传染性法氏囊病病毒和禽致病性大肠杆菌的二重探针实时荧光定量PCR方法的建立与应用

为建立用于传染性法氏囊病病毒(IBDV)和禽致病性大肠杆菌混合感染快速鉴别检测的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,研究分别根据IBDV VP2基因和大肠杆菌UidA基因设计合成特异性引物和探针,通过普通PCR方法扩增目的基因片段并克隆至pGM-T载体,构建重组质粒pGM-T/VP2和pGM-T/UidA作为标准品,通过正交试验确定引物和探针的最佳浓度,分别建立基于VP2和UidA基因的标准扩增曲线,并进一步验证其特异性、灵敏性、重复性,建立的方法应用于人工感染样本和临床样本的检测,并与常规PCR方法进行比较。结果显示:VP2和UidA基因的最佳上、下游引物浓度均为0.30μmol/L,VP2和UidA基因的探针浓度分别为0.35μmol/L和0.25μmol/L;VP2和UidA基因扩增的线性范围均为10^(3)~10^(7)拷贝/μL,相关系数R2≥0.99,灵敏度均为100拷贝/μL;两者组间及组内变异系数均小于2%;人工感染样品与临床样品的检测结果与普通PCR方法一致。研究表明,建立的二重探针FQ-PCR方法为同时检测IBDV和禽致病性大肠杆菌提供了快速、敏感、特异且能满足临床样本需求的检测方法。

志愿服务动机与自我价值感的关系:社会支持和亲社会行为的链式中介作用

目的:探究大学生志愿服务动机与自我价值感的关系,通过构建链式中介模型,考察社会支持和亲社会行为在两者关系中的作用机制。方法:采用志愿服务动机量表、自我价值感量表、社会支持量表、亲社会行为量表对1026名大学生进行调查,使用非参数百分位Bootstrap法进行中介效应分析。结果:(1)大学生志愿服务动机、自我价值感、社会支持、亲社会行为之间均呈两两显著正相关(r=0.292,0.734,0.475,0.271,0.368,0.468;P<0.001);(2)大学生的社会支持与亲社会行为分别在志愿服务动机与自我价值感之间存在中介效应,效应量为0.12,0.24;(3)大学生的社会支持、亲社会行为在志愿服务动机与自我价值感之间具有链式中介作用,效应量为0.01。结论:志愿服务动机不仅直接影响大学生的自我价值感,还通过社会支持与亲社会行为的链式中介作用间接影响大学生自我价值感。