连续梁拱桥拱脚抗裂控制及监测技术研究

连续梁拱拱脚是拱肋架设施工的基础及前提,但系杆拱拱脚混凝土在施工过程中极易出现混凝土结构性裂缝,影响结构安全。依托荆荆铁路江汉运河特大桥(74+160+74)m连续梁拱桥,对拱脚关键部位施工抗裂性主动控制及信息化监测进行了重点研究,通过优化混凝土的配合比、减少水泥用量、掺加添加剂、优化材料用量等措施,进行多次对比试验,并采用信息化监测手段对拱肋的线形、内力等进行动态监测,以确保拱肋的施工质量满足施工及设计要求,可以有效降低混凝土结构裂缝的产生,延长桥梁使用寿命,可为工程实践提供指导和借鉴。

相差显微镜和UF-100联合检测鉴别血尿来源

目的探讨相差显微镜和UF-100联合检测在鉴别肾性与非肾性血尿中的价值。方法用相差显微镜和UF-100联合检测105例不同来源血尿标本的尿RBC数、尿RBC形态及尿RBC平均前向闪射光强度(RBC-MFsc)等。结果70例肾性血尿尿RBC数通常<500/μl,尿RBC畸形率84%;当RBC-MFsc≤70ch(Channel)时,敏感性90.2%,特异性83.6%,诊断符合率92.8%。35例非肾性血尿的主要特点是:尿RBC数通常>500/μl,尿RBC畸形率14%;RBC-MFsc通常>80ch。结论联合检测分析尿RBC数、尿RBC形态及RBC-MFsc等指标能客观、准确地鉴别和诊断血尿来源。

人细胞核dUTPase的克隆表达及其酶学活性

以阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)患者脑cDNA文库质粒为模板 ,用PCR方法扩增得到人细胞核dUTP焦磷酸酶 (dUTPase)的cDNA ,将其克隆到谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合表达载体pGEX 4T 1中 ,并在大肠杆菌BL2 1中获得高效表达 .表达的融合蛋白GST dUTPase经过谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析 ,凝血酶酶切和SephacrylS 10 0纯化 ,得到高纯度dUTPase蛋白 .通过SDS PAGE ,氨基酸组成分析 ,N端氨基酸序列测定以及HPLC测Mr 结果与期望值一致 .通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸 (PPi)来测定表达产物dUTPase蛋白及GST dUTPase融合蛋白的酶活性 ,发现两蛋白都具有正常的酶水解dUTP活性 ,但融合蛋白的活性比dUTPase蛋白低 7～ 8倍 .同时研究了Mg2

干燥综合征特异性α-胞衬蛋白的抗原表位筛选及鉴定

目的:筛选和鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的抗原表位.方法:采用蛋白质计算机分析软件预测α-胞衬蛋白的抗原决定簇,设计8条重叠蛋白片段序列,应用GST融合表达系统原核表达该系列融合蛋白.通过Western blot实验检测融合蛋白片段的抗原性,并对抗原性片段以外的序列片段进行融合表达和检测,最终确定抗体所识别的部位.结果:8条重叠融合蛋白片段均有抗原性,最小片段以外序列的表达片段检测不具有抗原性.结论:α-胞衬蛋白的第1～59位氨基酸是其抗原表位区域,为进一步研究α-胞衬蛋白在干燥综合征中的作用机制和应用奠定了基础.

剧烈运动引起肾功能异常变化的初步研究

目的 了解剧烈运动对肾功能影响。方法 用尿沉渣流式细胞仪 (UF 10 0 )、放射免疫等方法 ,测定45名健康男女学生剧烈运动前后尿红细胞 (RBC)、白细胞 (WBC)、管型 (Cast)、上皮细胞 (EC)、结晶 (X’TAL)、病理管型 (P .Cast)、小圆上皮细胞 (SRC)、总蛋白 (PRO)、白蛋白 (Alb)、α1 微球蛋白 (α1 MG)、β2 微球蛋白 (β2 MG)、视黄醇结合蛋白 (RBP)、N 乙酰 β D氨基葡萄糖苷酶 (NAG)及电导率等指标 ,以评价剧烈运动前后肾功能变化情况。结果 剧烈运动前后及休息后男生尿RBC、WBC、Cast、EC差异有显著性 (P <0 .0 1) ;女生剧烈运动后尿Cast差异有显著性 (P <0 .0 1) ;男女生尿X’TAL、P .Cast、PRO、SRC、Alb、α1 MG、β2 MG、RBP及NAG剧烈运动后显著增加 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,而电导率运动前后无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 剧烈运动会导致肾功能异常变化。

神经生长抑制因子相互作用蛋白的分子克隆、鉴定及其生物学特性

为了探讨神经生长抑制因子 (Neuronalgrowthinhibitoryfactor,GIF)与Alzheimer’s病 (Alzheimer’sdisease,AD)的关系 ,将GIF的cDNA全基因克隆到载体pHyblex中 ,运用酵母双杂交系统从Alzheimer’s病人脑cDNA文库中筛选出与GIF相互作用蛋白的cDNA克隆。免疫共沉淀和蛋白质印迹实验进一步验证了该蛋白在体内与GIF相互作用的特异性。克隆并鉴定了其中 1个与GIF特异性结合的蛋白 ,与人细胞核dUTP焦磷酸酶 (DUT)同源。进一步构建了重组表达质粒pGEX 4T 1 DUT ,转化大肠杆菌BL2 1,经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析、凝血酶酶切和SephacrylS10 0纯化 ,得到纯度 95 %以上的dUTPase蛋白。体外生物学活性检测表明 ,表达的dUTPase蛋白可以与GIF共同作用嗜铬细胞瘤株 (pheochromocytoma)PC12 ,对细胞的生长产生抑制作用。

二氧化氯对肉制品保鲜的研究

二氧化氯是一种有效的食品保鲜剂 ,目前在水处理、食品加工、保鲜等方面已得到广泛应用。试验研究了不同浓度二氧化氯对酱鸭的保鲜效果及其对酱鸭品质的影响。结果表明 ,酱鸭经浓度为 10 0～ 2 0 0mg/kg的二氧化氯溶液处理 2min后 ,常温下贮存 2 6～ 3 0d仍可保持较好的品质。

人内质网分子伴侣BiP的克隆、表达及其在RA患者血清抗体检测中的作用

以类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者滑膜组织文库cDNA为模板，用PCR方法扩增得到1965bp人内质网分子伴侣BiP的全长cDNA，将其克隆入OmiesLink^TM表达载体pReceiver—B01a，构建重组表达质粒pReceiver—B01a—BiP。重组表达质粒导人大肠杆菌BL-21（DE3）菌株中诱导表达目的蛋白，表达产物以Ni^＋-NTA agarose层析柱纯化。SDS-PAGE和免疫印迹法（Western blot）分析发现，表达产物以可溶性蛋白和包涵体形式共同存在，表达量约占菌体蛋白总量的20％～30％。相对分子质量约为80000，纯度达到电泳级。经免疫印迹法鉴定，获得的BiP重组蛋白可以与RA患者血清反应，检测的抗BiP抗体在RA患者血清中的阳性率为75．4％（49／65），明显高于系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）患者14．6％（7／48）、原发性干燥综合征（primary Sjoegren’s syndrome，pSS）患者7．3％（4／55）及正常人0％（0／71）（P〈0．01）。表明，经原核表达获得的BiP全长蛋白，RA患者血清抗体可以很好结合，有望应用于临床血清学诊断。

重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义

目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究。方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose4B亲和层析及Sephacryl-S100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定。最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体。结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致。用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体。原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63·75%(51/80),明显高于正常人的21·67%(8/37)(P<0·01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者。其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33·33%(13/39)、25·71%(9/35)及33·33%(4/12)。结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义。

dUTP焦磷酸酶研究进展

dUTPase通过催化水解dUTP,降低尿嘧啶在DNA中的错误掺入,调节dUTP/dTTP的正常比例,保证了DNA复制的正确性和顺利进行。绝大多数dUTPase结构相似,活性中心由不同的亚基共同参与。dUTPase的活性已确定存在于真核及原核的多种组织中,其在细胞内的表达依赖细胞周期或细胞发育的调控。许多病毒也编码dUTPase,且与病毒的感染力有关。研究显示该酶的表达对由胸苷酸合成酶(TS)抑制剂产生的细胞毒性具有关键的拮抗作用,为dUTPase拮抗剂在癌症化疗和逆转录病毒治疗中的开发应用奠定了理论基础。

α-胞衬蛋白抗原多肽的筛选及其在干燥综合征临床诊断中的意义

目的:筛选鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白抗原多肽,进一步研究该抗原多肽在干燥综合征(SS)疾病临床诊断中的意义。方法:采用固相法合成α-胞衬蛋白第1～59位氨基酸区域的5条多肽,利用酶联免疫吸附法(ELISA)比较合成多肽与干燥综合征患者血清IgG的反应强弱,确定最佳α-胞衬蛋白抗原多肽;以筛选出的最佳α-胞衬蛋白抗原多肽作为包被抗原,检测原发性SS患者135例,继发性SS患者25例,系统性红斑狼疮(SLE)患者48例,类风湿关节炎(RA)患者88例和正常人83例血清中的抗α-胞衬蛋白抗原多肽IgG抗体。结果:合成的5条多肽中有一条(F5)与SS血清IgG反应最强,抗F5多肽抗体(α-F5-PA)在原发性SS患者中的阳性率(78.5%)明显高于SLE(10.4%)、RA(21.6%)患者及正常人(6%)(P<0.01)。抗F5多肽抗体在原发性SS诊断中的敏感性为78.5%,特异性为86.8%,而且该抗体的检测对于SSA抗体、SSB抗体或ANA阴性的原发性SS患者的诊断具有补充作用。结论:F5多肽作为最佳α-胞衬蛋白抗原多肽。

肩关节镜下双排锚钉缝合治疗肩袖损伤的护理

肩袖损伤是骨外科最常见的肌腱损伤之一,是导致肩关节疼痛,活动度降低的常见原因[1],随着关节镜技术的发展,越来越多的外科医生采用关节镜下肩袖锚钉缝合固定术[2-3],而双排锚钉固定由于更符合人体肩部解剖结构被大多数学者所接受[4],本科自2012年3月—2013年6月运用双排锚钉固定治疗肩袖损伤20例,术后经过精心的治疗和护理,均获得满意疗效,现将护理体会报道如下。

不同的防腐剂对尿沉渣检测结果影响初探

目的通过不同防腐剂对尿沉渣检测结果的影响分析,找出一种较理想的防腐剂。方法用UF-100尿沉渣流式细胞仪在不同时间段同时检测含有不同防腐剂尿沉渣,计算出各组尿红细胞、白细胞、管型、细菌及上皮细胞均值,作各时间段尿沉渣有形成分变化曲线图,并与对照组进行比较。结果戊二醛(C5H8O2)与叠氮钠(NaN3)混合防腐剂对尿红细胞、管型、细菌和上皮细胞有较好的防腐稳定作用,与对照组相比红细胞、管型、细菌和上皮细胞数有8h、24h有显著性差异(P<0.05或P<0.01),而NaN3对尿白细胞检测有较好的防腐作用。结论C5H8O2与NaN3是较理想的尿沉渣分析防腐剂。

桃贮藏保鲜的影响因素及其研究进展

综述了桃果实采后生理特性、贮藏保鲜的影响因素,简要介绍了6种贮藏保鲜技术,并对桃贮藏保鲜领域的发展趋势作了展望。

肉类及其制品质地的仪器检测方法研究进展

目前,我国对肉类及其制品的质量检验主要包括理化指标和微生物指标两部分,而缺乏肉类及其制品的质地的仪器检测方法及相应标准。本文对肉类及其制品质地的仪器检测方法进行汇总分析,从而为肉类及制品的质地研究提供基础。

金属硫蛋白-3对dUTPase调节dUTP细胞毒性作用的影响

金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,是一种脑特异性金属硫蛋白。人细胞核dUTP焦磷酸酶(dUTPpyrophosphatase,dUTPase)是最近在脑中研究发现的能与人金属硫蛋白 3(humanmetallothionein 3,hMT 3)相互作用的一个蛋白 ,两者共同作用具有神经元生长抑制活性。为了探讨hMT 3对dUTPase调节dUTP引起的细胞毒性作用的影响 ,通过基因转染HEK2 93细胞观察细胞在dUTP中的生长情况 ,发现共转染hMT 3和dUTPase基因的细胞比单转染dUTPase或hMT 3基因的细胞具有更强的对dUTP细胞毒性的耐受能力 ;同时在大肠杆菌BL2 1中表达重组蛋白 ,测定hMT 3在dUTPase水解dUTP中的作用 ,结果显示重组蛋白hMT 3可以促进dUTPase对dUTP的水解。结果均初步证实了hMT 3对dUTPase抵抗dUTP引起的正常细胞死亡有一定的协同作用 ,为进一步研究dUTPase及其相互作用蛋白hMT 3在化疗中的应用提供理论依据。