副肿瘤性天疱疮抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及亚型和细胞因子的表达

目的对不同病期的副肿瘤性天疱疮(PNP)患者血清中抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)1和抗Dsg3抗体的滴度、亚型及其外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子IFN-γ和IL-4水平进行观察,探讨PNP的特殊发病机制。方法采用ELISA法检测6例PNP患者不同病期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及其IgG1和IgG4抗体亚型;采用流式细胞术(FCM)检测上述患者PBMC中T细胞的IFN-γ和IL-4水平,并与10例寻常型天疱疮(PV)患者、10例落叶型天疱疮(PF)患者及20例正常对照进行比较。结果 PNP患者组在急性期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度均升高,稳定期均明显降低,抗Dsg1和抗Dsg3抗体亚型IgG1/IgG4均以IgG1为主,与PV组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05),与PF组患者的抗Dsg1抗体亚型IgG1/IgG4比较,差异也有统计学意义(P<0.01);PNP组患者CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平明显高于PV组患者和PF组患者(P=0.001),且稳定期CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平较急性期明显降低(P<0.05)。PNP组急性期患者的CD4+T细胞内IL-4水平显著低于PV组患者(P<0.05)和PF组患者(P<0.01),但在稳定期时,其水平与急性期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PNP患者在抗Dsg1和Dsg3抗体的亚型、细胞因子等方面与其他类型的天疱疮存在明显差异。

Dsg3特异性的CD4^+ T细胞能够辅助B细胞产生天疱疮抗体

目的探讨CD4+T细胞在天疱疮致病性抗体产生中的作用。方法实验方面采用真核表达系统表达重组的天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3(Dsg3)胞外段功能区,联合不同佐剂(CFA或Alum)免疫C57BL/6小鼠,用免疫磁珠细胞分选(MACS)法分选出免疫后小鼠的CD4+T细胞,过继转移到T细胞受体β链(T cell receptor beta chain,TCRβ)缺陷小鼠,于转移后1、2、3、4周检测TCRβ缺陷小鼠体内CD4+T细胞的恢复,B细胞的增殖、活化,及特异性抗体的产生。结果过继转移后的TCRβ缺陷小鼠外周血中有CD4+T细胞的出现(比例有5%左右);CD4+T细胞进入缺陷小鼠脾脏中的淋巴小结,和B细胞相互作用;同时该小鼠血清中出现了特异性抗Dsg3抗体。结论 CD4+T细胞参与天疱疮致病性抗体的产生,在疾病中发挥极其重要的作用。

天疱疮患者调节性B细胞与致病性抗体的相关性研究

目的探讨调节性B细胞（Breg）在天疱疮发病中的免疫介导机制。方法以CD19^＋CD24^hiCD38^hi作为Breg标记，流式细胞仪检测48例天疱疮患者及20例健康人外周血中Breg占CD19^＋B细胞的比例，观察不同严重程度患者的Breg比例变化趋势。采用ELISA法检测患者血清中特异性抗Dsg1、Dsg3抗体滴度、亚型，分析其与Breg比例的相关性。结果天疱疮患者外周血Breg占CDf19＋B细胞的比例（11．54％±0．97％）与健康对照组（8．19％±0．85％）相比差异有统计学意义（P=0．04），且急性期轻度患者该比例（5．17％±2．14％）与中度患者（11．38％±5．30％，P=0．042）、重度患者（11．17％±5．31％，P=0．046）相比，差异均有统计学意义；Breg比例与抗Dsgl抗体亚型IgG4以及IgG4／IgG1的比值均呈正相关（r值分别为0．527，0．565，P值均〈0．01）。结论Breg主要和抗体产生以及疾病活动相关，但其具体的作用机制尚待研究。

凋亡在寻常型天疱疮发病中的作用

以往认为寻常型天疱疮仅由致病性抗体作用导致的一类自身免疫性皮肤黏膜疾病.但近年来其发病机制不断被揭示,凋亡在疾病中的作用亦越来越明确,如角质形成细胞经抗体直接作用可产生凋亡现象;棘层松解后形成的细胞间连接丧失可触发失巢凋亡.松解凋亡的提出进一步阐明棘层松解和细胞凋亡之间的关联性,也证明寻常型天疱疮的凋亡与传统的凋亡现象不同,具有其特殊性,对寻找疾病治疗的新靶点具有重要意义.

天疱疮特异性抗体亚型与疾病活动的相关性研究

目的 探讨天疱疮患者抗桥粒芯糖蛋白（Dsg）1和Dsg3抗体亚型与疾病活动的相关性.方法 收集47例天疱疮患者血清,ELISA检测其特异性抗Dsg1和Dsg3抗体及亚型,分析抗体滴度及亚型与疾病活动的相关性.结果 抗Dsg1和Dsg3抗体类别与天疱疮临床类型有关,17例皮肤黏膜同时受累的患者中有14例（82.4%）同时存在两种抗体;16例仅皮肤受累的患者中有15例（93.7%）存在抗Dsg1抗体,仅1例（6.3%）存在抗Dsg3抗体;6例仅黏膜受累的患者只存在抗Dsg3抗体,阳性率为100%.随着病情的加重,抗Dsg1和Dsg3抗体滴度有上升趋势,但该趋势与疾病的严重度并不完全平行.而抗体亚型则和疾病活动相关,活动期以特异性IgG4亚型为主,稳定期以IgG1亚型为主.抗Dsg1阳性者,活动期特异性IgG4和IgG1抗体吸光度（A）值分别为1.92±1.21和0.60±0.61,IgG4/IgG1＞1;稳定期特异性IgG4和IgG1抗体A值分别为0.03±0.02和0.22±0.11,IgG4/IgG1＜1;抗Dsg3阳性者,活动期特异性IgG4和IgG1抗体A值分别为2.35±2.17和1.84±1.16,IgG4/IgG1＞1;稳定期特异性IgG4和IgG1抗体A值分别为0.15±0.16和1.05±0.77,IgG4/IgG1＜1.结论 天疱疮特异性抗体亚型与疾病活动密切相关,用ELISA检测天疱疮患者血清中抗Dsg1和Dsg3抗体类型、特异性抗体亚型及滴度,可更好地辅助诊断疾病、监测疾病活动.