大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经分布——CB-HRP、CB-胶体金结合CGRP免疫组织化学双标法研究

目的通过研究Ｏｎｕｆ核靶肌肉的神经分布特点，探讨在某些运动神经元疾病中，Ｏｎｕｆ核及其靶肌肉功能不受影响的生理机制。方法应用ＣＢ－ＨＲＰ逆行示踪技术及ＣＢ－胶体金逆行示踪结合ＣＧＲＰ免疫组织化学双标技术，观察了支配大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经元在脊髓内的定位分布。结果首次发现该肌的神经分布方式与会阴肌的神经分布相同，即同时接受脊髓前角躯体运动神经元和Ｏｎｕｆ核神经元的双重支配。其中有６３．４０％位于Ｌ６～Ｓ３前角的腹侧群，２２．３０％位于Ｏｎｕｆ核的背外侧群，１４．３０％位于Ｏｎｕｆ核的背内侧群。各核群内支配该肌的神经元约５０％为ＣＧＲＰ阳性神经元。另外，支配该肌的上述两种运动神经元在Ｌ６～Ｓ３节段软脊膜处特定部位形成丰富的软脊膜下树突丛。结论实验证实了骶尾腹内侧肌不但是Ｏｎｕｆ核最大的靶肌肉，而且支配该肌的运动神经元具有丰富的软脊膜下树突丛。

动物后海穴抗原免疫后c-fos基因在中枢神经系统的表达

经大、小鼠后海穴注射抗原后，应用免疫组织化学方法观察中枢神经系统内ｃ－ｆｏｓ基因在不同时程的表达情况。结果发现与穴位神经分布相关的脊髓节段及下丘脑的一些核团和区域的ｃ－ｆｏｓ表达高峰在２ｄ和４ｄ，其Ｆｏｓ免疫反应阳性（Ｆｏｓｌｉｋｅｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，Ｆｏｓ－ＬＩ）神经元的数目及分布区域随时间的变化而不同。骶髓的Ｆｏｓ－ＬＩ神经元在２ｄ组分布于Ⅱ→Ⅳ板层，４ｄ组分布到Ⅳ→Ⅶ和Ⅹ板层；下丘脑的视前内侧区、结节区、下丘脑前核群、下丘脑腹内侧核和背内侧核等处的Ｆｏｓ－ＬＩ神经元数目在２ｄ组和４ｄ组分布有所不同。据实验结果推导：穴位免疫注射后，免疫信息经免疫体液因子在激活下丘脑神经内分泌免疫系统的同时；也激活与穴位相关的脊髓节段神经元的活动，经神经通路直接将周围的免疫信息传导到高位中枢，多途径、双重效应地激活免疫－神经内分泌网络，从而起到增强免疫效果的终效应。

多巴胺耗竭对纹状体神经元在缺血再灌注损伤中的保护作用

为探讨全脑缺血再灌注损伤过程中多巴胺对纹状体内各类神经元的影响 ,本实验用 6 -OHDA损毁大鼠一侧黑质多巴胺能神经元以耗竭该侧纹状体内的多巴胺 ,再进行 4血管结扎造成全脑缺血模型 ,3 0 min后分别复灌 6、12、2 4h,行连续冰冻切片 ,以焦油紫染色进行形态学分析 ,用 calbindin-D2 8k及 parvalbum in两种钙结合蛋白抗体进行免疫组化反应。结果显示 :(1)焦油紫染色 :缺血 3 0 min复灌 6 h即可见多巴胺未耗竭侧纹状体内神经元损伤比耗竭侧者明显加重 ,复灌 12及 2 4h组双侧差别更为显著 ;图像分析测定单位面积内焦油紫染色细胞面积总和 ,各实验组两侧间均有显著性或极显著性差异 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;(2 ) calbindin-D2 8k免疫组织化学染色 :各组内多巴胺未耗竭侧纹状体 calbindin-D2 8k阳性反应明显比耗竭侧减弱 ,阳性神经元数量减少、染色变浅 ,图象分析显示其光密度明显低于耗竭侧 ;(3 ) parvalbumin免疫组化反应 :同时间组双侧纹状体 parval-bumin阳性神经元的形态和数量无明显差别 (P>0 .0 5 ) ,但随复灌时间的延长 ,双侧阳性细胞数均有降低。以上结果提示 :脑缺血时大量释放的 DA是纹状体神经元缺血性损伤的重要因素之一 ;纹状体内的 calbindin-D2 8k投射神经元对脑缺血及 DA含量的变化敏感 ,?

小鼠穴位与常规途径免疫注射后抗人IgG抗体滴度测定

小鼠穴位与常规途径免疫注射后抗人ＩｇＧ抗体滴度测定１）陈幽婷（徐州医学院２２１００２）林嘉友高扬童江万选才（中国医学科学院基础医学研究所）近年来我国兽医界经过临床应用和实验室研究，发现直接将免疫制剂注射入动物体的某些穴位用于免疫预防或免疫治疗，可节约...

睾丸静脉主干结扎治疗复发性精索静脉曲张的应用解剖

目的:为经腰背部直切口结扎睾丸静脉主干治疗复发性精索静脉曲张提供解剖学基础.方法:以左肾下极为0点平面,测量59具正常成年男尸左输尿管(U)、左睾丸静脉(V)和左睾丸动脉(A)之间的水平距离以及相交高度,统计分析其相互位置关系.结果:①U-V在0点平面的水平距离为0～38 mm,有94.9%在20 mm内;②U-V相交点距0点平面的垂直距离为-37～65 mm,有74.6%在0点平面上、下20 mm内相交;③在0点平面,69.5%的A-V已相伴行,未伴行者的83.3%相距在20 mm内.结论:根据数据分析提示:手术中先找到左肾下极和左输尿管;在肾下极平面,绝大多数的睾丸静脉可在输尿管两侧20 mm的范围内找到;虽大多数的动静脉在此高度已经伴行,但仍要注意区别未与静脉相伴而独立下行的睾丸动脉.

大鼠后海穴神经分布的中枢定位

大鼠后海穴神经分布的中枢定位＊陈幽婷（徐州医学院解剖学教研室，江苏２２１００２）童江万选才（中国医学科学院基础医学研究所）近年来，随着祖国传统医学—针灸与现代医学免疫学的互相渗透，医学工作者不断发现在人和动物某些穴位与机体的免疫活动之间有极为密切的关...

左睾丸静脉腰段的形态特征

目的 探讨左精索静脉曲张的发病与左睾丸静脉腰段形态结构的关系 ,并为临床相关手术应用提供解剖学基础资料。方法 采集 5 8例正常成年男尸左睾丸静脉腰段标本 ,测量血管外径和静脉瓣膜位置 ,统计瓣膜出现率 ;取近末端开口处静脉做石蜡切片 ,分别行苏木精 -伊红、VanGieson和Azeun染色 ,镜检、拍照。结果 左睾丸静脉外径 (4 .8± 1.4)mm(2 .0～ 8.5mm) ,其中 4.0～ 6 .0mm者占 6 4% ;静脉瓣膜出现率为 5 3.5 % ,其中末端开口瓣膜出现率 31.0 % ;统计学分析表明 ,左睾丸静脉管径与瓣膜出现率以及末端开口瓣膜出现率之间不存在相关关系。另外 ,在末端开口瓣膜缺如的静脉管口处 ,可见有环行唇状增厚并突向管腔 ,使管口直径明显小于静脉管径。组织学切片检查发现 ,环行唇状增厚部分主要是由平滑肌束和结缔组织混合形成。结论 本组结果证明左睾丸静脉瓣膜出现率和末端开口瓣膜出现率与静脉管径之间不存在相关关系 ,推测左精索静脉曲张的发病机制和发病率可能与左睾丸静脉的粗细没有直接关系 ,但当末端开口瓣膜缺如时静脉管口存在的环行唇状突起是否具有临床意义尚待进一步研究。

输尿管腹段结石易发部位与相邻血管的关系

在28具尸体上,对与输尿管腹段紧密相交的动脉进行了观测,测量了相交点与腰椎的对应高度,对该段结石的易停留部位,提出形态学推断.认为该段结石的滞留,在左侧与左睾丸(卵巢)动脉、肠系膜下动脉主干或其分支的压迫有关,在右侧则与右睾丸(卵巢)动脉、肠系膜上动脉末段或其分支的压迫有关.

胃缺血/再灌注损伤引起大鼠脑室旁核及孤束核c-fos表达

目的 :观察电和化学刺激下丘脑室旁核 (PVN)对大鼠胃缺血 /再灌注损伤 (GI/RI)的影响及孤束核 (NTS)在其中的作用和GI RI后PVN、NTS内c fos表达的情况。方法 :夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 1h制备GI/RI模型 ,应用Fos免疫组织化学法 (ABC法 )观察GI RI后中枢神经系统内c fos表达的情况。结果 :①电和化学刺激PVN后 ,GI/RI减轻。②损毁双侧NTS后 ,能取消电刺激PVN对GI RI的影响。③GI RI能引起PVN、NTS等核团内c fos表达增加。结论 :GI RI的伤害性刺激影响了PVN、NTS的功能。PVN、NTS参与了对GI RI的调控。

c-Fos和FosB/△FosB蛋白在精神分裂症模型小鼠脑内表达的差异

为了观察MK-801引发的精神分裂症模型小鼠脑内c-Fos和FosB/△FosB表达的差异,本实验选用雄性昆明小鼠,随机分为溶剂对照组、MK-801组(建立精神分裂症动物模型),采用免疫组化的方法检测模型动物脑内c-Fos和FosB/△FosB的表达,同时用免疫荧光双标对c-Fos和FosB/△FosB阳性的细胞进行定性分析。结果显示:精神分裂症动物模型组c-Fos蛋白的表达明显较FosB/△FosB广泛,几乎遍布全脑,而FosB/△FosB主要集中于前脑;在丘脑中线核群、板内核群、前核群和腹侧核群及脑桥核主要为c-Fos的表达,FosB/△FosB表达极少;在伏隔核、嗅结节、尾壳核、齿状回等核团主要为FosB/△FosB的表达,c-Fos表达极少。上述结果表明,c-Fos和FosB/△FosB的表达虽有重叠之处,但显示出明显的区域和强度的差异,且FosB/△FosB高度表达的区域与已知的精神分裂症相关脑区吻合,因此FosB/△FosB可能更适用于精神分裂症发病机制的研究。

金刚烷胺诱发小鼠行为学变化和前脑内FosB/δFosB蛋白的表达(英文)

目的:探讨临床使用金刚烷胺(amantadine)治疗流行感冒或帕金森病(PD)时导致患者出现精神症状副作用的中枢机制,给予小鼠不同剂量金刚烷胺,评价其行为学的改变,同时检测小鼠脑内FosB/δFosB蛋白的表达。方法:雄性昆明小鼠,随机分为生理盐水组、金刚烷胺组(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg),分别用自主活动观察、Sams-Dodd的刻板行为评分标准、一次性被动回避反应(OPAR)等模式对模型小鼠的行为改变进行检测,同时用免疫组织化学法检测各组小鼠脑内FosB/δFosB蛋白的表达。结果:(1)高浓度的金刚烷胺(60mg/kg)作用于小鼠,小鼠的自主活动较对照组有不同程度的提高,并且出现明显的刻板行为及社会行为的降低。中(40mg/kg)、低(20mg/kg)浓度的金刚烷胺作用于小鼠,小鼠的自主活动较对照组无明显差异;(2)金刚烷胺以剂量相关性方式改变FosB/δFosB蛋白的表达,其表达区域主要集中在前额皮质、扣带皮质、梨状皮质、齿状回、隔区、伏隔核、杏仁核和嗅结节等脑区。结论:(1)大剂量的金刚烷胺能够引起小鼠的行为变化。(2)FosB/δFosB阳性细胞高表达的区域主要集中在前脑内与情绪活动和内脏活动功能密切相关的脑区,这些区域脑神经元的功能变化可能是临床使用金刚烷胺导致患者出现精神症状副作用的原因之一。

杏仁核去5-HT支配小鼠抑郁样行为学变化与血清ACTH和TSH浓度的关系

目的观察小鼠双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后，在不同时程内所出现的抑郁样行为以及血清促肾上腺皮质激素（ACTH）和促甲状腺激素（TSH）浓度的变化，探讨杏仁核内的5-HT对下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴和下丘脑-垂体-甲状腺（HPT）轴的调节以及与抑郁症的关系。方法双侧杏仁核定位注射5-HT能神经元的特异性损毁剂5，7-双羟色胺（5，7-DHT，DHT组）或生理盐水加维生素C（Vc，溶剂组），在不同时间点（术后1h、14天、21天）采血，用酶联免疫吸附法检测血清TSH和ACTH浓度。采用强迫游泳实验和悬尾实验检测小鼠抑郁样行为表现。结果与溶剂组相比，14天DHT组小鼠强迫游泳实验不动时间明显延长（P〈0．05），但21天时未见差异；14天DHT组和21天DHT组小鼠悬尾实验不动时间均明显延长（P〈0．05），21天显示差异具有极显著性（P〈0．01）；14天DHT组血清ACTH浓度显著降低（P〈0．01），至21天时较14天升高（P〈0．05），但未达到正常水平（P〈0．05）；14天DHT组血清TSH浓度显著降低（P〈0．05），至21天恢复到正常水平。结论杏仁核内5-HT浓度降低会引起小鼠抑郁样行为，并可能经HPA和HPT轴影响ACTH和TSH的分泌。经过代偿，部分激素水平可恢复，但抑郁症状并未完全消失。

大鼠缰内侧核神经元缺少MAP2和KCC2的表达

为了观察神经元结构蛋白微管相关蛋白2(MAP2)和钾离子-氯离子共转运体2(KCC2)在缰内侧核神经元内的表达,本实验采用2组成年SD大鼠,一组作常规灌注固定,冰冻切片,KCC2和MAP2的免疫荧光组织化学染色;另一组断头取脑,分别取缰内侧核和缰外侧核,用Western blotting法检测KCC2和MAP2的表达。结果显示:KCC2和MAP2在缰内侧核内的表达非常弱,但在缰外侧核有丰富表达。以上结果表明,缰内侧核神经元缺少神经元结构蛋白MAP2和KCC2的表达。

不同时辰电针大鼠足三里穴对血浆cAMP和cGMP含量的影响

中医历来认为人和自然是统一的整体，“人以天地之气生，四时之法成”(《黄帝内经素问，宝命全形论》)，对自然界的变化，“人亦应之”。历代医家继承发扬了“因时制宜”的原则，创造出独具特色的“子午流注”针法，它强调不同时辰脏腑气血盛衰状况不同，

小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后的抑郁样行为学变化及杏仁核内FosB／△FosB的异常表达

目的探讨双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后小鼠的行为学变化，投射到杏仁核的5-HT能神经纤维的精确来源以及杏仁核神经元的异常功能活动，为验证杏仁核-中缝核群5-HT在抑郁症发病机制中的联系提供实验资料。方法雄性昆明小鼠32只，随机分为对照组和实验组，每组各16只，应用脑立体定位注射技术向双侧杏仁核注射5，7-双羟色胺（5，7-DHT，5μg／侧），悬尾实验和强迫游泳实验检测抑郁行为；脑石蜡切片H—E染色检测5-HT能投射神经元的位置；脑冰冻切片免疫组织化学染色检测杏仁核FosB／AFosB的表达。结果①行为学检测：实验组小鼠强迫游泳无动时间和悬尾无动时间较对照组显著减少（P〈0．01）；②H—E染色：实验组小鼠中缝背核尾侧份与中缝正中核嘴侧份的部分神经元胞体皱缩变形，胞质呈深紫伊红色染色，尼氏小体溶解或消失，胞核缩小或消失；③免疫组织化学染色：FosB／△FosB阳性神经元在实验组小鼠杏仁核明显增多，与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论杏仁核的5-HT能纤维投射主要来自中缝背核的尾侧和中缝正中核的嘴侧；单独的杏仁核去5-HT支配即可引发小鼠产生抑郁样行为；杏仁核内的即早基因FosB／△FosB在抑郁样行为形成的相关精神病理学机制中占有重要地位。

成年大鼠小脑Purkinje神经元不表达神经元特异性的钾离子氯离子共转运体2

目的:观察神经元特异性标记物钾离子氯离子共转运体2(KCC2)在成年大鼠小脑皮质的表达。方法:成年SD大鼠,4%多聚甲醛灌注固定,取脑,冷冻切片,KCC2和小脑Purkinje神经元标记物Calbindin-D28K在小脑的免疫荧光双标,激光共聚焦显微镜观察。结果:KCC2在颗粒细胞层神经元有丰富的表达,但在Purkinje神经元表达很弱。结论:神经特异性的KCC2可能不是成年大鼠的Purkinje神经元的离子型γ-氨基丁酸受体发挥抑制性作用的主要因素。

低剂量MK-801对小鼠焦虑、抑郁及学习记忆的影响

目的观察非竞争性NMDA受体拮抗剂地艹卓西平马来酸盐(MK-801)在低剂量时对小鼠焦虑、抑郁以及学习记忆能力的影响。方法将昆明小鼠随机分成对照组和MK-801组,采用高架十字迷宫、强迫游泳实验、悬尾实验、开场实验以及Morris水迷宫等方法,检测药物对小鼠行为的影响。结果与对照组相比,MK-801组抑郁模型中的不动时间减少(P<0.01);焦虑模型中在入开臂次数及停留时间的百分比增加(P<0.01),入臂总次数与总时间也增加;开场实验中运动能力增加(P<0.01);Morris水迷宫中小鼠学习记忆能力下降(P<0.01)。结论低剂量MK-801并未对小鼠产生抗焦虑以及抗抑郁的效果,但可降低学习记忆能力。

腰椎棘突间区的解剖学参数及临床意义

目的:为腰椎棘突间内固定器械的设计和临床应用提供解剖学依据。方法:测量52具成人完整福尔马林固定标本T12-S1段脊柱的棘突间距、棘突顶距、棘突长度、相邻棘突上下缘及中央厚度。测量数据用SPss115软件行方差和相关性分析。结果:各组数据满足正态性、方差齐性。棘突间距从上到下逐渐减小,L1～2为7.61mm(女,7.75),L5～S1为4.03mm(女,6.49)。棘突顶距、棘突长度中段较大,上段和下段较小。棘突顶距,T12～L1为54.63mm(女,54.63),至L2～3增大为60.18mm(女,53.64)又逐渐变小,至L4～5减小为45.07mm(女,49.40)。棘突长度,L3最大,25.45mm(女性L4最大18.71mm),L1和L5分别为21.63mm(女,17.08)和21.41mm(女,17.44)。相邻上一棘突下缘厚度普遍大于下一棘突上缘厚度。差值呈偏态分布,中位数为3.28,75%位数为5.13。棘突顶距与身长呈中低度正相关。相邻椎间隙指标呈中高度正相关。女性较男性棘突较短、薄、矮。结论:该研究为腰椎棘突间内固定器械的设计提供了解剖学依据。

MK-801诱发的小鼠精神分裂症样症状与脑内Parvalbumin异常表达的关系

目的 以中等剂量的MK-801腹腔注射制作小鼠精神分裂症样模型,检测小鼠脑内钙结合蛋白Parvalbumin（小白蛋白,PV）的异常表达部位,探讨与已知精神分裂症相关脑区的关系,为深入研究精神分裂症的发病机制提供形态学和神经化学依据.方法 雄性成年昆明小鼠,随机分为生理盐水组和MK-801组.用Sams-Dodd刻板行为评分和一次性被动回避反应（OPAR）检测小鼠的行为学改变;用免疫组织化学染色法检测各组小鼠脑内PV蛋白的表达情况.结果 ① MK-801组小鼠刻板行为评分明显增高（P＜0.01）,记忆能力显著下降（P＜0.01）,符合精神分裂症样模型小鼠的表现.②MK-801组小鼠在前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区PV蛋白的表达明显减少.结论 隶属边缘系统的前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区内的PV阳性神经元数量的减少可能与精神分裂症的病理生理学机制密切相关.