日本血吸虫尾蚴cDNA文库的免疫学筛选及EST序列的分析

目的为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)基因的部分或全长cDNA序列,同时验证用针对某一蛋白的抗体筛选表达文库是否可以得到相应蛋白对应的基因序列。方法采用兔抗鼠TGF-β1血清,对Sj尾蚴cDNA表达文库进行免疫学筛选,对阳性克隆进行PCR扩增后,将大于500bp的克隆进行复筛,对复筛阳性的克隆进行测序和生物信息学鉴定。结果对大约106个噬菌斑进行了初筛,共获得7个阳性克隆;经过PCR扩增后,其中有4个克隆大于500bp,复筛获得3个持续阳性克隆;对测序后的阳性克隆进行生物信息学鉴定,得到的三个克隆均与日本血吸虫辅酶Q10氧化还原酶(SjCHGC)基因具有高的同源性(Blastn分值都大于200)。结论SjCHGC蛋白与兔抗鼠TGF-β1抗体的反应为交叉反应,用抗某一蛋白的抗体筛选表达文库得到相应蛋白的基因序列的方法不一定可行。

鲍曼不动杆菌分布特征及耐药趋势的临床研究

目的了解鲍曼不动杆菌的临床分布及其对常用抗生素的耐药状况,为临床使用抗生素治疗提供依据。方法采用回顾性方法,统计分析273株鲍曼不动杆菌的标本来源、感染科室分布及耐药状况。结果273株鲍曼不动杆菌中,252株来自痰及支气管吸出物(占92.3%),其次为伤口分泌物12株(占4.4%)。鲍曼不动杆菌的感染科室ICU病房检出率最高,占40.7%,其次为呼吸内科,占16.1%。273株鲍曼不动杆菌中,48株鲍曼不动杆菌呈多重耐药菌株,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(10.0%),氨苄青霉素(97.0%)耐药率最高。慢性肺部疾病和脑血管疾患是鲍曼不动杆菌感染病例的主要基础疾病。结论鲍曼不动杆菌临床分离株多来自于痰及支气管吸出物标本,感染率最高为ICU病房,并对多种抗菌药物的耐药率较高,临床应加强对鲍曼不动杆菌耐药性的监控并防治耐药菌株的传播流行。

医院感染学案例式教学法运用体会

探讨案例式教学法应用于医院感染学的教学方法,提高教学效果。论述案例式教学法的优点、运用原则、具体应用,加强医学生的基础知识及临床思维的培养,为今后的临床实践打好基础。

老年患者医院感染特点的临床分析

目的了解老年住院患者医院感染发病情况,以便有效预防和控制老年患者医院感染。方法对我院2010年1月～12月老年住院患者中所发生的医院感染病例资料进行回顾性调查分析。结果老年患者发生医院感染573例次,发生率4.30%。老年患者感染部位以呼吸系统为主,占64.23%,其次为泌尿系统,占14.49%。共分离出病原菌233株,病原菌培养阳性率为67.93%。医院感染以革兰阴性菌为主,占53.22%;革兰阳性菌占29.18%;真菌占16.31%。最常见的病原菌依次是金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。最常见的危险因素是泌尿道插管、抗菌药物和糖尿病。结论加强对老年患者医院感染的控制,针对相关的危险因素积极采取预防措施,可预防与控制老年患者医院感染的发生与流行。

兔抗鼠TGF-β1抗体对日本血吸虫尾蚴cDNA文库的免疫学筛选

目的为获得日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)基因的部分或全长cD-NA序列,同时验证用针对某一蛋白的抗体筛选表达文库是否可以得到相应蛋白对应的基因序列。方法采用兔抗鼠TGF-β1血清,对Sj尾蚴cDNA表达文库进行免疫学筛选,对阳性克隆进行PCR扩增后,将大于500bp的克隆进行复筛,对复筛阳性的克隆进行测序和生物信息学鉴定。结果对大约106个噬菌斑进行了初筛,共获得7个阳性克隆;经过PCR扩增后,其中有4个克隆大于500bp,复筛获得3个持续阳性克隆;对测序后的阳性克隆进行生物信息学鉴定,得到的3个克隆均与日本血吸虫辅酶Q10氧化还原酶(SjCHGC)基因具有高的同源性(Blastn分值都大于200)。结论SjCHGC蛋白与兔抗鼠TGF-β1抗体的反应为交叉反应,用抗某一蛋白的抗体筛选表达文库得到相应蛋白的基因序列的方法不一定可行。

广州地区气温、相对湿度与医院感染的关系研究

目的了解广州地区特殊气温、相对湿度与医院感染的关系。方法调查我院2009年全年30892例住院患者医院感染情况,及同期广州气温、相对湿度进行统计和分析。结果以气温为控制因素,相对湿度越大,中心ICU(r=0.608,P=0.047)、老年科(r=0.745,P=0.009)医院感染率越高。以相对湿度为控制因素,气温越高,中心ICU(r=0.725,P=0.012)、老年科(r=0.857,P=0.001)医院感染率越高。2009年每个季度之间医院感染部位(上呼吸道感染、下呼吸道感染、泌尿系统感染、其它感染)分布差异无统计学意义(F=12.557,P=0.184)。2009年不同科室高温月份的病原菌种类与低温月份差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年科、中心ICU的医院感染率与气温、相对湿度具有相关关系,有必要加强病区气温、湿度的控制以降低医院感染率,提高医疗质量。

节能材料在建筑节能中的应用

本文着重介绍了几种节能绝热材料的组成、性能、应用,分析了几种节能玻璃的热工特性,提出建筑节能设计中玻璃材料应用的基本原则以及节能设计措施。

居住小区景观设计的探讨

随着房地产的高速发展,居住环境设计越来越受到重视,本文讲述景观设计在居住区开发中的重要性,探讨景观设计中造景的方法及小区绿化氛围的营造。

广东遂溪移动通讯楼方案设计探索

通过广东遂溪移动通讯楼中标方案的设计实例,探索现代通讯综合办公楼的功能布局、立面形象塑造及建筑与城市空间的建构。

农科绿帆 踏浪向前——广东省农业科贸园规划及农产品科技交易广场建筑设计

该文详细分析了广东省农业科贸园规划及农产品科技交易广场的平面布局和立面塑造,展现了农产品交易广场崭新的设计思路和农业绿化生态的主题。

重症肝炎口腔真菌感染患者的细胞免疫状态及药敏试验

目的 :分析重症肝炎口腔真菌感染患者机体细胞免疫状态及药敏特点。方法 :对 2 1例重症肝炎口腔真菌感染患者及 18例排除真菌感染的重症肝炎患者T淋巴细胞亚群CD3 、CD3 +CD4、CD8、CD4/CD8比例检测 ,对患者口腔假膜、咽拭子、进行真菌培养及镜下观察、生化反应并做药敏试验。结果 :(1) 2 1例重症肝炎患者真菌培养以白色念珠菌为主 ,约占 6 1.9%。(2 )细胞免疫检测实验组CD3 、CD3 +CD4、CD4/CD8明显低于对照组 ,P <0 .0 5 ,差异有显著性。 (3)药敏特点 :菌株对制霉菌素耐药最多 ,达 10株。对两性霉素B敏感菌株最多达 12株。对氟康唑 10株 ,对伊曲康唑 8株。结论 :重症肝炎患者口腔真菌感染主要以白色念珠菌为主 ,实验组细胞免疫功能明显低于对照组 ,真菌感染往往是机体免疫受损的早期表征。药敏实验对抗真菌用药具有指导作用 ,重症肝炎口腔真菌感染治疗以氟康唑、伊曲康唑为首选。

注射用血栓通治疗心脑血管疾病的疗效及安全性

目的分析和探讨注射用血栓通治疗心脑血管疾病的临床效果及安全性。方法选取我院2014年1月-2015年1月收治的100例心脑血管疾病患者,通过随机数字表法分为对照组（n=50）和观察组（n=50）,对照组患者给予血栓通胶囊口服治疗,观察组患者接受注射用血栓通治疗,对两组患者临床治疗效果、不良反应发生情况进行分析。结果观察组患者治疗有效率明显高于对照组,不良反应发生率较对照组更高（P〈0.05）。结论在心脑血管疾病临床治疗中,注射用血栓通治疗效果确切,能明显改善临床症状,但治疗中易出现轻微不良反应,需加强不良反应监测与处理,进一步提高治疗安全性,可进行临床推广应用。

肝组织FasL表达与病程演变关系的研究

目的通过研究凋亡相关分子FasL在肝组织的表达情况,探讨慢性乙型肝炎的发病机制。方法以免疫组化方法检测68例慢性乙型肝炎的活检组织单核细胞、肝细胞以及肝窦细胞FasL表达情况。结果FasL在浸润的单核细胞以及病变肝细胞的胞浆内高表达,其表达程度和肝组织炎症坏死程度正相关。结论通过FasL-Fas机制介导乙肝病毒感染的肝细胞凋亡是慢性乙型肝炎发病及炎症活动的重要机制之一,FasL阳性肝细胞可能发挥细胞毒效应,发生自杀效应。

血清乙肝病毒定量与肝损伤及干扰素疗效的关系

目的 :探讨血清乙肝病毒定量与肝脏损伤及干扰素治疗效果的关系。方法 :对 3 4例乙肝e抗原 (HBeAg)及乙肝表面抗原 (HBsAg)阳性的乙肝患者进行干扰素治疗 ,对患者血清进行乙肝病毒定量测定及白蛋白 (ALB)、白蛋白 /球蛋白比值 (A/G)、谷 -丙转氨酶 (ALT)、谷 -丙转氨酶 (AST)、总胆红素 (TBIL)、直接胆红素 (DBIL)测定 ,将血清病毒含量≥ 10 7、10 6 .9～10 5.1、≤ 10 5 分别定为高、中、低含量组。并于治疗前行肝脏组织病理检查。结果 :3 4例患者血清HBV -DNA含量范围在 10 4～ 10 9拷贝·mL- 1,其中 13例高病毒含量患者 ,ALT值 ( 156 .0± 2 1.3 )IU·L- 1,AST值 ( 14 5.0± 11.0 )IU·L- 1,S值为 ( 2 .0 7±0 .2 1) ,G值为 ( 2 .1± 0 .7) ;14例中病毒含量患者 ,ALT值 ( 2 85.0± 18.0 )IU·L- 1,AST值 ( 12 5.0± 55.8)IU·L- 1,S值为 ( 2 .0±0 .4) ,G值为 ( 2 .4± 0 .4) ;7例低病毒含量患者ALT值 ( 167.0± 2 1.3 )IU·L- 1,AST值 ( 12 8.0± 2 7.7)IU·L- 1,S值为 ( 3 .0 1±0 .11) ,G值为 ( 3 .0 6± 0 .0 9)。 3组数值之间无明显相关性 (P >0 .0 5) ,予干扰素治疗 2 4周后 ,高、中、低病毒含量组患者有 1例( 7.69% ) ,3例 ( 2 1.43 % ) ,3例 ( 4 7.86 % )血清HBVDNA阴转 ,3者之间差异有显著?

肝硬化并发糖尿病78例临床研究

目的分析肝硬化患者并发糖尿病的临床特征,探讨肝源性糖尿病的机制及治疗。方法对78例肝硬化并发糖尿病患者与同期住院62例肝硬化无糖尿病患者、60例单纯2型糖尿病(T2DM)的临床及实验室表现、超声检查等方面进行对照研究。结果肝硬化并发糖尿病较其它两组胰岛素抵抗指数明显升高(P<0.05)、胰岛素敏感指数显著性下降(P<0.05)。临床表现以消化道系统症状为主要表现,很少出现典型的“三多一少”症状,肝功能下降,并发症发生率高,肝硬化并发糖尿病患者胰腺均较其它两组增大。结论肝硬化并发糖尿病存在严重的胰岛素抵抗,诊断要从临床表现、实验室检查、超声检查考虑,积极治疗原发肝病及严格控制血糖是主要治疗措施。

2011-2014年医院感染现患率调查与变化趋势分析

目的了解医院感染的流行病学特征和变化趋势,为预防与控制医院感染提供科学数据。方法分别于2011年10月27日、2012年6月6日、2013年5月22日、2014年9月25日0∶00-24∶00对全院住院患者进行医院感染现患率调查,所有数据采用SPSS 14.0软件进行统计分析。结果 4年共调查住院患者5 282例,发生医院感染226例、315例次,医院感染现患率4.28%、例次感染率5.96%;4年感染科室均以中心ICU为主,分别占34.52%、34.25%、33.72%、16.67%,呈下降趋势;感染部位均以呼吸系统为主,分别占55.95%、68.49%、58.14%、61.11%;医院感染病原体前3位为鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌,医院感染多药耐药鲍氏不动杆菌从2011年的50.00%下降至2014年的13.33%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌从2011年的0上升至2014年33.33%。结论医院感染现患率调查结果的变化趋势客观反映了医院感染的现状,为制定医院感染预防控制措施提供可靠依据。

Ⅰ、Ⅱ类整合子在变形菌属中的分布及耐药性研究

目的了解Ⅰ、Ⅱ类整合子在变形菌属中的分布及其耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据。方法 125株变形菌属采用聚合酶链式反应扩增Ⅰ、Ⅱ类整合酶基因,微量稀释法测定细菌对抗菌药物的药敏率。结果 125株变形菌属中检出携带Ⅰ类整合子46株占38.60%,检出携带Ⅱ类整合子32株占25.60%,同时携带Ⅰ、Ⅱ类整合子17株,阳性率为13.60%;携带Ⅰ类或Ⅱ类整合子或同时两种整合子的菌株对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、氨苄西林、环丙沙星、哌拉西林、头孢哌酮、头孢吡肟耐药率高于整合子阴性菌株,差异有统计学意义(P<0.05);携带有Ⅰ、Ⅱ类整合子的变形菌属对庆大霉素、环丙沙星、氨苄西林、哌拉西林、头孢哌酮的耐药率均>60.00%;125株变形菌属对哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁耐药率均<10.00%。结论临床分离的变形菌属中携带Ⅰ、Ⅱ类整合子的菌株比例较高,Ⅰ、Ⅱ类整合子与变形菌属的多药耐药具有相关性,临床上需合理应用抗菌药物,避免新耐药菌株的产生。

黄连浸出液对耐药奇异变形菌整合子转录水平的影响研究

目的了解黄连对变形菌属整合子转录水平的影响,探讨黄连对细菌耐药基因的作用机制,为临床治疗提供参考依据。方法选取2013年6月试验鉴定携带有Ⅰ、Ⅱ类整合子耐头孢哌酮奇异变形菌1株,利用RT-PCR方法,分析变形菌属Ⅰ、Ⅱ类整合酶基因(intI1和intI2)转录水平检测的合适条件,实时荧光定量PCR技术检测黄连浸出液处理耐药奇异变形菌对其基因转录水平的影响。结果奇异变形菌总RNA提取完整无降解;Ⅰ类整合子的第1对引物、Ⅱ类整合子的第2对引物在不同退火温度下扩增时均出现明显的非特异性条带;随着黄连浓度的升高,奇异变形菌intI1和intI2相对表达量下降,当黄连浓度在50mg/ml以上,可显著抑制奇异变形菌intI1、intI2的转录(P<0.05)。结论初步建立了实时荧光定量PCR技术检测变形菌属intI1、intI2基因转录水平的方法,发现黄连浸出液可抑制变形菌属整合子转录水平,推测与黄连抗耐药机制有关。

日本血吸虫组织蛋白酶L家族1个新基因的克隆与序列分析

目的克隆与分析日本血吸虫组织蛋白酶L样(SjCLs)基因全长cDNA序列,为进一步研究其功能奠定基础。方法提取日本血吸虫成虫总RNA,经RT-PCR扩增获得cDNA序列;将目的片段连接至pMD18-T Simple载体上,连接产物转化大肠埃希菌,通过酶切和测序鉴定重组质粒;利用生物信息学软件分析序列的开放阅读框、蛋白序列的同源率和功能区。结果以成虫总RNA为模板进行RT-PCR,得到一段长为996 bp的cDNA片段,该片段含有完整读码框,该阅读框编码的蛋白含有331个氨基酸残基,分子量为38.3 kDa,命名为SjCLs;序列比对分析发现该蛋白氨基酸序列与SjCL2同源率最高,达到89.1%;进化树分析发现SjCLs与SjCL2亲缘关系也最近;SjCLs具有类似于SjCL2的N端信号肽,可能经加工后分泌到细胞外;两者所预测的功能基序及三维构象也基本相同。结论 SjCLs具有组织蛋白酶L的基本特征,从而证明研究获得组织蛋白酶L基因家族的一个新成员。

日本血吸虫组织蛋白酶L样基因的原核表达、纯化与活性分析

目的：在原核系统中表达日本血吸虫组织蛋白酶L样（Schistosoma japonicum cathepsin L， SjCLs）基因，并检测所表达SjCLs重组蛋白的生物学活性。方法将SjCLs基因克隆入原核表达载体pET-30a （＋），并转化大肠埃希菌 BL21（DE3），用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thio-galactoside，IPTG）诱导重组蛋白表达，用亲和层析柱纯化表达产物，对表达的重组蛋白及纯化产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析，采用蛋白印迹（Western blot）分析日本血吸虫感染兔血清与SjCLs 重组蛋白之间免疫反应性。以N-苄酯基-苯丙氨酸-精氨酸7-酰胺基-4-甲基香豆素（Z-Phe-Arg-Nmec）为底物，采用荧光分光光度计分析重组蛋白的酶活性。结果成功构建pET30a-SjCLs重组质粒，并在大肠埃希菌中表达获得SjCLs重组融合蛋白，SDS-PAGE显示，表达及纯化蛋白的相对分子质量约为38000，与SjCLs的理论相对分子质量基本一致。SjCLs重组蛋白的免疫反应性分析结果为阴性，表明重组蛋白不能被抗日本血吸虫感染兔血清识别。以Z-Phe-Arg-Nmec为反应底物，检测到SjCLs的吸光度（A460）值为925，证实SjCLs具有组织蛋白酶的活性。结论获得了原核表达的SjCLs重组蛋白，该重组蛋白具有类似于SjCL2的酶活性，为深入研究SjCLs的功能奠定了基础。