莱克多巴胺的化学发光免疫测定法试剂盒的研究

本研究通过制备莱克多巴胺（Ractopamine,RAC）高活性单克隆抗体,用辣根过氧化物酶（HRP）标记RAC,以鲁米诺（luminol）为发光底物,建立直接竞争法检测莱克多巴胺。并对包被液、包被条件、包被蛋白浓度、封闭蛋白种类、孵育时间和酶用量等参数进行优化,成功研制出了化学发光检测RAC的试剂盒。该方法的线性检测范围可达到0.1ng/mL—10ng/mL;线性相关系数r=0.998,IC50值为0.6763ng/mL;理论检测限小于0.1ng/mL。批内变异系数为7.62%～8.65%;批间变异系数为8.15%;回收率在85%±15%之间,与克伦特罗等其它β-受体激动剂不发生交叉反应。

莱克多巴胺CLIA分析试剂盒的研制

通过制备莱克多巴胺-牛血清白蛋白偶联物（Ractopamine-BSA, RAC-BSA）人工抗原，制备并获得高活性单克隆抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记RAC抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析莱克多巴胺，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测RAC试剂盒。该方法的线性检测范围可达0.1～10.0 ng/mL，线性相关系数r=0.998，IC50值为0.763 ng/mL；理论检测限小于0.1 ng/mL；批内变异系数7.62%~8.65%；批间变异系数8.15%；回收率在85%±15%，与常见的克伦特罗等其他β-激动剂不发生交叉反应。

克伦特罗的CLIA分析试剂盒的研制

通过制备克伦特罗（Clenbuterol，CL）人工抗原获得高活性抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记CL抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析盐酸克伦特罗，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测CL试剂盒。该方法的线性检测范围0.1~8.1 ng·mL-1，线性相关系数r=0.996，IC50值为0.607 ng·mL-1；理论检测限小于0.1 ng·mL-1；批内变异系数6.76%~8.31%；批间变异系数7.4%；回收率（90±15）%，与莱克多巴胺等其他β-激动剂不发生交叉反应。

沙丁胺醇化学发光免疫检测试剂盒的研制

该研究建立了直接竞争化学发光免疫法检猪尿中沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）的方法 。并优化了包被抗体浓度、酶标抗原浓度和加样操作模式。优化后的CLIA检测试剂盒,检测范围为0.3~24.3 ng/m L,IC50为0.615ng/m L,理论检测限小于0.1ng/m L。猪尿检测的平均回收率为87±15%,批内相对对标准偏差均小于10%。这些参数表明CLIA检测试剂盒可用于猪尿中沙丁胺醇的检测。