shRNA沉默干扰HMGA2基因对胃癌细胞株MKN-45的增殖与凋亡的影响

目的:观察小分子RNA(shRNA)沉默后HMG-A2基因在胃癌细胞株MKN-45的表达,并探讨HMGA2基因对胃癌细胞的增殖与凋亡的影响.方法:构建针对人HMGA2基因的shRNA真核表达载体,瞬时转染人胃癌细胞株MKN-45.用细胞免疫组化的方法观察转染72h后HMGA2的蛋白表达水平,以MTT比色法、流式细胞术检测转染后MKN-45细胞的生长增殖、凋亡的情况.结果:转染HMGA2-shRNA组的蛋白表达强度(171.34±19.61)明显弱于scrambled组(143.48±19.04)和空白对照组(141.79±18.09,P<0.05),较之scrambled组(5.66%±0.63%)和空白对照组,HMGA2-shRNA组(39.32%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05),HMGA2-shRNA组的凋亡率(39.67%±2.35%)与scrambled组(4.29%±1.33%)和空白对照组(5.05%±1.84%)相比明显增加(P<0.05).结论:靶向HMGA2基因的shRNA可以有效抑制人胃癌MKN-45细胞的生长,并促进细胞的凋亡,HMGA2可能是胃癌治疗的一个潜在靶点.

吲哚美辛预防ERCP术后胰腺炎的Meta分析

目的:评价非甾体类抗炎药吲哚美辛预防经内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangio-pancreatography,ERCP)后胰腺炎(post-endoscopic retrograde cholangiopancreato-graphy pancreatitis,PEP)的有效性.方法:计算机检索PubMed、Embase、中国生物医学文献数据库、清华同方数据库、万方数据库、维普数据库,全面收集吲哚美辛预防ERCP术后胰腺炎的随机对照试验,由两人独立进行数据提取和文献评价.应用Review Manager5.0进行统计分析.结果:共纳入11项随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs),共计2718例行ERCP患者.Meta分析结果显示:应用吲哚美辛可降低PEP的发生率(OR=0.39,95%CI:0.30-0.52,P<0.00001)及高淀粉酶血症的发生率(OR=0.50,95%CI:0.37-0.67,P<0.00001).11个纳入研究均未报告药物相关不良反应.结论:吲哚美辛可以有效降低ERCP术后胰腺炎及术后高淀粉酶血症的发生率.

沉默干扰HMGA2对胃癌细胞Wnt/β-Catenin信号转导通路的影响

目的:观察小分子RNA沉默HMGA2在胃癌细胞株MKN-45的表达,研究HMGA2对Wnt/β-Catenin通路中主要分子β-Catenin以及下游靶分子c-myc、CyclinD1的表达量及转录活性的影响,探讨HMGA2对Wnt/β-Catenin信号转导通路的影响.方法:构建针对人HMGA2基因的shRNA真核表达载体,瞬时转染人胃癌细胞株MKN-45,用RT-PCR、Western blot分别检测转染后shHMGA2组、scrambled组和空白对照组细胞中HMGA2 mRNA和蛋白的表达情况,评估抑制效应;分别检测转染后3组细胞中的β-Catenin、c-myc、Cyclin D1 mRNA和蛋白的表达水平.结果:转染48h后shHMGA2-1组的HMGA2 mRNA相对表达量(0.58±0.07),与shHMGA2-2组(0.92±0.13)、shHMGA2-3组(0.90±0.16)、scrambled组(1.07±0.14)及空白对照组(1.19±0.09)相比有统计学意义(P<0.05),其他4组相比无统计学意义(P>0.05);转染48h后shHMGA2-1组的HMGA2沉默效果最好,HMGA2 mRNA表达明显下降,抑制率51.3%;故选用质粒shHMGA2-1继续后续实验;Westernblot结果显示转染72h后shHMGA2-1组HMGA2蛋白相对表达量为(0.11±0.03),与scrambled组(0.48±0.12)及空白对照组(0.55±0.08)相比有统计学意义(P<0.05),HMGA2蛋白表达明显下降,抑制率80%;沉默干扰HMGA248h和72h后,β-Caten in mRNA和蛋白表达水平在空白对照组(1.07±0.02,0.69±0.04)与scrambled组(0.91±0.02,0.67±0.10)中无明显差异(P>0.05),而shHMGA2-1组(0.53±0.04,0.44±0.05)较之两组有明显的下降(P<0.05);shHMGA2-1组中c-myc mRNA和蛋白相对表达量为(0.39±0.04,0.25±0.07)较之空白对照组(0.88±0.05,0.75±0.09)、scrambled组(0.84±0.03,0.66±0.10)有明显下降(P<0.05),后两组相比较无统计学意义(P>0.05);shHMGA2-1组中Cyclin D1 mRNA和蛋白相对表达量为(0.31±0.02,0.12±0.01)较之空白对照组(0.52±0.03,0.73±0.12)、scrambled组(0.51±0.01,0.63±0.07)有明显下降(P<0.05),后两组相比较无统计学意义(P>0.05).结论:RNAi载体能有效地抑制HMGA2在胃癌细胞株MKN-45中的表达,沉默干扰HMGA2抑制了Wnt/β-Catenin通路中的主要分子β-Catenin以及下游靶分子c-myc、Cyclin D1的表达,HMGA2基因可能是通过调控Wnt/β-Catenin通路对胃癌细胞生长和凋亡发挥作用的.

HMGA2shRNA真核表达载体转染胃癌MKN45细胞株的沉默作用

目的:将HMGA2shRNA真核表达载体转染至胃癌细胞MKN45,检测其HMGA2mRNA及蛋白的表达。方法:实验分3组:空白组(未转染的胃癌细胞)、实验组(转染HMGA2shRNA组)、阴性对照组(转染错义序列组),RT-PCR和Western blot分别检测HMGA2在mRNA及蛋白水平的变化。结果:与空白组和阴性对照组相比,实验组HMGA2mRNA的表达明显下降,差异具有统计学意义(均P<0.05);HMGA2蛋白表达的变化与基因的变化相一致,实验组的蛋白表达明显受抑制,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:HMGA2的特异性shRNA表达载体抑制了HMGA2的表达,HMGA2shRNA转染有望用于胃癌的基因治疗,为进一步研究其更多功能打下基础。

胃癌组织中mTOR的表达及其临床意义

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹检测30例胃癌组织及正常胃黏膜上皮组织中mTOR mRNA及蛋白的表达,并分析其表达与胃癌临床病理学特征的关系。结果 mTOR mRNA在胃癌组织中的阳性表达率和表达水平均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),且mTOR mRNA的表达随分化程度的降低而显著增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高(P<0.05)。mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达率及相对表达值均显著高于正常胃黏膜上皮组织(P<0.05),并且其在胃癌组织中的表达值随分化程度的降低而增高(P<0.05),有淋巴结转移者较无淋巴结转移者mTOR蛋白的表达值显著增高(P<0.05)。结论 mTOR的表达可能与胃癌的发生发展有关,其对判断胃癌的生物学行为具有一定的意义。

肝硬化失代偿期患者心理痛苦及影响因素的研究

目的了解肝硬化失代偿期患者心理痛苦水平,分析其影响因素。方法采用一般资料调查表、心理痛苦温度计对300例肝硬化失代偿期患者进行心理痛苦调查。结果肝硬化失代偿期患者心理痛苦评分≥4分176例,占58.67%;多元线性回归分析显示,婚姻状况、经济问题、医疗费用支付方式、肝硬化病程、疼痛、睡眠问题是肝硬化失代偿期患者心理痛苦水平的重要影响因素。结论肝硬化失代偿期患者中度以上心理痛苦发生率较高,护理人员应根据心理痛苦发生的影响因素,采取干预措施改善其心理健康水平。

心理痛苦温度计临床应用进展

从心理痛苦温度计的评估时机、阳性结果截断值、心理痛苦相关因素的判断、影响心理痛苦温度计评估的因素等方面对心理痛苦温度计在临床应用现状进行综述,提出心理痛苦温度计可快速识别肿瘤、非肿瘤病人的心理痛苦程度,根据病人的特殊情况采取个性化心理治疗。

‘红富士’苹果常温贮藏试验初报

测定贵州省2个苹果主产区‘红富士’苹果常温贮藏下失重率、病果率、果实硬度和可溶性固形物含量4项指标的变化,比较2个产地‘红富士’苹果常温下贮藏性能。结果表明:‘红富士’苹果果实失重率随着贮藏时间的推移均呈现下降-上升-下降的趋势,长顺‘红富士’苹果失重率明显高于威宁‘红富士’果实;常温贮藏15～20d未出现病果;长顺‘红富士’苹果常温下耐贮性好于威宁‘红富士’苹果。

长顺县冬油菜品种引种试验

为了筛选出适合长顺县种植的优质高产杂交油菜新品种,通过田间对比试验,对参试品种的产量、抗性及特征特性进行对比分析。结果表明,油研585增产最多,比对照高7.35%;油研57产油量增产最多,比对照高12.61%。结合农艺性状、经济性状及产量产油量表现进行综合评价,沣油737、油研585、庆油3号、油研57、油研2013丰产性、抗逆性均较好,熟期适中,适宜在长顺县大面积推广种植。

鲜食苹果国内外农药最大残留限量标准研究

苹果由于较高的营养保健价值成为国际水果市场的热门,但受农残等因素限制,我国苹果只能以较低价格主要出口到邻国,为了使从业者掌握国际高端市场和主要贸易国苹果农药残留现状并有效应对,本研究分析比较了我国与国食品法典委员、全球主要高端消费和贸易国苹果农药最大残留限量指标,指出我国标准存在的不足,提出相应对策,为中国制定苹果安全限量标准提供有价值的参考,以促进中国苹果产业的发展。

肠系膜上动脉介入置管溶栓治疗对肝硬化合并门静脉血栓患者肝功能和凝血功能的影响

目的探讨肠系膜上动脉介入置管溶栓治疗对肝硬化合并门静脉血栓患者肝功能和凝血功能的影响。方法选取有急性症状的肝硬化合并门静脉血栓患者60例,随机分为对照组和试验组,各30例。对照组采用单一抗凝法(皮下注射低分子肝素过渡口服华法林),试验组则采用肠系膜上动脉介入置管溶栓+口服华法林治疗。对比分析两组患者治疗前后肝功能、凝血功能、血常规指标的变化,以及治疗后上消化道出血情况。结果治疗7 d后,两组凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)均长/高于治疗前,且试验组PT长于对照组(均P<0.05)。治疗6个月后,两组白细胞(WBC)计数、血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)水平均高于治疗前,且试验组PLT水平显著高于对照组(均P<0.05)。治疗6个月后,两组丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平均较治疗前降低,白蛋白(ALB)水平均较治疗前升高,且试验组ALT、AST、ALP水平均显著低于对照组,ALB水平明显高于对照组(均P<0.05)。治疗6个月后,试验组总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)水平均显著低于对照组(均P<0.05)。治疗后两组上消化道出血率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与皮下注射低分子肝素过渡口服华法林治疗方案相比,肠系膜上动脉介入置管溶栓+口服华法林治疗对改善肝硬化合并门静脉血栓患者的肝功能效果更好,且不增加对凝血功能和治疗后上消化道出血率的影响,可以作为治疗肝硬化合并门静脉血栓的方案之一。

电子模拟探雷器

电子模拟探雷活动是集科技、体育、游戏、国防教育为一体的运动项目，也是对中、小学生实施素质教育的一个良好载体。一方面，它有科技内容，可以动手制作。另一方面，它又有激烈竞争的比赛形式，所以受到青少年的欢迎。

与初学者谈焊接(下)

三、从外观判断质量及不良焊点的修改方法用万用表测量电阻可检查焊点的导电性能;用轻微晃动的方法可检查焊点的牢固程度,这里再教大家一种简单直观的检查方法,即从焊点的外观形态大致判断焊接的质量好坏,从而可以边焊接,边对不良焊点进行修改。 1.良好的焊点:如图4(a)。它应该表面光滑、圆润、像小山一样,并且高度与底面积应成比例。元件的引线要尽量垂直于印刷板,以它为中心,周围的焊锡要匀称。元件的引线要露出少许,以便确认其高度。

长顺红富士苹果生产技术

从规范建园、控冠促果、科学施肥及病虫害防治等方面对贵州省长顺县的红富士苹果生产技术进行了总结。

色环电阻的简易读写方法

这里介绍的方法的特点是简单直观,边读边写,易于初学者掌握。一、颜色与数字的对应普通的色环电阻有4环,前3环表示数字,第4环表示允许的误差。附表列出了12种颜色在各个色环上所表示的数字或含义。

与初学者谈焊接(上)

焊接是电子制作过程中非常重要的一环,它的作用是使被焊接的金属之间充分、紧密地接触,从而保证良好的导电性能,还能隔绝空气,防止焊接部位氧化或锈蚀。有的焊点还起着将电子元件固定在某一部位的机械支撑作用。对于初学制作的人来说,焊接是首先要掌握的一道工艺。焊接工艺质量好坏,直接决定着作品能否成功。本文将系统地与朋友们谈谈焊接的知识和技能。一、焊接用品首先要选择一套对路、适用的焊接用品。

长顺县高钙苹果主要病害的发生与防治技术

介绍长顺县高钙苹果斑点落叶病、褐斑病、轮纹病、白粉病、腐烂病、炭疽病等的发病规律和防治方法,以供果农参考。

贵州长顺射干有害生物发生情况及防控建议

2016—2018年,对贵州省长顺县中药材射干有害生物发生及防治情况开展调查。结果表明,贵州长顺射干主要病害10种。其中,侵染性病害7种、非侵染性病害3种,以锈病、叶枯病和根腐病危害程度较重;主要害虫共4目9科15种,以二化螟、玉米螟、小地老虎发生普遍、为害严重;主要杂草有19种,田间发生种类和群落组成在不同生境间变化较大。防治情况调查表明,当地射干有害生物防治常用药36种。其中,杀菌剂15种,杀虫剂13种,除草剂8种,以低毒农药为主;冬季未清园、用药不规范、病害重治轻防是造成射干有害生物防治效果不理想的主要原因。