1-甲基环丙烯对草菇乙烯受体基因表达的影响

通过生物信息学的方法分析草菇(Volvariella volvacea)基因组的乙烯受体基因,并利用qRT-PCR检测1-甲基环丙烯(1-MCP)处理对草菇乙烯受体基因表达的影响,探究1-MCP对草菇保鲜的分子机理。结果表明:在草菇基因组中共鉴定到5个乙烯受体编码基因(GME317、GME1797、GME2633、GME10790、GME11734);草菇乙烯受体蛋白与植物的同源蛋白存在差异,5个乙烯受体基因编码的乙烯受体蛋白被分为两类:一类(GME1797、GME11734和GME2633)与其他植物的同源蛋白聚类在一起;另外一类(GME317和GME10790)与肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)和糙皮侧耳(P.ostreatus)激酶调节的应激反应转录因子skn7聚成一类;GME1797和GME11734对1-MCP比较敏感,在1-MCP处理后第1天就开始响应,呈下调表达;GME2633和GME10790表达量在1-MCP处理后的第3、4天显著受抑制;GEM317表达量在1-MCP处理后的第4天显著受抑制。

MADS-box转录因子调控磷脂酰肌醇信号系统在草菇贮藏期间的作用

为探讨MADS-box转录因子调控磷脂酰肌醇信号系统在草菇(Volvariella volvacea)子实体贮藏期间的作用。采用感官评价在(15±1)℃分别贮藏0(对照组)、1、2、3、4、5 d的子实体的色泽、气味、形态,并测定其硬度和弹性;以0 d作为对照组,分别取贮藏0、2、5 d的子实体进行转录组测序和贮藏期间显著富集的通路分析;以草菇子实体总RNA为模板,测定草菇MADS-box转录因子Vvrin1基因以及MADS-box转录因子调控的钙调蛋白质基因(calmodulin,Calm)、磷脂酶C基因(phospholipase C,PLC)和蛋白激酶C基因(protein kinase C,PKC)的相对表达量。结果表明:草菇子实体在采后贮藏期间,易变质腐烂,其感官品质、硬度和弹性均呈下降趋势;Vvrin1基因的表达水平上调,PLC、Calm和PKC基因的表达水平均下调。因此,在草菇子实体贮藏期间MADS-box转录因子通过负调控磷脂酰肌醇信号系统中Calm和PLC的表达,调节细胞内钙离子浓度,进而影响PKC的表达。

草菇Vvrin1基因RNAi转化子的筛选及其转录组分析

草菇味道鲜美,食用价值高,是我国主要栽培的商业食用菌之一。MADS-box转录因子对真核生物的生长发育和信号传导具有关键性的调控作用。本研究通过农杆菌介导的方法获得5个草菇MADS-box转录因子Vvrin1基因的RNA干扰转化子,并进一步对转化子的表型进行分析,发现5个转化子菌丝在PDA固体培养基和栽培料中的生长速度均显著小于(P<0.05)转化野生型菌株H1521,且转化子菌丝颜色呈黄白色,较粗,较稀疏。出菇实验发现,RNA干扰转化子生长停滞在菌丝阶段未能形成原基出菇。转化子菌丝阶段的转录组测序数据发现,上调基因主要富集在核糖体、氨基酸生物合成和次生代谢物的生物合成等途径;下调基因主要富集在MAPK信号通路、脂肪酸氧化、磷脂酰肌醇信号系统等途径。进一步推测MADS-box转录因子Vvrin1基因表达水平降低会影响MAPK信号通路和磷脂酰肌醇信号通路的表达,进而降低菌丝生长速度,影响原基形成。