物化学方法测定血糖、胰岛素及骨代谢指标等。以55例正常人群为对照组。结果与对照组相比,初诊格雷夫斯病患者抗甲状腺药物治疗前空腹血糖(FBG)、胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)增高;血甲状旁腺激素(PTH)水平降低,血钙、总前胶原Ⅰ型氨基末端肽(PINP)、骨钙素(OC)、碱性磷酸酶(ALP)、25羟维生素D(25(OH)D)和β异构C末端肽(β-CTX)水平升高。抗甲状腺药物治疗8个月后FBG恢复正常;治疗4个月后血胰岛素、HOMA-IR恢复正常。抗甲状腺药物治疗4个月后血钙恢复正常。抗甲状腺药物治疗后血ALP、PINP、OC和β-CTX水平显著下降,血PTH显著升高。结论未治疗的格雷夫斯病患者空腹血糖升高、胰岛素抵抗,抗甲状腺药物治疗可恢复正常。格雷夫斯病患者抗甲状腺药物治疗12个月后血清ALP、PINP、骨钙素和β-CTX水平降低,但仍未恢复。

类鼻疽伯克霍尔德菌sRNA伴侣蛋白Hfq的表达与纯化

目的构建重组原核表达质粒,对类鼻疽伯克霍尔德菌分子伴侣Hfq蛋白进行高效表达和纯化。方法 PCR扩增类鼻疽伯克霍尔德菌hfq基因并克隆至pMD19-T克隆载体中,测序验证后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切pM D19T-hfq与pET30a(+),将目的基因片段插入含His标签序列的原核表达载体PET30a(+)中,构建重组表达质粒pET30a(+)-hfq,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导目的基因表达,采用SDS-PAGE与Western blot对表达蛋白进行鉴定,通过Ni 2+螯合柱对目的蛋白进行纯化。结果 PCR扩增出正确的hfq基因片段,大小为237bp,与预期值相符。亚克隆质粒与原核表达质粒载体连接后进行双酶切鉴定,重组质粒pET30a(+)-hfq构建正确。重组质粒转化DE3后经IPTG诱导5h,从细菌裂解液中检测到Hfq融合蛋白,分子质量单位(Mr)约为9.4×103。通过Ni 2+螯合柱纯化,获得单一SDS-PAGE条带的目的蛋白。结论 hfq基因原核表达质粒构建成功,Hfq在大肠埃希菌中成功表达,得到Ni 2+柱层析获得的高纯度的sRNA伴侣蛋白Hfq,为进一步筛选与该蛋白有相互作用的sRNA及sRNA功能研究奠定了基础。

血清骨桥蛋白和甲胎蛋白及甲胎蛋白异质体对原发性肝癌的诊断价值

目的:研究血清骨桥蛋白(OPN)、甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)对原发性肝癌的诊断价值。方法:共纳入120例研究对象,分为4个研究小组,分别是肝癌组、肝硬化组、慢性肝炎组和健康对照组,每组各30例。采外周血分别应用化学发光法、微量离心柱法、酶联免疫吸附法检查所有研究对象的血清AFP和AFP-L3以及OPN的浓度,计算AFP-L3在总AFP中的比例(AFP-L3%)。对比各组间血清OPN、AFP、AFP-L3%的表达差异情况,评价AFP、AFP-L3%、OPN单独以及联合应用于原发性肝癌诊断中的价值。结果:(1)血清AFP、AFP-L3%、OPN 3种指标的浓度在肝癌组中最高,其次是肝硬化组、慢性肝炎组,健康对照组最低,差异有统计学意义(均P<0.05);(2)血清AFP、AFP-L3%、OPN对诊断原发性肝癌的灵敏度分别为70.0%、53.3%和96.7%,特异度分别为97.8%、91.1%和60.0%;受试者工作特征曲线下面积分别为0.891(95%CI 0.810~0.971)、0.777(95%CI 0.679~0.841)、0.874(95%CI 0.807~0.941)。将3项指标联合检测用于原发性肝癌的诊断时,其灵敏度为80.0%、特异度为88.9%,受试者工作特征曲线下面积为0.901(95%CI 0.844~0.958)。结论:(1)血清AFP、AFP-L3%、OPN均可以用于原发性肝癌的辅助诊断,3项指标联合检测可以提高原发性肝癌的早期发现率;(2)OPN有可能成为原发性肝癌的早期预警指标,检测高风险患者的血清OPN水平,可能会提高早期肝癌的检出率。

类鼻疽伯克霍尔德菌Frataxin样蛋白的表达与纯化

目的构建重组原核表达质粒,表达类鼻疽伯克霍尔德菌Frataxin样蛋白并进行纯化。方法PCR扩增类鼻疽伯克霍尔德菌Frataxin基因,胶回收纯化后测序验证。用HindⅢ和NdeⅠ双酶切目的片段与pET30a(+),将目的基因片段插入含His标签序列的原核表达载体PET30a(+)中,构建重组表达质粒pET30a(+)-Frataxin,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白的表达,并进行SDS-PAGE和Western blot检测分析,通过His-HP柱及分子筛进行纯化。结果PCR扩增的Frataxin基因片段为327 bp,与预期大小相符。目的片段与原核表达质粒载体连接后进行PCR鉴定与测序验证,重组质粒pET30a(+)-Frataxin构建正确。重组质粒转化DE3后经IPTG诱导5 h,从细菌裂解液中检测到Frataxin融合蛋白,分子质量单位约为12 ku。通过His-HP柱与分子筛纯化,获得单一SDS-PAGE条带的目的蛋白。结论成功表达并纯化了Frataxin样蛋白,为研究Frataxin样蛋白与铁的相互作用关系奠定了基础。