2017—2022年广州市肾综合征出血热流行特征分析

目的掌握广州市2017—2022年肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)报告病例的流行病学特征,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法收集广州市2017—2022年肾综合征出血热病例数据,分析流行病学特征,利用集中度和圆形分布法探索HFRS的季节性趋势。结果广州市2017—2022年共报告肾综合征出血热(HFRS)病例569例,年均发病率为0.52/10万,发病率整体呈下降趋势,集中趋势M=0.38,病例报告主要在1—6月。各区均有HFRS病例报告,以海珠区(175例,30.76%)、白云区(95例,16.70%)和番禺区(83例,14.59%)较多。发病男女性别比为2.77∶1,年龄分布以30岁组(25.31%)和40岁组(22.85%)中青年为主。职业分布以家务及待业人员(31.99%)为主。结论广州市2017—2022年发病率呈现明显下降趋势,特定人群发病风险有所增加,应继续强化重点人群防控策略。

啮齿动物携带冠状病毒及其跨种传播研究进展

2019冠状病毒病(COVID-19)的大流行,引起了公众对冠状病毒前所未有的关注。鼠类等啮齿动物是许多病毒的天然宿主和储备库,其中也包括冠状病毒。啮齿动物的种类繁多,数量庞大,通常生活在家畜或人类附近,这增加了通过密切接触将病毒传播给人类的潜在风险。本文主要就冠状病毒的分类、基因组、结构以及啮齿动物所携带的冠状病毒流行情况进行系统阐述,并分析其跨种传播的风险,以深入了解啮齿动物携带的冠状病毒,为预防新发冠状病毒的发生和传播提供依据。

华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库的构建及鉴定

目的 构建华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础。方法提取华支睾吸虫囊蚴总RNA;用Clontech公司SMARTTM cDNA文库构建试剂盒并按其操作方法进行,进行反转录合成双链cDNA。PCR产物经蛋白酶K消化、纯化后,进行SfiI酶切;用ChromaSpin 400柱将酶切产物进行分级分离,经1.1％琼脂糖凝胶电泳鉴定,回收0.4～4kb的组分,并与λTriplEx2载体连接;连接产物经体外蛋白包装,产生未扩增文库;检测未扩增文库滴度和重组效率后,进行文库的扩增,并测定扩增文库的滴度;随机挑取9个噬菌斑,用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建的cDNA文库的质量。结果 未扩增文库滴度达7.0×107pfu/ml,扩增文库滴度达2.5×108pfu/ml;用载体两端的引物进行PCR鉴定,结果显示:扩增文库中,含1kb以上的占30％左右,1kb～500bp占69％。结论已成功地获得一高质量的华支睾吸虫囊蚴cDNA表达文库。

华支睾吸虫cDNA表达文库的构建及初步筛选

目的 构建华支睾吸虫cDNA表达文库 ,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础。 方法 提取华支睾吸虫总RNA ;用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒操作方法 ,进行反转录合成双链cDNA ;PCR产物纯化后 ,进行SfiI酶切 ;用ChromaSpin 40 0柱将酶切产物进行分级分离 ,回收 0 .4～ 4kb的组分 ,并与λTriplEx2载体连接、体外蛋白包装 ,产生未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库的扩增 ,并测定扩增文库的滴度及鉴定。 结果 未扩增文库滴度达 7.5× 10 7pfu/ml ,扩增文库滴度达 2 .7× 10 8pfu/ml ;用载体两端的引物进行PCR鉴定 ,显示 :所选噬菌体中均含有重组的cDNA ,大小在 5 0 0bp以上。 结论 已成功地获得一高质量的华支睾吸虫cD

华支睾吸虫分泌蛋白基因(CsCrSP)的克隆和生物信息学分析

目的筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因,克隆并构建重组表达载体。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过BLASTn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan,NCBIConservedDo-mainSearch等程序对其进行结构域及进化树分析。结果筛选出华支睾吸虫未知基因Pcs004f03序列,含689bp;应用VecterNTI分析,理论相对分子质量(Mr)为21000,完整的ORF含561bp,编码187aa。该基因有潜在的糖激化位点、3个N肉豆蔻酰化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、cAMP-andcGMP依赖蛋白激酶磷酸化位点。利用软件在线搜索发现在第1～50aa内有一明显的信号肽,初步推断CsCrSP为一种分泌蛋白。结论CsCrSP基因为华支睾吸虫富含半胱氨酸分泌蛋白基因。

霍乱弧菌菌体蛋白双向电泳技术的建立

目的建立霍乱弧菌全菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱。方法利用适当的裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白;采用pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳;考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用ImageMaster 2D Elite5.0图象分析软件进行分析,所得的数据用SPSS15.0进行统计分析。结果得到了(1081±16)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI4.24～7.20之间,重复胶的匹配点数为(1057±28),匹配率为97.85%。结论建立了霍乱弧菌全菌双向电泳分析方法,2-DE图谱中蛋白位点的分辨率和重复性非常高,获得了较为理想、清晰的双向电泳图谱,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础。

考虑入渗和蒸发影响的土坡稳定性分析方法

本研究建议的一种分析方法假定斜坡非饱和土体的水分运动参数及抗剪强度参数与饱和度的依赖关系均可根据实验或经验确定。通过数值计算方法求解任意给定的入渗和蒸发边界条件下斜坡土体的瞬态含水率分布及与其相对应的瞬态抗剪强度参数分布。在此基础上瞬态的斜坡安全因数即可通过常规的稳定性分析方法求得。

鸡组织细胞端粒相关序列的克隆及序列分析

根据真核细胞端粒DNA序列的共同特点 ,设计了一条引物 (TELO0 2 ) ( 2 4nt)。按照TaKala克隆试剂盒的介绍方法 ,染色体基因组DNA经 HaeⅢ 和 HinfⅠ 两种限制性内切酶酶切后 ,先进行初级PCR(C1和TELO0 2 )扩增 ,得到的产物为模板再经过次级PCR(C2和TELO2 )扩增 ,得到的产物用试剂盒回收 ,并连接到PMD_1 8_T载体上 ,转化到JM1 0 9受体菌中。从阳性克隆中提取质粒DNA进行PCR和酶切鉴定 ,确认后进行序列测定 ,获得了一段 2 43sbp的鸡端粒相关序列。此序列与人第 7条染色体基因组末端序列的同源性为 63 .5 % ;与鼠端粒旁序列同源性为 63 .2 % ;而与MDV基因组序列的BamHⅠ酶切片段 76.6%同源。

恶性疟原虫海南株端粒酶催化亚基基因的克隆及序列分析

目的 克隆恶性疟原虫端粒酶基因 ,为今后筛选抗疟药物提供理论依据。方法 根据四膜虫的端粒酶基因序列 ,设计并合成一对引物 ,从恶性疟原虫基因组DNA中扩增出端粒酶基因 ,进行测序及利用生物信息学技术对端粒酶基因进行了分析。结果 得到了 2 3kp的恶性疟原虫海南株端粒酶基因。结论 恶性疟原虫端粒酶基因的克隆 。

浅议上游法细粒尾矿堆坝问题

上游法细粒尾矿堆坝是尾矿处理技术遇到的难题之一。本文对细粒尾矿堆坝的不利条件进行了分析，通过和一般砂性尾矿堆坝条件的对比，讨论了二者在沉积滩形态、坝体剖面结构及土层力学性状等方面的差异对尾矿坝稳定性的影响。并就如何解决这一辣手问题提出了一些看法。

华支睾吸虫CsSP16.4基因的克隆、序列分析和功能预测

目的通过筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因;克隆并构建重组表达载体,为进一步研究其功能及其应用价值奠定基础。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过Blastn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan,NCBIConservedDomainSearch等程序对其进行结构域分析及进化树分析。结果筛选得到的序列长725bp,应用VecterNTI分析,理论分子量为16.4kDa,理论等电点(pI)为6.44,疏水氨基酸(AILFWV)占36%,带电荷氨基酸(RKHY-CDE)占29%,极性氨基酸(NCQSTY)占28.8%,酸性氨基酸(DE)占8.65%和碱性氨基酸(KR)占9.21%。应用NCBI站点的ORFFinding分析发现其含4个可能的ORF,其中最长的ORF,从第42到第494bp,起始密码为ATG、终止密码为TAG,完整阅读框含450bp,编码150aa。发现该基因有潜在的2个糖激化位点、3个N肉豆蔻酰化位点和1个蛋白激酶C磷酸化位点。结论确定该基因为华支睾吸虫分泌蛋白基因,为作为诊断候选抗原提供了依据。

鱼类麻醉剂在活鱼运输中的应用

随着渔业的发展,活鱼运输问题引起了人们很大关注。活鱼运输包括鱼苗、亲鱼、商品鱼和观赏鱼的运输。以往这些鱼在运输中尤其在远距离、高密度运输中死亡率非常高。另外,随着生活水平的提高,人们希望吃到新鲜可口的活鱼。

试论土的应力应变模式与滑坡发育过程的关系

滑坡按其发育过程的特点可区分为突然失稳型和渐进破坏型。本文分析了这两类滑坡在破坏机理和发生条件上的差异，阐明了土的应力应变模式与滑坡发育过程的特点有非常密切的关系。

DNA改组及其应用

DNA改组是一种改造基因和蛋白的有效实验进化技术。DNA改组技术在医药、疫苗、农业、生物治疗、兽药研究、营养、人类基因治疗、生物武器的研究等重要领域都具有广阔的应用开发前景。

细粒棘球蚴线粒体rRNA的序列测定

通过ＥＳＴ方法对细粒棘球蚴ｃＤＮＡ文库进行筛选，将得到的ＥＳＴ序列送入ＧｅｎＢａｎｋ和ＥＢＩ进行同源性分析及登陆，对有意义的ＥＳＴ进行通测，得到了完整的细胞线粒体ｒＲＮＡ序列，并进行了同源性比较及质粒转化。为细粒棘球蚴的系统分类、鉴定及进化研究提供了新的有用依据。

鸡马立克氏病肿瘤组织细胞端粒长度的测定

用马立克氏病病毒 ( MDV)京 -1株血毒对 SPF鸡攻毒 ,7周后扑杀 ,采取各内脏组织 ,一部分组织做病理切片 ,发现有肿瘤细胞浸润者即判定为阳性 ;另一部分组织用于端粒长度测定。以 DIG标记的探针( TTAGGG) 4,通过 Southern Blot方法测定细胞端粒长度 ,结果表明 ,阳性肾脏、肝脏、脾脏、神经。

维生素E——鱼类饵料中不可缺少的维生素

维生素E又叫生育酚,属于酚类化合物,它能维特动物的正常生殖能力。雄性动物缺乏V_E时睾丸发育不全,精子活力降低;雌性动物缺乏V_E时胚胎发育受到阻碍。胚胎死亡并被吸收,有时发生流产。一般来说雄性动物的维生素E缺乏病常常预后不良,而雌性动物在补给V_E后其生殖能力可以恢复。

一步法快速检测高致病性禽流感(H5N1)的方法建立

禽流感目前是世界范围内流行最广的人兽共患病之一,给世界经济发展和人类健康带来巨大的危害.如何快速诊断是目前亟待解决的问题之一.目前我国普遍采用的禽流感检测方法是世界动物卫生组织推荐使用的鸡胚病毒分离法.这种方法虽然精确,但缺点也很明显--耗时过长,从提取样品到最终出具结果,最少需要21天时间.这种方法已不能适应我国口岸快速通关放行的需要,给出口企业带来种种不便,也不能满足我国加入世贸组织后国内消费者对禽肉安全性的需求.北京检验检疫局与深圳匹基公司合作,利用分子生物学手段,检测高致病性禽流感病毒核酸,无须做鸡胚病毒分离培养,可将检测时间从原来的21天缩短为4个小时.……

考虑裂隙及雨水入渗影响的膨胀土边坡稳定性分析

对膨胀土边坡进行了考虑裂隙和降雨入渗影响的稳定性分析 ,通过工程实例比较了考虑裂隙和不考虑裂隙的差别。研究结果表明 ,考虑裂隙影响的边坡降雨入渗和稳定性分析较为合理和实用。