肾综合征出血热患者血浆细胞因子的动态变化

肾综合征出血热(HFRS)是由汉坦病毒(hantavirus)引起的以啮齿类动物为主要传染病的自然疫源性疾病,我国是HFRS的高发地区之一,其长期危害我国人民的生命健康。研究表明过度活化的免疫应答和炎症反应引起的“细胞因子风暴”是导致HFRS致病的机制之一。本文拟对HFRS患者中各种细胞因子的动态变化进行综述。

酵母双杂交系统的原理及应用

0引言 蛋白质和蛋白质的相互作用是很多生命现象的基础.随着分子生物学技术的发展,特别是人类基因组计划的完成,使人类对基因的结构和功能的认识不断加深,但基因编码的蛋白质的功能研究尚是一个难题.酵母双杂交(yeast two hybrid)技术是利用酵母遗传学方法分析蛋白质之间的相互作用,该方法建立以来,经过不断的完善和发展,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白.

HBV宫内传播的研究进展

HBV宫内感染是乙肝免疫失败的主要原因,HBV宫内传播的途径主要有胎盘途径、PBMCS途径及经生殖细胞的传播.其中胎盘的渗漏或胎盘细胞的感染是主要的途径.母亲血清HBV DNA含量、HBV基因型、遗传因素是影响宫内感染的主要因素.近年来的临床研究显示孕期使用乙肝高效价免疫球蛋白或拉米夫定可以阻断大部分宫内感染,但目前尚缺乏大样本的随机对照研究,探索宫内感染的机制和可行的阻断措施是我国控制乙型肝炎流行的关键所在.

外周血单个核细胞HBV的复制状态与干扰素-γ表达和分泌的关系

目的:研究HBV侵犯外周血单个核细胞(PBMC)及对IFN-γ表达和分泌的影响.方法:慢性HBV感染者60例,巢式PCR检测PBMC中HBV共价闭合环状DNA(cccD-NA);ELISA法检测血清IFN-γ水平;实时定量RT-PCR方法检测PBMC中IFN-γ mRNA的表达水平.结果:48.3%(29/60)的患者PBMC中检测到cccDNA;血清IFN-γ水平低于对照组(P<0.05);PBMC中IFN-γ mRNA表达水平低于对照组(P<0.01);PBMC中cccDNA阳性组IFN-γ表达和分泌水平低于cccDNA阴性组(P<0.01).结论:HBV慢性感染者PB-MC中IFN-γ表达和分泌水平降低.

人力资源管理原理在护理管理中的应用

对人力资源管理的基本原理(包括8个方面:同素异构原理、能位匹配原理、互补优化原理、动态适应原理、激励强化原理、公平竞争原理、信息激励原理、文化激励原理)的内涵逐项进行描述,针对每一条原理的内涵,紧密结合当前护理工作实际,探讨人力资源管理的基本原理在护理管理中的应用对策,提高现有护理人力资源利用率。

HCBP1的细胞定位及与HCV核心蛋白在体内的相互作用

目的探讨HCV核心蛋白与(HCBP1)HCV核心蛋白的相互作用蛋白在真核细胞内的相互作用。构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与HCBP1融合蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位。方法PCR分别扩增含HCV核心及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEMT载体,经测序正确后,分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平。将HCBP1的cDNA片段克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,转染COS-7细胞,以Western blot和荧光显微镜分析融合蛋白的表达及其细胞定位。结果CAT-ELISA检测显示pM-核心蛋白与pVP16-HCBP1实验孔吸光度值高于其他阴性对照,但低于阳性对照组。成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,Western blot证实融合蛋白在转染细胞中的表达,荧光显微镜示HCBP1-EGFP融合蛋白分布于细胞浆,而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变。结论成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达。哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1确有一定的相互作用。

酵母双杂交技术筛选HCV E1蛋白结合的肝细胞蛋白基因

目的:用酵母双杂交技术筛选肝细胞中与HCV E1蛋白结合蛋白的编码基因. 方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增HCV E1基因,连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提出质粒,转化入大肠杆菌(DH5α),提出质粒并测序, 进行生物信息学分析. 结果:获得了19个与E1蛋白特异陛结合的阳性克隆,其中16个克隆为已知蛋白基因和3个克隆为未知功能蛋白基因. 结论:成功克隆出与丙型肝炎病毒E1蛋白结合的肝细胞蛋白,为进一步研究HCV E1在HCV致病中的作用提供了新线索.

护患沟通的重要性、认知现状及促进护患沟通的对策

阐述了护患沟通在临床护理工作中的重要性,以及护理人员对护患沟通的认知现状,并根据认知现状阐述了护患沟通的对策。

试论生命维持治疗中的伦理学问题

生命维持治疗是医学界和哲学界争议颇多的话题。治疗疾病本是医师的职责,然而对诊断为恶性肿瘤的晚期、脑死亡、器官衰竭终末期,众多危重疾的患者进行生命维持治疗,医师是否也同样采取需要积极的治疗措施?如果放弃治疗,是否有违生命价值?如果坚持治疗,实施维持治疗所占用的医疗卫生资源是否构成对其他患者的功利损害?初步探讨终末期疾病患者维持治疗中存在的困惑。

龙门吊架梁技术在跨铁路桥梁施工中的运用

利用HD200贝雷梁和DF150—Ⅲ型架桥机横梁组拼的龙门吊,安全、方便、快捷地实现了跨京哈双线电气化铁路立交桥钢箱梁吊装成功。本文简要介绍了这种龙门吊的走行梁、横梁、天车的构造和技术条件,并阐述了架梁施工要点。

现代感染病学科转型发展下的教学挑战与应对

随着人类疾病谱发生的变化,现代感染病呈现出新的特点,感染病学科不仅承担传染病的防治,更要在医院内抗感染指导中起重要作用,传统的教学内容与方式急需改革。我们从新形势下的需求出发,对教学内容及教学形式进行探索,整和优化了实习教学内容,丰富了教学手段,为培养后备人才采取了多项改革措施。

完全胃肠外营养治疗的护理

目的：探索完全胃肠外营养治疗的护理。方法：通过复习文献，综述国内外部份护理工作者对完全胃肠外营养治疗的护理经验。结果：完全胃肠外营养治疗不当可给患者带来不必要的损害，甚至危及患者生命，产生原因主要来自操作技术及护理不当。结论：为使 TPN支持治疗顺利进行，减少或避免并发症的发生，要求熟练掌握配制技术，做好导管护理，在输液过程中观察病人的反应，监测有关指标，掌握滴注速度等。

黄河路高架桥顶推施工分析及现场监测研究

沧州市黄河路高架桥为沧州市黄河路改造提升工程中的控制性工程,主桥采用顶推施工法。本文采用有限元方法建立箱梁-导梁-桥墩三维有限元实体模型,合理选取顶推过程中最不利工况以及受力复杂截面,分析计算了梁体以及桥墩关键断面的应力、应变变化规律。为使桥梁工程在施工全过程安全可控,又进行了现场实时监控。结果表明,有限元分析方法与现场监测结果具有良好的对应性;有限元分析方法能有效预测最不利工况及截面,从而精确指导现场的测点布置与安全施工。从测试的数据来看,梁体及桥墩在整个施工过程中处于安全可控状态。

肝炎患者TTV的检测及意义

目的 了解肝炎患者输血传播病毒 (TTV)感染情况 ,探讨其可能的致病作用。方法 采用套式PCR方法检测 2 5例肝炎患者TTVDNA ,对其中 3例进行测序分析。结果 2 5例各型肝炎中 ,1 2例TTVDNA阳性 ,而 1 8例非甲～庚型肝炎中 8例阳性 ,血清ALT水平均有不同程度升高 ,序列分析与日本株有很高同源性。结论 证实西安地区也存在TTV感染 ,TT病毒可能有一定肝损伤作用 ,TT病毒还可与HBV、HCV重叠感染 ,但似不加重病情。

HBV感染胎盘滋养细胞的体外研究

目的:对早孕绒毛的滋养细胞进行原代培养,利用HBV感染血清对滋养细胞进行体外感染,探讨细胞在体外培养条件下对HBV的感染率及HBV在细胞中的复制状态.方法:利用胰蛋白酶和胶原酶联合消化培养法原代培养早孕胎盘中的滋养细胞,并进行免疫组化鉴定,获得纯度较高的滋养细胞后进行体外的HBV感染,通过细胞免疫化学染色、ELISA及PCR法分别检测细胞上清中的HBsAg,细胞中的HBVDNA及cccDNA.结果:原代培养的滋养细胞,细胞生长良好,特异性角蛋白-7阳性,纯度高.原代滋养细胞在与HBV阳性血清共同孵育后均未出现明显的细胞病变,感染后24h和48h在滋养层细胞细胞浆中可见HBsAg的阳性表达,被感染细胞呈散在分布.感染后48h起可检测到弱阳性的HBsAg及HBVDNA,感染后细胞内未检测出cccDNA.结论:利用联合酶消化法建立了胎盘中滋养细胞的体外培养系统.HBV能够在体外感染原代培养的滋养细胞,对被感染细胞的生长无明显影响.HBV可能不在滋养细胞中复制.

胎盘Hofbauer细胞的体外培养和鉴定

目的 通过对早孕胎盘绒毛膜Hofbauer细胞的分离,纯化和培养,寻找一种稳定、简便的,可获得较高纯度Hofbauer细胞的培养方法,以满足后续实验要求.方法 通过胰酶/胶原酶联合消化法对妊娠6～10周绒毛组织进行消化,获得单细胞悬液,根据不同细胞贴壁时间的差异,对Hofbauer细胞进行纯化,并通过免疫组织化学法对Hofbauer细胞进行鉴定.结果 获得了较高纯度的胎盘Hofbauer细胞,免疫组化法鉴定CD68阳性,细胞生长状态良好.结论 利用胰酶/胶原酶联合消化法及差异贴壁法可以获得满意的人胎盘Hofbauer细胞.

公路钢箱梁顶推施工现场测试分析

文章结合某公路钢箱梁桥上跨铁路线工程,选取最不利受力截面开展了施工过程监测。结果表明,该桥在顶推施工过程中,梁体及桥墩均处于安全可靠的状态;对比钢箱梁在顶推过程中的应力值可以看出,最不利位置为前导梁与钢箱梁的连接处,最不利工况为前导梁完全悬臂状态,最大值达到171MPa。因此建议,如果采用钢箱梁顶推施工,应加强钢箱梁与前导梁的焊接质量检测,重点关注前导梁悬臂后的施工监测,以确保施工安全。