目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血中环孢素(CsA),并与荧光偏振免疫法(FPIA)进行比较。方法液质联用法:Waters Quattro Premier串联质谱检测器,采用Symmetry C18色谱柱(2.1mm×150mm,5μm),以含有10mmol·L-1乙酸铵-0...目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血中环孢素(CsA),并与荧光偏振免疫法(FPIA)进行比较。方法液质联用法:Waters Quattro Premier串联质谱检测器,采用Symmetry C18色谱柱(2.1mm×150mm,5μm),以含有10mmol·L-1乙酸铵-0.1%甲酸溶液0.1%甲酸甲醇溶液为10∶90,流速0.25mL·min-1,采用多反应监测进行定量,血样处理:采用乙腈沉淀蛋白,分析时间为5min。并收集162人份临床使用CsA的重症肌无力患者的血样分别用HPLC-MS/MS及FPIA法测定并进行评价。结果HPLC-MS/MS:CsA在人血中50～1000μg·L-1内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RSD%)均小于10%。2种方法测定患者血样,HPLC-MS/MS结果大多数低于FPIA法。结论2种测定方法的相关性较差,串联质谱法方法用于监测CsA血药浓度特异性好,灵敏度高,经济,可适性强。与FPIA法相比,对CsA的母药有高度的选择性,并能够提高分析的灵敏度。展开更多
文摘目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血中环孢素(CsA),并与荧光偏振免疫法(FPIA)进行比较。方法液质联用法:Waters Quattro Premier串联质谱检测器,采用Symmetry C18色谱柱(2.1mm×150mm,5μm),以含有10mmol·L-1乙酸铵-0.1%甲酸溶液0.1%甲酸甲醇溶液为10∶90,流速0.25mL·min-1,采用多反应监测进行定量,血样处理:采用乙腈沉淀蛋白,分析时间为5min。并收集162人份临床使用CsA的重症肌无力患者的血样分别用HPLC-MS/MS及FPIA法测定并进行评价。结果HPLC-MS/MS:CsA在人血中50～1000μg·L-1内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RSD%)均小于10%。2种方法测定患者血样,HPLC-MS/MS结果大多数低于FPIA法。结论2种测定方法的相关性较差,串联质谱法方法用于监测CsA血药浓度特异性好,灵敏度高,经济,可适性强。与FPIA法相比,对CsA的母药有高度的选择性,并能够提高分析的灵敏度。
