缘座壳孢菌抑菌活性化合物的分离及鉴定

【目的】座壳孢菌是粉虱和蚧壳虫的一种重要昆虫病原真菌,其代谢产物具有抑菌、杀虫、抗肿瘤和抗氧化等生物活性。本研究旨在分离并鉴定缘座壳孢发酵物中的代谢物,以期为拓展该生防菌的应用提供依据。【方法】基于色谱技术从缘座壳孢菌A.marginata WYTF2017-01发酵培养物中分离化合物,借助波谱手段鉴定其化合物结构,分析化合物的抑菌活性。【结果】本研究共鉴定了12种化合物,包括Methyl 24-methylene-3-oxolanost-8-en-26-oic ester(1)、Ergosta-5,7,22-trien-3-ol,4-methyl-,(3β,4α,22 E)(2)、杜斯塔宁(3)、3β-acetoxy-15α,22-dihydroxyhopane(4)、麦角固醇(5)、4-(Hydroxymethyl)-3-furancarboxylic acid(6)、Eupenicisirenin B(7)、4,6-dihydroxy-1(3 H)-isobenzofuranone(8)、β-谷甾醇(9)、对叔丁基苯甲酸甲酯(10)、2-benzyl-4H-pyran-4-one(11)和6-benzyl-4-oxo-4 H-pyran-3-carboxamide(12),其中化合物1、2、6~12为首次从昆虫病原真菌中分离鉴定。化合物1、2、3、6、7、8、11和12对真菌或细菌具有不同程度的抑制活性,MIC值为3.13~50.00μg·mL^(-1)。化合物7、8和12抑菌活性较为突出,化合物7对大肠杆菌的MIC值为3.13μg·mL^(-1),效果与阳性对照链霉素相同,而8和12对青枯劳尔氏菌的MIC值分别为6.25和12.50μg·mL^(-1),优于或等同于链霉素(MIC值为12.50μg·mL^(-1))。【结论】从缘座壳孢菌分离的多种代谢物具有良好的抑菌活性,显示了防治植物病害的潜力。

黄曲霉毒素B_1人工抗原的制备、鉴定与免疫特性研究

采用EDC法制备获得黄曲霉毒素B1人工抗原AFB1-BSA。对AFB1-BSA紫外扫描,结果表明其图谱与黄曲霉毒素B1和BSA的图谱有明显差异,其红外扫描结果与BSA的图谱也有明显差异,表明BSA与黄曲霉毒素B1偶联成功。以不同摩尔比的AFB1-BSA人工抗原免疫小鼠,制备了特异性的鼠抗AFB1多克隆抗血清。综合评价不同起始摩尔比反应所得人工抗原的免疫特性和AFB1转化率,当AFB1与BSA的起始摩尔比为40∶1时,AFB1与BSA的偶联产物摩尔比为4.93∶1,AFB1的转化率达12.33%;用间接ELISA法测其抗血清的效价,经过四次免疫之后,抗血清的效价最高,高达1∶1 056 000。

竹荪连作对土壤微生物区系及酶活性的影响

以新地、连作地栽培竹荪,采集土壤样品,分别测定土壤微生物区系变化及土壤酶活性。结果表明:种植年限增加,细菌、放线菌和真菌菌量都有增加,细菌增幅不显著,放线菌、真菌差异达极显著水平。土壤中好氧性纤维素分解菌、厌氧性自生固氮菌、反硝化细菌、亚硝酸细菌、氨化细菌分别增加了2.70、16.53、3.20、0.35、0.11倍,而厌氧性纤维素分解菌、好氧性自生固氮菌分别减少了49.55%、91.05%。连作竹荪的土壤对脲酶、过氧化氢酶具有促进作用,分别增加了84.23%、17.14%,而对多酚氧化酶、蛋白酶则呈抑制作用。结论为竹荪连作会破坏土壤微生物种群平衡。

我国螺旋藻产业面临的困境与发展思路

2012年初媒体报道的“螺旋藻铅超标”事件暴露了螺旋藻产业发展中存在的问题,引起了消费者的恐慌,导致螺旋藻产品市场萎缩,企业效益下滑。文章剖析了螺旋藻产业发展应正视的问题,提出了若干具体的应对措施。

座壳孢属真菌的分类研究

对昆虫病原真菌座壳孢的功能、资源调查、经典分类发展历程及其传统分类存在的问题、以及应用现代分子生物学方法研究座壳孢的系统发育等进行了回顾和总结,旨在为澄清该属真菌的种类及其系统发育关系提供科学依据。

基于自主、合作、探索型设计模式的制药工程专业天然药物化学课程的探讨和实践

为了符合创新型社会发展和国际工程认证要求,本文在制药工程专业的天然药物化学课程改革中提出了基于自主、合作、探索型设计模式的天然药物化学教学实践方案,并将方案实施过程的体会进行阐述,得出结论,该方案对提高学生创新能力,自主学习能力以及团队协作能力的培养有促进作用。

“三味一体”的制药工程专业天然药物化学课程改革与实践

《天然药物化学》是福建农林大学制药工程专业的核心课程.从《天然药物化学》的理论教学、实践教学及网络课程建设三个方面进行改革,构建具有"工味"、"药味"、"农味",即的天然药物化学课程体系.

座壳孢次生代谢物对Raji细胞增殖的影响

座壳孢(Aschersonia)是一类重要的虫生真菌成员,其次生代谢产物具有杀虫、抑菌等生物活性。本研究选取两株座壳孢菌(WYYS-6和WYSD-16),大量培养后从其培养液中萃取次生代谢产物,将座壳孢菌的次生代谢产物与Burkitt淋巴瘤细胞系Raji共孵育,然后应用四唑蓝[3-(4,5-双甲基-2-噻唑)-(2,5)-苯基溴化四氮唑蓝,MTT]检测方法研究了次生代谢产物在浓度为1mg/ml(稀释10倍)和0.1mg/ml(稀释100倍)下对淋巴系统恶性肿瘤Raji细胞增殖的影响。培养48h后,MTT检测显示1mg/ml的座壳孢菌WYYS-6次生代谢产物可以明显抑制Raji细胞增殖,而WYSD-16代谢产物(1mg/ml和0.1mg/ml)和0.1mg/ml的WYYS-6次生代谢产物对Raji细胞增殖未呈现出显著的抑制作用。

双水相法分离螺旋藻藻蓝蛋白与多糖

以螺旋藻为原料,采用PEG2000-硫酸镁双水相体系对螺旋藻粗提液中的藻蓝蛋白和多糖进行分离。分别探讨了PEG2000质量分数、硫酸镁质量分数、离子强度、体系pH及萃取次数对双水相体系萃取藻蓝蛋白与多糖的影响,设计正交试验优化萃取条件,并考察了螺旋藻的反萃取体系条件。结果表明:当硫酸镁质量分数为14%,PEG质量分数为6%,KCl质量分数为0.5%,体系为p H4.0时,为优化双水相萃取体系。螺旋藻水提液通过双水相萃取,藻蓝蛋白富集于上相,萃取率为93.91%;下相中糖类萃取率为59.58%。收集上相,采用12%PEG,6%硫酸镁的双水相体系对藻蓝蛋白进行反萃取,藻蓝蛋白反萃取率为99.06%。螺旋藻水提液经过PEG2000-硫酸镁双水相体系萃取与反萃取,藻蓝蛋白回收率达92.66%,藻蓝蛋白纯度由0.78提高到2.64。

中国莫勒菌代谢物的生物活性评价

本文对中国莫勒菌(Moelleriella sinensis)天然产物的生物活性展开初步研究,旨在为合理开发该菌生物资源提供科学依据.对分离纯化到的20个纯化合物进行抗菌活性评价.化合物14对大肠杆菌和青枯劳尔氏菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.30和6.25μg·mL^(-1),超过阳性对照链霉素.化合物11对大肠杆菌的MIC为6.25μg·mL^(-1),化合物11对5个菌株(大肠杆菌、西瓜枯萎病菌、青枯劳尔氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)均有抑制活性,MIC为6.25~25.00μg·mL^(-1),展示了较为广泛的抑菌活性.采用4种方法(超氧阴离子清除能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、T-AOC总抗氧化能力)对分离纯化得到的化合物1~20进行抗氧化活性评价,化合物3、8、11、19表现出较强的抗氧化活性.化合物19对超氧阴离子自由基的清除率最高(在50μg·mL^(-1)时抑制率为7.15%),化合物3对DPPH、ABTS自由基的清除率最高(在50μg·mL^(-1)时清除率分别为66.02%、30.75%),化合物19的总抗氧化能力最强(50μg·mL^(-1)相当于0.63 mmol·L^(-1) FeSO_(4)的抗氧化能力).

培养基优化对提高莫勒菌产孢量的影响

为提高昆虫病原真菌莫勒菌产孢量,通过正交试验设计L_(9)(3^(4)),对莫勒菌培养基成分进行筛选和优化。结果表明,有助于莫勒菌产孢的碳源、氮源、金属离子和维生素分别为7 g·L^(-1)可溶性淀粉、10 g·L^(-1)酵母浸粉、4×10^(-4)mol·L^(-1)Fe^(2+)和50 mg·L^(-1)V_(C)。莫勒菌在优化培养基上培养2周后的产孢量可达1.2×10^(8)孢子·cm^(-2),比优化前提高60倍。

高效杀蚊苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29的发酵优化

苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29为新型高效杀蚊菌株,应用快速有效的数学统计方法对其杀蚊毒力的发酵培养进行优化.通过单因素筛选确定最佳碳源为葡萄糖、麦芽糖、可溶性淀粉,氮源为typetone、大豆蛋白胨、干酪素;最佳金属离子为Mg^(2+)、Al^(3+).采用二水平Placlkett-Burman设计对影响毒力的8因素进行显著性筛选,获得培养基成分中3个重要影响因子:葡萄糖、干酪素和Al_2(SO_4)_3;运用爬坡路径法对这3种因子进行试验,获得3种重要因子的最适浓度范围;通过响应面分析法得到3个重要因子的交互作用和最佳条件,确定BRC-LLP29菌株最佳毒力水平的发酵培养基为:葡萄糖19.8g/L、干酪素28.4g/L、Al_2(SO_4)_31.2g/L、MgSO_4 2g/L、K_2HPO_4 3g/L、CaCO_3 0.5g/L,优化后毒力水平达到致死率61.11%,与响应面数学模型的预测值只有5.91%的误差.发酵条件优化结果表明:发酵温度为31°,发酵初始pH为7.0,摇瓶装量为40mL/250mL三角瓶,每瓶的接种量为3.5%,发酵72h,对致倦库蚊最终致死率达到最高为83.33%.

座壳孢及其有性型(子囊菌门)代谢产物研究进展

座壳孢及其有性型是一类重要的虫生真菌,隶属子囊菌门、粪菌纲、肉座菌目、麦角菌科,能寄生粉虱和蚧类昆虫,可开发成一种环境友好型的生物农药。座壳孢及其有性型属成员广泛分布于热带和亚热带地区,该类群物种、栖息环境和生态适应的多样性使它们的代谢产物化学结构及其生物活性彰显出多样性特点,结构和功能多样的真菌代谢产物已成为发现新药先导化合物的重要资源。虫生真菌因其独特的生活方式和多种生存环境形成了与众不同的适应寄主特性及代谢通路,明显提高获得新颖结构、显著活性的代谢产物的几率,目前已是药物重点研发的领域。在座壳孢及其有性型代谢产物研究中已报道了萜类、黄酮类、醌类、环肽和甾醇等多种化合物,并具有抗肿瘤、抗疟疾、抗菌和杀虫等多种生物活性,可在农业、工业和医药保健等方面应用。本文对近年座壳孢及其有性型代谢产物的化学成分和生物活性等方面的研究进展进行概述,为促进座壳孢及其有性型代谢产物的深入研究、开发利用和新药创制提供参考。

三株亚肉座菌乙酸乙酯提取物生物活性及GC-MS分析

采用乙酸乙酯提取3株亚肉座菌菌丝体,测试虫生真菌乙酸乙酯提取物(EAE)的抗肿瘤、抗菌和抗氧化活性,并借助GC-MS方法分析各提取物中的化学成分。结果发现2株亚肉座菌的菌丝体EAE对HepG2细胞的抑制活性较强,IC50均小于9μmol/L;抗菌结果表明2株真菌的提取物具有抑制细菌生长的作用;1株供试菌的EAE表现出较强的DPPH自由基清除活性(清除率可达85%)。GC-MS分析表明从亚肉座菌JXJG201717、JXJG201720和ARSEF7697的EAE中分别鉴定出21、35和39种成分,主要成分为酯类、醇类和酸类;盘状亚肉座菌JXJG201720与ARSEF7697有相同化合物13个,与暹罗亚肉座菌JXJG201717存在7个相同化合物。本研究表明虫生亚肉座菌具有产生丰富活性成分的能力,彰显出多种利用价值。