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题名在大肠杆菌中拓展合成途径合成异胡椒醇
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作者
马文晓
陈弼致
孟春
王航
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期1243-1253,共11页
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基金
福建省自然科学基金(2022J01094)。
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文摘
天然异胡椒醇作为一种植物来源香料,具有很高的经济价值。目前国内外还未见利用大肠杆菌工程菌株转化生产异胡椒醇的报道。【目的】构建工程菌,采用生物合成方法获得天然香料异胡椒醇。【方法】对来自胡椒薄荷的细胞色素P450家族的柠檬烯-3-羟化酶(LIM3H)基因PM2进行改造,截短LIM3H的N端疏水区,分别添加17α短肽或2B1短肽增加其亲水性,采用CO差示光谱法检测LIM3H活性;将N端疏水区截短后的来自拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NADPH-细胞色素P450还原酶基因(trATR)和修饰后LIM3H基因(Modi-LIM3H)融合后表达,最终以柠檬烯为底物进行全细胞转化。【结果】3种N端修饰LIM3H基因均检测到LIM3H表达和异胡椒醇生成,其中17α短肽修饰后的蛋白表达量最高,异胡椒醇产量达到1.94 mg/L。【结论】本研究在大肠杆菌中增加外源LIM3H与ATR,成功催化柠檬烯生成异胡椒醇,为天然异胡椒醇的生产提供了新的方法。
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关键词
柠檬烯-3-羟化酶
大肠杆菌
N端修饰
异胡椒醇
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Keywords
limonene-3-hydroxylase
Escherichia coli
N-terminal modification
isopiperitenol
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
TQ923
[轻工技术与工程—发酵工程]
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