系统型种痘样水疱病样淋巴增殖性疾病继发噬血细胞综合征1例及文献复习

目的通过报告1例系统型种痘样水疱病样淋巴增殖性疾病(系统型HVLPD)继发噬血细胞综合征(HLH)的病例,并对国内外相关文献进行复习,提高对该病的认识。方法收集患者临床资料、实验室检查、组织病理、免疫组化、TCR基因重排、全外显子基因测序结果并进行分析。结果患者男,19岁。因全身泛发丘疹、丘疱疹、坏死结痂伴发热7个月入院。患者临床表现为种痘样水疱病样皮疹,淋巴结及脾大,血细胞减少、高甘油三酯血症、NK细胞活性降低、可溶性白细胞介素-2受体升高,VCA-IgA和EA-IgA阳性,EBV-DNA定量高,全外显子测序未见致病性基因突变。组织病理:表皮和毛囊基底层细胞液化变性,色素失禁,淋巴细胞进入表皮和毛囊上皮,真皮全层血管和毛囊周围大量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润,大量红细胞外溢,皮肤附件及小血管周围见异型淋巴样细胞呈灶状浸润,可见核分裂像。免疫组化:CD3(+),CD5(+),CD20(个别+),CD30(小片状+),CD79a(个别+),CD4(+),CD7(+),CD8(+),TIA-1(+),CD56(散在个别淋巴细胞+),Ki-67约50%,原位杂交EBER(+)。TCRβ基因检测到单克隆重排。结合临床及辅助检查诊断为系统型HVLPD继发HLH。随访8个月后,患者在等待异基因造血干细胞移植过程中死亡。结论系统型HVLPD少见,需要警惕继发HLH。临床医生提高对本病的认识可避免漏诊误诊,避免延误治疗。

伴有口腔扁平湿疣及指甲损害的少见神经梅毒1例

报告1例少见的伴有口腔扁平湿疣及指甲损害的神经梅毒。患者男,49岁,因双手铜红色斑疹2个月,舌尖疣状斑块1个月,左眼黑影1周就诊。皮肤科检查:左侧大拇指、右侧食指指甲凹凸不平,部分增厚。双手散在绿豆大小铜红色斑疹,周围覆以领圈样脱屑。舌尖粘膜可见平顶、颗粒感疣状斑块。左耳听力较右耳轻度下降。矫正视力下右眼视力1.0,左眼视力0.8。实验室检查:血清TPPA>1∶1280(+),TRUST 1∶64(+),脑脊液TRUST 1∶1(+),TPPA 1∶640(+),VDRL 1∶2(+)。宏基因组二代测序技术对舌尖疣状斑块进行微生物DNA测序,确认口腔梅毒螺旋体的存在。诊断为:神经梅毒,二期梅毒(口腔扁平湿疣)。予水剂青霉素400万U每4 h 1次,治疗2周后,几乎所有临床表现均改善。3个月后复查血清TRUST降至1∶8,目前仍在随访中。

小鼠念珠菌性阴道炎模型中TSLP表达及其与IL-2,IL-10关系

目的探讨胸腺间质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在小鼠念珠菌性阴道炎发病机制中的作用。方法采用皮下注射雌二醇和阴道内接种白念珠菌悬液建立Balb/c小鼠念珠菌性阴道炎模型,用激光扫描共聚焦显微镜和ELISA检测实验组和对照组小鼠阴道组织中TSLP,IL-2,IL-10表达。结果实验组小鼠阴道组织中TSLP表达明显高于对照组(P<0.01);IL-2水平在接种后7d明显增加(P<0.01),14d时出现明显下降(P<0.01);IL-10含量在接种后7d、14d均明显高于对照组(P<0.01)。TSLP仅与IL-10表达呈显著正相关(P<0.01)。结论 TSLP表达上调可能在念珠菌致病中起重要的免疫调节作用。

pEGFC1-IGFBP7诱导恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞的凋亡

目的:构建胰岛素样生长因子结合蛋白7(insulin-like growth factor binding protein7,IGFBP7)表达质粒(pEGFC1-IGFBP7),研究IGFBP7对恶性黑素瘤细胞SK-MEL-28凋亡的影响。方法:构建pEGFC1-IGFBP7质粒,并将pEGFC1-IGFBP7质粒及空质粒分别转染入SK-MEL-28细胞,荧光显微镜观测细胞转染效率,Annexin-FITC/PI检测转染后SK-MEL-28细胞的凋亡。结果:成功构建pEGFC1-IGFBP7质粒,用Effectene试剂能将pEGFC1-IGFBP7质粒有效转染入SK-MEL-28细胞,转染效率达61%。流式细胞仪结果显示pEGFC1-IGFBP7可明显促进SK-MEL-28细胞凋亡,转染24h后的凋亡率达(28.4±2.57)%,转染空质粒及未转染组细胞凋亡率分别为(5.8±0.44)%和(6.4±0.71)%(F=406.138,P<0.05)。结论:pEGFC1-IGFBP7能有效诱导黑素瘤SK-MEL-28细胞凋亡,为IGFBP7为基础的黑素瘤基因治疗提供了实验依据。

雌激素化小鼠念珠菌性阴道炎模型中COX-2,TSLP的表达及其意义

目的探讨环氧化酶2(cyclooxy genase,COX-2)、胸腺间质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在雌激素化小鼠念珠菌性阴道炎模型中的表达及其在致病中的作用。方法将60只小鼠随机分为雌激素化白念珠菌感染组(EI组)、雌激素化非感染组(E组)及正常对照组(C组),EI组采用皮下注射雌激素及阴道内接种白念珠菌造模,E组仅皮下注射雌激素。念珠菌接种后第2,4,7,14天,3组小鼠阴道冲洗液中真菌量的动态变化采用集落形成单位(CFU)计数。各组小鼠阴道组织中的念珠菌感染情况,COX-2和TSLP的表达分别采用PAS染色、免疫荧光激光共聚焦检测,并进行统计学分析。结果 EI组CFU自接种后第2天升高、第4天达到高峰、之后下降。EI组CFU平均值(3.47±1.82)×103/mL高于E,C组(E,C组无念珠菌生长,P<0.01);第7天,EI组COX-2绿色荧光程度较强(0.252±0.020),明显高于E组(0.155±0.005)和C组(0.098±0.006),经比较差异具有统计学意义(P<0.001);第7天,EI组TSLP红色荧光最强(0.391±0.011)明显高于E组(0.243±0.020)和C组(0.155±0.006),经比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论在雌激素化小鼠念珠菌感染模型中,黏膜中COX-2,TSLP表达的上调可能在念珠菌致病中起重要作用。

体外分化Th17细胞IL-17f,ctBP和Gfi1的表达

目的检测小鼠Th17细胞诱导分化模型中IL-17f,ctBP和Gfi1的表达情况并探讨其临床意义。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4+CD62L+T细胞后,空白对照组用RPMI 1640培养,Th17分化组用anti-CD3ε,anti-CD28,anti-IFN-γ,anti-IL-4抗体及IL-6,TGF-β1和IL-23等细胞因子培育,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。两组细胞分别培养72 h后,采用Realtime-PCR检测IL-17f,ctBP,Gfi1 mRNA的表达情况。结果 Th17分化组细胞经相关抗体及细胞因子刺激诱导分化后,其IL-17f mRNA表达明显增高(分化前为1,分化后达194.011721),但ctBPmRNA,Gfi1 mRNA表达均明显低于空白对照组,以上差异均有统计学意义(P均<0.01),对照组ctBPmRNA分化前为1,Th17分化后为0.45375958,Gfi1 mRNA表达在对照组分化前为1,Th17分化后为0.00430432。结论 ctBP和Gfi1在Th17分化组中表达显著下调,但上述两种转录辅抑制因子是否参与了Th17细胞的分化调控值得进一步研究。

射频联合中药内服及他扎罗汀外用治疗原发性皮肤淀粉样变疗效观察

目的探讨射频联合中医辨证施治及他扎罗汀外用治疗原发性皮肤淀粉样变的临床疗效。方法 33例患者左侧胫前皮疹采用射频加他扎罗汀凝膏局部外用,右侧单用他扎罗汀。并在西医局部治疗的基础上予中医辨证施治(中药内服),在治疗(总疗程3个月)后随访6个月,比较两种方法的疗效。结果中药内服加他扎罗汀外用有效率为66.7%(22/33),而射频联合中药内服及他扎罗汀外用治疗有效率达90.9%(30/33),疗效优于前者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论射频联合中医辨证施治及他扎罗汀外用治疗原发性皮肤淀粉样变病,疗效好,不良反应少,值得临床应用。

淋病奈瑟菌感染模型中aniA及norB基因的表达及其临床意义

目的研究aniA及norB基因在淋病奈瑟菌(淋球菌)感染模型中的表达及其临床意义。方法分离正常人外周血中性粒细胞(PMN),将其分为对照组(A组)及淋球菌感染组(B组)。在0,3,8,12h分别以实时荧光定量PCR测定各组PMN中iNOS mRNA及淋球菌aniA,norB mRNA的表达,用镉还原法检测各组细胞培养液中的一氧化氮(NO)浓度。结果B组中iNOS,aniA,norB mRNA的表达及水平均较A组升高;NO浓度在8h达到高峰,以后逐渐下降(P<0.05)。而A组中各时间段iNOS,norB mRNA的表达及NO浓度无明显变化。在淋球菌刺激早期B组norB表达与N0成正相关(r_s=0.862,P<0.01),而在norB上调后N0浓度逐渐下降。结论淋球菌感染中aniA,norB基因的上调,可能与该菌适应体内微氧环境实现免疫逃逸并致病有关。

结节性痒疹患者血清中食物不耐受sIgG、IgG亚型和TNF-α水平测定

目的探讨食物不耐受sIgG(FI-sIgG)和TNF-α在结节性痒疹发病机制中的作用。方法应用ELISA和散射比浊法分别检测34例结节性痒疹患者和20例正常人血清中FI-sIgG、TNF-α、总IgG和IgG亚型水平。结果结节性痒疹组血清中FI-sIgG阳性率和TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,结节性痒疹组血清中IgG1、IgG4水平明显升高,而IgG2水平明显降低(P<0.05)。结论食物不耐受导致TNF-α上调可能参与结节性痒疹的发病。

复方丹参联合阿奇霉素治疗痤疮的临床观察

目的观察复方丹参联合阿奇霉素治疗痤疮的临床疗效。方法128例痤疮患者随机分成两组。治疗组64例,口服复方丹参片3片/次,3次/d,加阿奇霉素分散片(维宏)250 mg/次,1次/d;对照组口服美满霉素50 mg/次,2次/d。疗程均为8周。结果8周后,治疗组的痊愈率为62.6%(42/64),对照组为40.6%(26/64),两组比较差异有显著性(2χ=8.031,P<0.01);治疗组的总有效率为87.5%(56/64),对照组的总有效率为62.5%(40/64),两组比较差异有显著性(2χ=10.667,P<0.01);治疗组各类型痤疮的疗效与对照组的比较差异有显著性(HCⅠ=5.83,HCⅡ=4.88,HCⅢ=4.18,HCⅣ=4.47,均P<0.05)。治疗组不良反应的发生率为18.7%(12/64),对照组为35.9%(23/64),两组比较差异有显著性(2χ=4.758,P<0.05)。结论复方丹参联合阿奇霉素治疗痤疮疗效好、副作用小、复发率低。

IGFBP-3、caspase-3在小鼠白念珠菌阴道炎模型黏膜组织中的表达

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)在ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型中阴道黏膜局部的表达及其临床意义。方法构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型,运用荧光实时定量PCR及免疫组化检测感染组与正常组中IGFBP-3、caspase-3表达的差异。结果构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型成功,感染组阴道组织中见大量念珠菌丝及炎症细胞浸润;IGFBP-3c、aspase-3在感染组中较正常组高表达(P<0.01)且两者表达呈正相关(rs=0.683,P<0.01)。结论IGFBP-3、caspase-3在感染组中高表达可能与念珠菌下调阴道黏膜免疫并致病有关。

5-氨基酮戊酸光动力学疗法与高频电灼治疗跖疣的疗效比较

目的观察5-氨基酮戊酸光动力学疗法(5-ALA-PDT)与高频电灼治疗跖疣的疗效差异。方法60例确诊为跖疣的患者,随机分为2组,5-ALA-PDT组32例采用5-ALA-PDT治疗,高频电灼组28例采用高频电灼治疗。观察两组疗效和副作用。随访3个月,观察两组的复发情况。结果5-ALA-PDT组痊愈12例,显效13例,有效5例,无效2例;高频电灼组痊愈5例,显效11例,有效8例,无效4例,两组疗效比较差异有统计学意义(Hc=4.0805,P<0.05);5-ALA-PDT组副作用的发生率为53.1%,明显低于高频电灼组的87.5%(P<0.05);随访3个月,5-ALA-PDT组的复发率为6.3%(2/32例),明显低于高频电灼组的28.6%(8/28例)(P<0.05)。结论5-ALA-PDT治疗跖疣的疗效明显优于高频电灼法,是一种疗效好、无明显痛苦、无瘢痕形成、复发率低的治疗跖疣的新疗法。

皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中FADD、Caspase-3的表达与细胞凋亡的关系

目的:探讨皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)、基底细胞癌(简称基癌)组织中FADD、caspase-3(简称casp-3)的表达及其与细胞凋亡的关系。方法:应用原位末端标记(TUNEL)和SABC免疫组化技术检测48例鳞癌、41例基癌中FADD、casp-3表达及细胞凋亡。结果:鳞癌中FADD、casp-3表达及凋亡指数(A I)均明显高于基癌(P<0.01),两种表皮肿瘤的FADD、casp-3表达与A I均呈正相关(r=0.521,P<0.05),FADD与casp-3之间的表达亦呈正相关(r=0.437,P<0.05)。低分化鳞癌中的casp-3表达和A I低于高分化者(P<0.05),鳞癌原发灶中的A I高于转移灶(P<0.01)。结论:Fas凋亡途径可能是鳞癌、基癌的主要凋亡途径,FADD、casp-3是鳞癌、基癌细胞凋亡中重要的促凋亡因子,并有相互协同促凋亡作用。

皮肤科临床见习中“灵活施教、激活学生思维”教学方式的探讨

本文结合我院皮肤科临床见习的实际,从皮肤科见习内容的设计、教学方式的选择两方面,采用多种形式,灵活施教,对如何激活学生的临床思维,以提高见习教学质量进行了探讨。

靶向性纳米载体及RNA激活系统在抗肿瘤运用中的研究进展

靶向性纳米技术以及RNA激活技术是抗肿瘤研究热点,本文简要论述了纳米药物载体在抗肿瘤靶向性研究的进展,以及RNA激活技术的机制;并对靶向性纳米载体与RNA激活技术在抗肿瘤方面联合运用的可行性及应用前景进行了分析。

临床医学生科研能力的培养策略

医学的发展离不开科研,科学研究水平已成为决定医院在国内外学术影响力的关键指标。本文对本单位如何激发医学生科研意识、训练科研思维、培养科研的预测设计能力、信息筛选能力、实施操作能力和资料整理能力的培养策略作一总结。

靶向IGFBP7慢病毒载体遏制恶性黑素瘤的实验研究

目的构建靶向IGFBP7的LV5病毒表达载体,并检测其表达效能及在黑素瘤细胞系中促凋亡的作用。方法以人igfbp7基因序列作为模版合成编码核酸序列,通过限制性内切酶NotⅠ和NsiⅠ酶切、T4 DNA连接酶连接,将igfbp7插入LV5-GFP,构建靶向IGFBP7的慢病毒质粒表达载体,筛选阳性克隆后与包装质粒通过脂质体共转染SK-MEL-28人黑素瘤细胞株,对照组转染LV5空载体。病毒感染SK-MEL-28,采用荧光显微镜观察感染的效率,Realtime PCR检测igfbp7m RNA的表达,流式细胞术检测对照组及处理组细胞凋亡率。统计数据分析LV5-NC-IGFBP7促黑素瘤凋亡的效9能。结果成功构建LV5-NC-IGFBP7,病毒转染后测定其滴度为1x10 UT/m L,细胞感染率在80%以上,Realtime PCR检测表明处理组igfbp7 m RNA表达高于对照组(P<0.01),但对照组及处理组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论靶向IGFBP7的LV5-NC-IGFBP7病毒载体能有效促进igfbp7 m RNA高表达,但促恶性黑素瘤凋亡的效能有待提高。

正常C57BL/6J小鼠器官组织中胰岛素样生长因子结合蛋白7的表达

目的观察正常小鼠器官组织中胰岛素样生长因子结合蛋白7(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP7)的表达。方法利用Real-timePCR、免疫荧光法检测正常C57BL/6J小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中IGFBP7表达。结果心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中均有IGFBP7表达,其中肾、脾、肺、肝表达较高,肠道表达最低(P<0.01)。结论 IGFBP7在正常C57BL/6J小鼠许多器官组织中均有表达,但以肾、脾、肺、肝中表达较高。

正常C57BL/6J小鼠器官组织中胸腺间质淋巴细胞生成素的表达

目的观察正常小鼠各种器官组织中胸腺间质淋巴细胞生成素(thymicstromal lymphopoietin,TSLP)的表达。方法利用Real-time PCR、免疫荧光法检测正常C57BL/6J小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中TSLP的表达。结果心、肝、脾、肺、肾、肠、胸腺、阴道中均有TSLP表达,其中心、肝、肾、阴道表达较高,肠道表达最低(P<0.01)。结论 TSLP在正常C57BL/6J小鼠许多器官组织中均有表达,但以心、肝、肾、阴道黏膜中表达较高。