胸腺肽Tβ_4

胸腺肽Tβ4是具有多重生物功能的小肽 ,是肌动蛋白的结合蛋白之一 ,该多肽的基因差异性表达与肿瘤恶变和转移、胚胎发育等关系密切 ,本文综述了胸腺肽Tβ4的研究进展。

改良的Tricine—SDS—PAGE电泳检测胸腺肽分子量

目的建立一种分析胸腺肽制剂中多肽分子量分布的简便可行的方法。方法采用改良的Tricine-SD-PAGE电泳方法分析胸腺肽制剂中多肽的分子量分布，并分析其中胸腺素α1的含量。结果采用该法可检出1μg的胸腺肽α1，分析国内市场上的胸腺肽制剂多肽分子量分布范围在3．5～8．5kD。结论该法适用于分析胸腺肽制剂中多肽组分的分子量分布和胸腺肽α1的存在，可用于胸腺肽制剂的质量控制。

胸腺肽高分子量物质检测方法的优化

目的优化现行胸腺肽质量标准中控制高分子量(Mw)物质的检测方法,解决该方法存在的对照品Mw大小与洗脱时间矛盾的问题。方法采用高效液相凝胶过滤色谱法(HPGFC),改变流动相的组成,建立高Mw物质的分析方法,并进行方法学验证。结果确定三氟乙酸-乙腈-水(0.05∶45∶55)作为流动相的HPGFC分析方法,在该洗脱条件下,对照品的洗脱顺序符合Mw变化的规律,经过方法学验证,改进后的方法更适于检测高Mw物质的含量。结论优化后的高Mw物质检测方法可用于胸腺肽制剂的质量控制,并为其他生化制剂高Mw蛋白检测提供了方法学参考。

沙漠植物DNA快速提取方法

在比较了植物ＤＮＡ数种提取方法之后，提出了一种改良的ＤＮＡ提取方法，可以快速地从沙漠植物中提取到高质量的ＤＮＡ样品，降低了实验成本。紫外吸收的测定结果表明：所获ＤＮＡ的Ａ２６０ｎｍ／Ａ２８０ｎｍ值大于１．７５。琼脂糖凝胶电泳结果表明：ＤＮＡ片段的大小为５０ｋｂ左右。用ＲＮＡ酶去除残留ＲＮＡ的效果良好，限制性酶切实验合格。该方法对于其他植物材料也非常有效。

miRNA-338与肿瘤相关研究新进展

MicroRNA(miRNA)是一类具有调控功能的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多个靶基因的表达,对个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命过程都有重要作用。近来研究发现miRNA-338在很多疾病中发生了异常表达,尤其与肿瘤的发生发展存在密切的联系。本文就miRNA-338与疾病关系的研究进展进行综述。

miR-519在肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生发展为复杂的多基因事件,microRNAs(miRNAs)参与其中并发挥重要作用。miRNAs是由长度为18-25个核苷酸组成的的非编码单链小RNA分子,通过与特定的靶mRNA结合来抑制靶基因转录或蛋白翻译从而沉默靶基因的表达,作为抑癌或致癌因子与靶基因共同作用参与肿瘤发生、发展。本文从miR-519的生成与组织分布、靶基因及相关肿瘤作用机制等方面进行综述。

基于MicroRNA-122的肝脏疾病治疗方法可能是一把双刃剑

目前大量研究表明MicroRNA-122(miR-122)可能作为治疗肝脏相关疾病的有效靶点,尤其是对脂质紊乱、HCV和HCC的治疗。用miR-122的反义寡氨酸屏蔽miR-122可以降低肝和血液里的胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及甘油三酯水平,还可以抑制HCV RNA的复制;而恢复和升高miR-122的表达可以抑制HBV RNA的复制和肿瘤的生长及转移,还可以增加HCC细胞对化疗药物的敏感性。值得注意的是miR-122功能不足又可能导致肝细胞的脂肪变性和纤维化。但鉴于miR-122在多种肝脏疾病中发挥着"相反"的作用,我们认为通过改变miR-122的表达治疗肝脏疾病有可能是一把双刃剑。

MicroRNA-17家族真核表达载体的构建及其对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响

目的构建miR-17家族(miR-17、miR-20a、miR-20b、miR-93、miR-106a、miR-106b)真核表达载体,探究它们对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖的影响。方法通过Eco RⅠ和HindⅢ双酶切真核表达载体pc DNA6.2-GW/Em GFP-miR,得到大片段后与人工合成的miR-17家族成熟体5p的寡聚核苷酸连接,通过DNA测序、BLAST检验以及双酶切电泳方法验证是否成功构建miR-17家族的真核表达载体。将构建成功的载体,用Lipofectamine2000瞬时转染人肝癌SMMC-7721细胞,应用real-time PCR方法检测miR-17家族表达水平,用CCK8法检测细胞增殖能力的变化。结果双酶切真核表达载体pc DNA6.2-GW/Em GFP-miR,得到的大片段与人工合成的miR-17家族成熟体5p寡聚核苷酸连接,通过DNA测序、BLAST检验及双酶切电泳的方法验证成功构建了miR-17家族真核表达载体。瞬时转染人肝癌SMMC-7721细胞后miR-17家族表达水平有了显著增加,能够促进SMMC-7721细胞的体外增殖。结论成功构建miR-17家族真核表达载体,得到瞬时转染miR-17家族的人肝癌SMMC-7721细胞,并观察到miR-17家族过表达可以促进人肝癌细胞的增殖。

利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法

目的:利用Jurkat细胞增殖法建立胸腺肽活性的检测方法,并进行优化、验证。方法:培养Jurkat细胞,加入不同浓度的胸腺肽制剂分别刺激24 h或48 h,然后通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测Jurkat细胞的增殖水平。同时,并对利用Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法的专属性、重复性、灵敏度、精密度及适用性进行验证。结果:最佳检测条件:胸腺肽使用浓度范围为20~200μg/mL;刺激时间为24 h;CCK-8染液孵育时间为3 h。胸腺肽活性在20~200μg/mL范围内,增殖相对提高率具有一定的浓度依赖性;重复性验证RSD均小于15%;Jurkat细胞增殖法检测破坏后的胸腺肽活性显著降低,且与E-玫瑰花环法检测的胸腺肽活性结果呈正相关关系(r=0.75,P<0.05)。结论:基于Jurkat细胞增殖法检测胸腺肽活性的方法具有准确客观、灵敏和稳定等优点,能够满足胸腺肽活性检测要求,可进一步推广。

蛋白免疫印迹和全自动蛋白质定量分析的比较研究

目的:比较传统的蛋白免疫印迹和全自动蛋白质定量分析检测特异性蛋白质相对含量的差异,并进行方法学优化,为蛋白质定量分析提供技术参考。方法:分别使用两种系统对不同分子量的目标蛋白进行检测,比较两种系统的灵敏度、重复性和适用范围。结果:相比传统WB系统,全自动系统灵敏性、重复性和稳定性更高,并且可进行多分子同时检测,尤其在检测微量蛋白、分子量较大或较小的蛋白以及高通量方面具有优势。结论:全自动蛋白检测是一种灵敏、高效的检测特异性蛋白丰度变化的系统,值得在科研和医学检验中推广。

LRRC超家族成员在肿瘤的研究进展

富亮氨酸重复序列(LRR)存在于多种蛋白质中,介导多种蛋白与蛋白之间的相互作用。近年来一些研究发现:LRRC超家族成员LRRC4、LRRC3B和LG11在多种肿瘤组织表达缺失或显著降低,并具有抑癌基因的功能;而另外一些LRRC超家族成员LGR4和LGR5在肿瘤中高表达,表现出原癌基因的作用。以上研究提示它们可能成为肿瘤诊断和治疗的新靶点。本文就LRRC超家族成员在肿瘤的研究进展进行回顾性综述。

抗乙肝免疫核糖核酸活性的测定

目的研究抗乙肝免疫核糖核酸免疫活性的测定方法。方法采用巨噬细胞吞噬法和白细胞黏附抑制法测定其细胞免疫活性 ,酶联免疫法和间接血凝法测定其体液免疫活性。结果实验组与对照组相比 ,巨噬细胞吞噬率显著增加 ,白细胞黏附率显著下降 ,血清中可检测到HBsAb的存在。

LINC00978在非小细胞肺癌中的临床价值和生物学作用

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)LINC00978 在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达变化及生物学功能,并初步探讨其作用机制。方法 采用qRT-PCR检测NSCLC患者肿瘤组织与血清中LINC00978的表达水平。通过CCK-8、平板克隆、Transwell迁移和侵袭实验观察LINC00978敲减和过表达对A549细胞生物学功能的影响。采用流式细胞术、qRT-PCR和western blot探究LINC00978的作用机制。结果 LINC00978在NSCLC患者肿瘤组织( t =2.465, P <0.05)和血清( t =8.781, P <0.01)中呈高表达。LINC00978敲减抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力( P 均<0.01 ),诱导G 1期阻滞以及细胞凋亡( P 均<0.01)。LINC00978敲减下调Cyclin D1和Bcl-2的表达而上调Bax的表达( P 均< 0.05 )。此外,LINC00978敲减抑制N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug和Twist的表达而促进E-cadherin的表达( P 均<0.05)。LINC00978过表达则具有相反作用。结论 LINC00978在NSCLC中高表达,并促进NSCLC发生、发展,具有成为NSCLC诊断及治疗新靶点的潜能。

HAb18G/CD147在激活的人脐静脉内皮细胞表达上调促进肿瘤血管生成

以前的研究证实HAb18G/CD147分子是一个在多种恶性肿瘤细胞表面高表达的质膜糖蛋白，与肿瘤的恶变显著相关。但该分子在内皮细胞的作甩尚未被揭示。本研究发现，HAh18G／CD147在激活的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）表达显著增强。

LncSox4在非小细胞肺癌中的表达及生物学作用

目的检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。方法采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwell迁移和侵袭试验检测敲除LncSox4对A549细胞生物学功能的影响;采用流式细胞术分析细胞周期情况;采用qRT-PCR和western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白质的表达水平。结果与癌旁对照相比,LncSox4在NSCLC癌组织中呈显著高表达(t=7.109,P<0.01);LncSox4基因沉默后,A549细胞生长速度减缓,细胞克隆形成数量减少(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.01),诱导细胞发生G 1期阻滞(P<0.01);LncSox4基因沉默抑制A549细胞中Cyclin D1、c-Myc、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达;LncSox4基因沉默还显著降低EMT相关转录因子Snail、Slug和Twist的表达水平。结论LncSox4在NSCLC中高表达,通过影响细胞增殖、迁移和侵袭促进NSCLC恶性进展,有望成为NSCLC诊疗新靶点。

基于翻转课堂的TBL结合PBL模式的实验教学尝试

在器官-系统整合课程生长发育区段实验教学中,增设遗传性长QT综合征的分子诊断及相关研究设计的实验内容,开展基于翻转课堂的TBL结合PBL教学模式的尝试。各讨论小组学生汇报精彩、讨论热烈。95%以上的学生表示满意,认为这种实验教学模式非常有必要;90%以上的学生认为其有助于提高自主学习能力和对理论知识的理解以及综合素质的提升。基于翻转课堂的TBL结合PBL的教学模式,结合合适教学主体和课程内容的选择,可以增强学生学习的内驱力,教学互益,为深入实验教学改革提供了可靠数据和有益借鉴。

TBL在医学遗传学实验教学中的实践

在医学遗传学C显带技术实验教学中,依据实验的关键因素将学生随机分组,开展团队学习实验教学模式的尝试。各实验小组所得的结果存在明显差异。通过集体讨论、分析原因,充分理解授课内容。95%以上的学生认为该实验教学模式非常有必要;90%以上的学生认为其有助于学习兴趣、对理论知识的理解和综合素质的提升。团队学习教学模式丰富了实验教学的内容和方式,为实验教学改革提供了可靠数据和有益的借鉴。

TAT-NEP1-40——神经再生的新型药物

在受损的中枢神经系统中,Nogo-A蛋白、髓鞘蛋白和少突髓鞘蛋白是抑制中枢神经轴突再生的主要物质,它们通过一个共同受体——Nogo蛋白受体(Nogo receptor,NgR)介导中枢神经轴突抑制。NEP1-40是NgR受体的竞争性抑制剂,是治疗中枢神经损伤是一个具有潜在性的候选药物。TAT蛋白质转导序列是HIV反式转录激活因子,是目前已知具有有效蛋白质转导功能的序列。利用蛋白质重组技术构建并表达的含有TAT结构域和NEP1-40肽的融合蛋白质TAT-NEP1-40可能成为一种治疗中枢神经系统损伤如中风、脑缺氧、脑出血、脑外伤和脊髓损伤的新颖的候选药物。

hsa-miR-126的靶基因预测及其生物信息学分析

目的:采用生物信息学的方法预测hsa-miR-126的靶基因及相关功能,为后续研究提供理论基础。方法:采用PubMed搜索hsa-miR-126相关文章,总结目前研究进展,使用mi RBase获得hsa-miR-126的基本信息,并用NCBI BLAST分析其序列保守性,以Targetscan、mi Randa及PicTar预测结果的两两交集为预测靶基因,并结合mi RTarBase上已证实的靶基因作为基因集合做GO分析和Pathway分析。结果:搜索PubMed获得相关文献24篇,多数研究集中于hsa-miR-126与肿瘤的关系,hsa-miR-126在多种物种间具有高度保守性,其5个预测靶基因和46个已证实靶基因于白细胞迁移、对糖皮质激素反应、促进内皮细胞增殖、蛋白信号转导等有功能富集(P<0.01),于多种肿瘤如肾细胞癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌有信号通路富集(P<0.01)。结论:hsa-miR-126可能参与多种肿瘤的发生发展过程。

RNA结合蛋白RBM6的研究进展

RBM6(RNA binding motif protein 6)是一种RNA结合蛋白,存在5种可变剪接体。以往的研究发现:与正常组织相比,这些剪接体在肺癌和乳腺癌等肿瘤组织中的表达均有显著变化,但其功能尚不清楚。越来越多的研究显示,RBM6可能是肿瘤进展中的一个重要的调控因子。该文将从RBM6的基因与蛋白结构、作用机制以及与疾病的关系三个方面对RBM6的研究进展进行总结。