不同生药量忍冬茎水提物对茶藨子叶状层菌发酵菌丝体生长和代谢产物的影响

研究不同生药量(5、15、30 g·L^(-1))忍冬(Lonicera japonica)茎水提物对茶藨子叶状层菌(Phylloporia ribis)发酵菌丝体生长和代谢产物的影响。结果表明:在实验范围内,不同生药量忍冬茎水提物可极显著和显著提高菌丝体中麦角甾醇(P<0.001)、总多糖(P<0.001)和半必需氨基酸(P<0.05)的含量;忍冬茎水提物对菌丝体生物量、绿原酸和腺苷的含量均无促进作用。

SPSS分析在远志商品规格等级标准研制中的应用

目的:以远志药材为对象,建立一种基于SPSS统计分析的中药材商品规格等级标准研制方法。方法:采用SPSS 17.0对药材市场中商品远志药材的外观性状数据作散点图、频率分布直方图,研究远志药材商品规格等级划分的指标选择与限度设定,进而修订现有84版远志药材商品规格等级标准,并采用单因素方差分析、多元方差分析、多元线性回归分析对上述所修订的商品规格等级标准指标与限度进行验证。结果:目前各个药材市场中商品远志药材的规格等级划分较混乱,各药材市场对远志筒药材等级划分的认知上存在一定分歧;"直径"和"抽心率"是划分远志筒不同等级的主要影响因素。结论:在中药材商品规格等级标准研制中,等级划分各指标的选择与限度的设定要切合药材市场流通现状并发挥良好地规范市场的作用。

不同物候期栽培远志药材中次级代谢物的动态变化规律分析

目的:阐明不同物候期栽培远志药材中次级代谢物的动态变化规律。方法:采用UPLC/Q-TOF MS代谢组学技术,对不同物候期(4月龄至16月龄,10批样本)栽培远志药材中的次级代谢物的含量进行分析。结果:10批栽培远志药材可分为Ⅰ(休眠期)、Ⅱ(花果期)、Ⅲ(休眠期)三个阶段,在推断指认出的31个次级代谢物中,6个蔗糖酯类物质(No.1～6)、14个低聚糖酯类物质(No.10～23)、8个皂苷类物质(No.24～31),在Ⅰ阶段时含量均较低;在Ⅱ阶段前期含量逐渐升高,后期则含量转低,但整体含量均高于Ⅰ阶段;在Ⅲ阶段时,蔗糖酯类物质的含量逐渐升高,而低聚糖酯类、皂苷类物质的含量则有降低趋势。3个■酮类物质(No.7～9)在Ⅰ阶段时含量较高,Ⅱ、Ⅲ阶段与Ⅰ阶段相比含量转低。结论:10批栽培远志药材中,四类次级代谢物的含量会随物候期的不同而呈动态变化,该结果不仅为研究整个物候期栽培远志药材中次级代谢物的动态变化规律奠定基础,并进而为深入研究远志药材中的某些活性成分提供明确的样品采集时间。

山西与内蒙产蒙古黄芪的ISSR体系优化及遗传多样性分析

本研究对影响蒙古黄芪ISSR反应体系的因素进行了优化,同时对蒙古黄芪的遗传多样性进行了分析。确立蒙古黄芪ISSR初始反应体系,采用单因素实验优化ISSR反应体系,确立了最终的ISSR体系。采用非加权平均距离法(UPGMA)对8批蒙古黄芪样品进行遗传多样性和聚类分析。此次实验获得的黄芪ISSR-PCR反应体系为:总体积20μL,包含10×PCR Buffer 2μL、dNTPs 0.5 mmol/L、Taq酶1.0 U、MgCl 23.5 mmol/L、引物0.25μmol/L、DNA 50 ng。14条引物共扩增出多态性位点118个,遗传一致度在0.4921~0.7302之间,遗传距离在0.3145~0.7091之间。由聚类分析可知8批蒙古黄芪以产地分为了3类,内蒙古兴和县,山西浑源官儿乡各聚为一类,其余山西不同产地聚为一类。本实验表明建立的蒙古黄芪ISSR体系稳定,而山西与内蒙2个产地的蒙古黄芪遗传多样性丰富,该结果为黄芪良种选育及种质保护奠定基础。

远志抗凝血作用的物质基础研究

目的:研究中药材远志发挥抗凝血作用的物质基础。方法:采用回流提取和溶剂萃取法得到远志不同极性部位,以阿司匹林溶液作为阳性对照,连续给药8 d,使用毛细管法测定小鼠凝血时间,筛选并比较远志抗凝血作用有效部位。采用HPLC和GC-MS分析对上述不同极性部位,观察其化学成分差异。结果:阿司匹林、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水提物均能延长小鼠的凝血时间。按抗凝血活性的强弱排列:正丁醇部位>乙酸乙酯部位>水提物。HPLC分析结果显示,正丁醇部位与乙酸乙酯部位在口山酮区与糖酯区的化学成分种类及含量明显丰富其他部位,且乙酸乙酯部位中保留时间为29.18 min的峰含量高于其他部位。结论:远志药材的正丁醇部位和乙酸乙酯部位的抗凝血活性优于传统水提物,其抗凝血作用的活性物质主要集中在口山酮区与糖酯区,而油酸、亚油酸起到一定的辅助作用。

胶膜菌属真菌S7糖类成分对铁皮石斛种子萌发的影响

目的研究胶膜菌属真菌S7(Tulasnella sp.)糖类成分对铁皮石斛种子萌发的影响。方法通过水提醇沉法制备S7菌丝多糖和发酵液多糖。三氟乙酸水解制备菌丝多糖和发酵液多糖的水解物。利用柱前衍生高效液相色谱法(PMP-HPLC)测定多糖的单糖组成。在水琼脂和1/2 MS培养基中分别添加菌丝多糖及其水解物,发酵液多糖及其水解物,以及菌丝多糖特有单糖组分和混合单糖组分,研究S7糖类成分对铁皮石斛种子萌发的影响。结果水琼脂培养基对照组(WACK1)萌发率(88.65±4.71)%,种子能萌发至3级(原球茎)。与WACK1相比,添加菌丝多糖及其水解物对萌发率没有显著影响(P>0.05),但种子能萌发至4级(1片叶);添加发酵液多糖水解物能显著降低萌发率(P<0.05)。菌丝多糖由葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖、甘露糖、岩藻糖、核糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为15.05∶1.00∶0.70∶0.35∶0.30∶0.29∶0.13∶0.13。发酵液多糖由阿拉伯糖、半乳糖、木糖和葡萄糖醛酸组成,摩尔比为1.22∶1.00∶0.71∶0.47。岩藻糖是菌丝多糖特有的单糖组分。1/2 MS培养基对照组(MSCK)萌发率和5级萌发率(2片叶)分别为(98.10±0.46)%和(50.97±4.33)%。与MSCK相比,添加0.20~20 mg·L-1岩藻糖对萌发率没有显著影响(P>0.05),但5级萌发率有显著提高(P<0.05),是MSCK的1.36~1.47倍。结论S7菌丝体多糖及其水解物具有促进铁皮石斛原球茎发育的作用,岩藻糖是S7菌丝多糖水解物中促进种子萌发后进一步分化发育的活性成分。

胶膜菌属真菌S7(Tulasnella sp.)促进铁皮石斛种子萌发代谢产物研究

胶膜菌属真菌S7(Tulasnella sp.)能与兰科植物铁皮石斛的种子共生萌发,其提取物也有促萌发活性.本文首先通过活性跟踪确认菌丝体提取物乙酸乙酯(ethyl acetate fraction of mycelium extract,MyE-E)馏分,发酵液提取物石油醚(petroleum ether fraction of fermentation broth extract,FBE-P)和乙酸乙酯(ethyl acetate fraction of fermentation broth extract,FBE-E)馏分是S7提取物的活性部位;进而通过柱层析、液相制备等技术从FBE-E馏分分离化合物并检测其活性.从FBE-E分离的12个化合物,经鉴定为:邻苯二甲酸二异丁酯(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、吲哚-3-甲醛(3)、香草酸(4)、异香草酸(5)、丁香酸(6)、反式阿魏酸(7)、3,5-二羟基苯甲酸(8)、3,4-二羟基苯甲酸(9)、吲哚-3-甲酸(10)、1,5,5-三甲基-6-乙酸基-环己烯-3-酮(11)和苯甲醇(12).在1/2MS培养基上,化合物4和12分别为1和100μmol/L时有加快种子萌发和促进原球茎发育的作用;化合物3和10为100μmol/L时有加快种子萌发的作用.本文研究首次明确了萌发菌S7促进铁皮石斛种子萌发的代谢产物.

菌根栽培对铁皮石斛小分子化学成分的影响

研究菌根栽培对铁皮石斛指纹图谱及6种化学成分含量的影响,为铁皮石斛菌根栽培技术的推广应用提供科学依据。收集浙江金华等4个地区菌根栽培和常规栽培的17个铁皮石斛样品,用HPLC指纹图谱评价样品的相似度,用HPLC测定6种化学成分的含量。研究结果显示:指纹图谱有15个共有峰,通过对照品指认了5个共有峰,分别是柚皮素、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄、3′,4-二羟基-3,5′-二甲氧基联苄(gigantol)和3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(DDB-2);菌根栽培和常规栽培样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度分别为0.733~0.936和0.834~0.942,菌根栽培对指纹图谱的影响与种植地区、栽培种质和菌剂用量等因素相关;样品中6种化学成分的含量差异较大,DDB-2的含量最高,质量分数为69.83~488.47μg·g^(-1);上海崇明和江苏泰州的菌根栽培样品有5~6种成分的含量提高,福建漳州和浙江金华的菌根栽培样品仅有1~2种成分的含量提高。以上结果表明,菌根栽培未改变铁皮石斛小分子化学成分的轮廓,对联苄等化学成分的含量有影响,具有较好的应用前景。

远志药材商品规格等级与品质的关联性研究进展

中药材的品质是保障其疗效和安全性的前提,现行的商品规格是对已有"辨状论质"传统经验的归纳与总结,但随着中药材野生品种的不断引种驯化及大范围人工种植,部分药材的栽培品在性状及品质上已发生了明显改变,造成这些药材在市场流通规格划分及品质鉴别等认识上产生了分歧。以远志Polygalae Radix为例,从其市场流通规格划分现状入手,结合现代品质评价研究,通过查阅文献资料,探讨品系/基原、产地/气候区划、生长年限/采收期及药用部位等对远志药材质量的影响,以期揭示远志药材性状与药材自身品质的相关性,为后续远志药材商品规格行业标准的制定提供理论依据,同时明确今后远志药材品质评价研究的方向。

黑果腺肋花楸果实化学特征及其应用进展

黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)是蔷薇科腺肋花楸属灌木,其果实在欧亚及北美国家食用历史悠久,并于2018年被国家卫生健康委员会公告作为新食品原料。国内尚缺乏对黑果腺肋花楸果实营养及活性成分较为系统的研究,严重阻碍了其针对性质控评价体系的建立以及特色产品的开发。因此,本研究对国内外黑果腺肋花楸果实化学成分及相关物质的药理活性进行综述,以期归纳、总结出该果实化学特征及其开发前景。通过综述,加深对黑果腺肋花楸果实特点的认识,建立以黑果腺肋花楸果实为原料的新产品、新应用的开发思路,充分发挥其新食品原料的优势,为黑果腺肋花楸果实相关产品的开发、产业的发展提供参考。

P450s介导远志皂苷等齐墩果烷型植物三萜生物合成的研究进展

植物三萜是一大类结构多样、具有广泛工业及药用价值的天然产物。齐墩果烷型三萜因拥有良好的药理/生物活性而被广泛熟知,其生物合成历经了前体供应、骨架合成、萜类合成等3个阶段。在齐墩果烷型三萜骨架糖基化之前,细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,P450s)会先行对该骨架进行许多结构修饰,而这些修饰对三萜骨架的结构多样性与功能性至关重要。本文综述了齐墩果烷型三萜皂苷生物合成中P450s对β-香树脂醇(β-amyrin)、齐墩果酸(oleanolic acid)的催化作用,探讨了远志皂苷的主要苷元母核--原远志皂苷元的可能生物合成途径,并简要概述了远志(Polygala tenuifolia)中CYP716A249的发现,为齐墩果烷型植物三萜的生物合成途径解析提供一些借鉴。

菌根真菌与兰科植物氮营养关系的研究进展

兰科植物是典型的菌根植物。兰菌根是兰科植物根与真菌形成的菌根共生体。兰菌根真菌的营养来源影响宿主植物的生活方式和营养水平。氮是植物生长的主要限制因子。兰科植物具有富集氮的特征,其组织和器官的氮含量通常高于同生境中的其他植物。该文综述了兰菌根真菌类别、兰科植物氮营养特征和兰菌根的氮转移机制等的研究进展,以期为兰科植物资源的保护、再生及可持续利用的相关研究提供参考和借鉴。

不同商品等级远志药材的HPLC指纹图谱分析

目的:对不同商品等级的远志药材进行HPLC指纹图谱分析。方法:收集河北安国、安徽亳州、广西玉林、四川荷花池4个药材市场中不同商品等级的47批远志药材,测定其直径及抽心率,构建上述药材的HPLC指纹图谱并进行相似度分析,建立不同等级远志药材的对照指纹图谱,流动相乙腈-0. 05%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长316 nm。结果:不同商品等级的远志药材,在化学成分的种类上相似,但在化学成分的含量上存在一定差异,远志筒统货与依据47批药材建立的对照指纹图谱的相似度介于0. 925~0. 996;远志小筒药材与对照指纹图谱相似度介于0. 840~0. 997;远志中筒药材与对照指纹图谱相似度介于0. 865~0. 996;远志大筒药材与对照指纹图谱相似度介于0. 931~0. 993。结论:传统判别药材质量优劣的“辨状论质”经验具有一定的科学依据,但后续应建立药材外观性状与其内在化学成分相关的商品等级标准,以确保同等级商品远志药材质量的一致性,进而提高其临床用药的准确性。

ISSR分子标记快速预测远志中sibiricose A5和sibiricose A6的含量

目的:优化远志简单重复序列区间(ISSR)扩增多态性反应体系,设计一对聚合酶链式反应(PCR)引物用于快速预测远志药材中sibiricoseA5和sibiricoseA6的含量高低。方法:采用UPLC测定远志药材中sibiricoseA5与sibiricoseA6的含量,通过单因素试验优化远志ISSR反应体系,利用ISSR分子标记技术筛选出与sibiricoseA5和sibiricoseA6含量相关的特异性DNA片段,针对此片段设计特异性PCR引物。结果:7批远志药材中sibiricoseA5和sibiricoseA6的含量差异较大,变化范围分别为0.8954~3.2276,0.6442—2.0578mg·g^-1。对筛选出的与sibiricoseA5和sibiricoseA6含量相关片段(890—8)进行克隆测序后,设计出了1对特异性引物(YZ—SA),可用于快速预测远志药材中sibiricoseA5和sibiricoseA6的含量高低。结论:优化后的远志ISSR反应体系具有标记位点清晰、检测多态性能力强等特点,设计出的特异性引物可用于快速预测远志药材中sibiricoseA5和sibiricoseA6的含量高低。