人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响

目的:探究人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响。方法:Dil标记神经干细胞微囊泡,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察THP-1巨噬细胞对微囊泡的内化;实时荧光定量PCR筛选微囊泡最适浓度;100 ng/mL脂多糖刺激THP-1细胞6 h后,微囊泡处理12 h,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞炎性因子IL-1β,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及IL-6的mRNA表达水平;微囊泡处理24 h,蛋白免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶1(Arginase-1,Arg-1)蛋白表达水平;流式细胞术检测THP-1巨噬细胞M1极化表面标志CD86表达。结果:THP-1巨噬细胞在12 h和24 h均能明显内化神经干细胞微囊泡;0.12μg/mL微囊泡具有最适调控作用;与未处理细胞相比,脂多糖处理后明显增加THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和iNOS蛋白,Arg-1蛋白表达差异无统计学意义(P<0.05);经神经干细胞微囊泡处理后THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和iNOS蛋白表达明显降低(P<0.05);与未处理细胞相比,脂多糖和微囊泡处理后THP-1巨噬细胞CD86表达差异无统计学意义。结论:人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡能够减少THP-1细胞炎性细胞因子和iNOS表达,抑制巨噬细胞M1极化。

人神经干细胞微囊泡对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:探究人神经干细胞微囊泡(human neural stem cell microvesicles,hNSC-MVs)对谷氨酸诱导PC12细胞损伤的作用及可能机制。方法:采用谷氨酸处理大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞,建立兴奋性损伤模型;实验分为3组:对照组,PC12细胞未经任何处理;谷氨酸组,谷氨酸处理PC12细胞24 h;hNSC-MVs+谷氨酸组,200 mg/L hNSC-MVs预处理PC12细胞24 h,再加入谷氨酸处理24 h。MTT法检测各组PC12细胞存活率;免疫印迹实验检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达。结果:PC12细胞能内化hNSC-MVs。谷氨酸对PC12细胞具有毒性作用,其半数抑制浓度为25 mmol/L。与谷氨酸组相比,hNSC-MVs+谷氨酸组PC12细胞存活率明显增高(P<0.01)。与对照组相比,谷氨酸组Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,而与谷氨酸组相比,hNSC-MVs+谷氨酸组Bax蛋白表达明显下调,Bcl-2蛋白表达明显上调(P均<0.01)。结论:hNSC-MVs可能通过抑制谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,从而发挥保护作用。

17β-雌二醇促进大鼠坐骨神经横断性损伤修复

目的:研究17β-雌二醇对大鼠RSC96雪旺细胞活性的影响及对SD大鼠坐骨神经横断性损伤的修复作用。方法:配制不同浓度的17β-雌二醇溶液,用CCK-8试剂盒检测雪旺细胞的增殖能力,筛选17β-雌二醇作用的最适浓度;将大鼠雪旺细胞分为对照组(常规培养)和17β-雌二醇组(100 nmol/L),用蛋白印迹法检测细胞雌激素受体的表达;用Transwell实验和划痕实验检测细胞的迁移能力;用qRT-PCR检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)、胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derived neurotrophic factor,GDNF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等mRNA的表达;雄性SD大鼠经腹腔注射一定浓度的17β-雌二醇溶液,观察其对坐骨神经横断性损伤的修复作用。结果:100 nmol/L 17β-雌二醇溶液细胞增殖能力明显强于其他浓度(P <0. 05);与对照组相比,100 nmol/L 17β-雌二醇溶液细胞增殖能力明显增强,雌激素受体表达明显增加,细胞迁移能力显著增强,BDNF、CNTF、GDNF、NGF等mRNA表达明显增加(P均<0. 05)。同时,17β-雌二醇促进SD大鼠坐骨神经损伤后运动和感觉功能的恢复,延缓腓肠肌的萎缩。结论:17β-雌二醇可能通过与雪旺细胞上雌激素受体结合来发挥一系列的生物学效应,促进外周神经损伤后运动和感觉功能的恢复。

人神经干细胞源施万样细胞微囊泡促进大鼠神经元轴突生长

目的:探究人神经干细胞源施万样细胞微囊泡对大鼠神经元轴突生长的影响。方法:选取出生4~5 d的SD大鼠乳鼠,摘取背根神经节(dorsal root ganglion,DRG),获得DRG神经元;用施万样细胞微囊泡刺激DRG神经元,行βⅢ-微管蛋白免疫荧光染色,观察轴突生长情况;分别用0、5、20、40 mg/L施万细胞微囊泡刺激神经元样N2a细胞19 h,用荧光定量PCR检测N2a细胞生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43) mRNA表达;分别用0、20、40 mg/L施万细胞微囊泡刺激N2a细胞48 h,行过碘酸-雪夫染色,检测细胞内糖原生成情况。结果:施万样细胞微囊泡组的DRG神经元轴突长度明显长于PBS组(P <0. 05)。施万样细胞微囊泡可被N2a细胞吞噬。与0 mg/L组相比,5 mg/L组GAP43 mRNA表达差异无统计学意义(P> 0. 05);20、40 mg/L组GAP43 mRNA表达量、突起增长率及碘酸-雪夫染色细胞阳性率均明显高于0 mg/L组(P均<0. 05)。结论:施万细胞微囊泡在体外能够促进大鼠神经元轴突生长。

培养问题意识 发展数学素养

小学数学是促进小学生智力发展的基础学科。但是就目前而言，我国小学数学教学观念仍较为传统，学生的“问题意识”得不到培养，因此，教师应当转变传统的教学观念，巧妙地设置问题情境，引导学生提出值得探讨的问题，培养学生的问题意识，发展学生的数学素养。

正己烷对小鼠睾丸标志酶活力及其组织形态的影响

将80只雄性小鼠随机分为正己烷高、中、低剂量(2000、1000、500 mg/kg)染毒组和阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg)及空白对照组(豆油),正己烷灌胃染毒持续20 d。染毒组随染毒剂量的增加,乳酸脱氢酶(LDH)活性升高,酸性磷酸酶(ACP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性降低;染毒组、阳性对照组较空白对照组小鼠睾丸组织中生精细胞数量减少,间隙减小,间质细胞增多,出现明显的病理改变。提示正己烷可以对睾丸组织结构和各级生精细胞的生长产生毒性作用,对雄性生殖细胞具有潜在的诱变危害。

创业板投资收益风险分析

随着我国市场经济的不断发展,我国金融市场也朝着多样化、复杂化的趋势发展。在我国当前金融股市场发展的当下,创业板投资自身一定存在着与其他投资的不同之处,作为二板市场,创业板投资最为显著的特点便是'高风险、高收益'。本文将针对创业板内涵进行详细分析,其目的是研究出创业板投资高收益与风险。

浅谈如何让学生快乐学习数学

为适应新时代对人才提出的新要求，基础教育新一轮的课程改革已经全面启动。小学数学教师如何适应改革的形式，如何充分认识自己在数学教育改革中的作用，以及如何通过这次数学改革切实提高数学教育质量是一个值得深思的问题。转变自己的教学观念，确立全新的教育观在改革中显得尤为重要。全新的教育观包括学生观、教学观、教师作用观三个方面。本人就教师如何转变教学观念，让学生陕乐学习数学谈几点自己的体会。