不同荧光蛋白基因标记利迪链霉菌

利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)A01是一株分离自北京郊区对植物病原真菌具有广谱抑制作用的放线菌,在植物真菌病害防治中具有良好的应用前景。为了检测红霉素启动子在利迪链霉菌A01中的活性,为后期对菌株A01进行遗传改造提供技术支持,同时对生防菌A01进行遗传标记以研究和阐明其在生态环境中的生物学行为规律,本实验采用两亲本接合的方法,将增强绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RFP)基因片段克隆到携带红霉素启动子(ermE*)的链霉菌表达载体pIB139中,成功构建了以egfp和rfp为报告基因的重组载体pIB139-EGFP和pIB139-RFP,并转化利迪链霉菌A01,突变株在荧光显微镜下观察到较强的绿色荧光和红色荧光,同时PCR鉴定结果正确。这表明重组载体pIB139-EGFP和pIB139-RFP成功转入菌株A01,并且ermE*启动子成功启动egfp和rfp基因表达。