喹乙醇诱导HepG2细胞线粒体的氧化损伤

背景与目的:探讨喹乙醇(olaquindox)对人肝癌细胞(HepG2)线粒体的氧化损伤作用。材料与方法:用0、200、400和800μg/ml喹乙醇处理HepG2细胞24h后,采用噻唑蓝(MTT)法确定喹乙醇对HepG2细胞的IC50;分子探针2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFDA)和双氢溴乙啶(dihydroethidium,DHE)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;罗丹明123检测线粒体膜电位(△Ψm)变化;钙离子荧光探针Fluo-3AM检测胞浆游离钙离子浓度并用定量PCR方法检测线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)的损伤情况。结果:随着喹乙醇浓度的增加,HepG2细胞的存活率逐渐降低(P均<0.01),呈时间-剂量-反应关系;不同浓度的喹乙醇作用细胞24h后,随着喹乙醇浓度的增加细胞内ROS和胞浆游离钙离子浓度显著增加(P<0.05或P<0.01),△Ψm明显降低且呈剂量-反应关系;喹乙醇能引起HepG2细胞mtDNA和nDNA损伤(P均<0.01),且mtDNA损伤程度显著高于nDNA,并呈剂量-反应关系。结论:喹乙醇在体外实验中,可诱导HepG2细胞线粒体氧化性损伤。

呋喃唑酮对Hep G2肝癌细胞增殖和细胞周期的影响论著

背景与目的：探讨呋喃唑酮（furazolidoze，FZD）对体外培养的人肝癌细胞（HepG2）的毒性机制。材料与方法：分别以不同浓度FZD（0．00、0．78、1．56、3．12、6．25、12．50、25．00、50．00μg／m1）作用HepG2细胞24h，采用噻唑蓝（MTT）比色法测定FZD对细胞增殖的影响；流式细胞术（FCM）检测细胞周期的分布；RT-PCR半定量检测S期关卡相关基因的变化。结果：随着FZD浓度的增加，HepG2细胞的存活率逐渐降低，当浓度超过6．25μg／ml时，细胞存活率下降显著（P〈0．05）；细胞生长曲线显示各染毒浓度组细胞生长速度明显减慢；细胞周期动力学显示FZD在0～3．12μg／ml范围内s期细胞比例明显增加，G-期细胞比例下降；RT-PCR结果显示FZD作用后p2J呈高表达，cyclinE,cyclinA和Cdk2表达量则不同程度下调。结论：FZD对体外培养的HepG2细胞有一定的细胞毒性且诱导s期阻滞，其增殖抑制作用可能是通过激活s期损伤关卡实现的。