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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
张亮
王帅帅
+5 位作者
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期1300-1305,共6页
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体...
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。
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关键词
MARC-145细胞
外泌体
PRRSV粒子
速率区带离心
免疫磁珠
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职称材料
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测
被引量:
1
2
作者
繁萍
张瑞强
+3 位作者
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
《安徽农业科学》
CAS
2012年第16期8918-8921,共4页
[目的]初步预测牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构特点。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条OmpH...
[目的]初步预测牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构特点。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条OmpH基因相似性在84%~99%间;OmpH蛋白序列中存在信号肽,切割位点在第20号和21号氨基酸残基之间;OmpH蛋白二级结构预测中,折叠结构占49.8%,环状结构占50.2%;推测OmpH蛋白有7个O型糖基化位点,分别是位于第2、45、48、330、716、721、723号位的氨基酸残基,2个N型糖基化位点,即第15和35号位的氨基酸残基。[结论]该蛋白可能存在于细胞菌膜的外侧,而非跨膜蛋白。
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关键词
PmC47-8株
OmpH蛋白结构
预测
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职称材料
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测(英文)
3
作者
繁萍
张瑞强
+3 位作者
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
《Agricultural Science & Technology》
CAS
2012年第6期1186-1189,1206,共5页
[目的]对牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构进行初步预测。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条Omp...
[目的]对牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构进行初步预测。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条OmpH基因相似性在84%~99%间;OmpH蛋白序列中存在信号肽,切割位点在第20号和21号氨基酸残基之间;OmpH蛋白二级结构预测中,折叠结构占49.8%,环状结构占50.2%;推测OmpH蛋白有7个O型糖基化位点,分别是位于第2、45、48、330、716、721、723号位的氨基酸残基,2个N型糖基化位点,即第15和35号位的氨基酸残基。[结论]该研究为牦牛源OmpH基因的免疫研究奠定基础。
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关键词
PmC47-8
株
OmpH
蛋白结构
预测
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职称材料
多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性初步分析
4
作者
张瑞强
繁萍
+2 位作者
丰琳琅
张卫
陈忍霞
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第5期114-116,共3页
为了研究多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性,试验以GenBank中登录的27条多杀性巴氏杆菌功能基因的CDS序列为材料,利用CodonW软件初步分析了多杀性巴氏杆菌密码子的偏好性。结果表明:UUU、UUA、CUU、AUU、GUU、GUA、UCU、UCA、AGU、AGC...
为了研究多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性,试验以GenBank中登录的27条多杀性巴氏杆菌功能基因的CDS序列为材料,利用CodonW软件初步分析了多杀性巴氏杆菌密码子的偏好性。结果表明:UUU、UUA、CUU、AUU、GUU、GUA、UCU、UCA、AGU、AGC等28个密码子为多杀性巴氏杆菌的偏好性密码子。
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关键词
多杀性巴氏杆菌
遗传密码子
偏好性
原文传递
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
张亮
王帅帅
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
机构
山西农业大学动物科技学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期1300-1305,共6页
基金
山西省科技攻关项目(20100312016)
文摘
旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。
关键词
MARC-145细胞
外泌体
PRRSV粒子
速率区带离心
免疫磁珠
Keywords
MARC-145 cells
exosomes
PRRSV particles
rate-zonal centrifugation
immune magnetic
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测
被引量:
1
2
作者
繁萍
张瑞强
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
机构
青海大学农牧学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第16期8918-8921,共4页
基金
青海大学高层次人才项目(2008-QGC-7)
文摘
[目的]初步预测牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构特点。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条OmpH基因相似性在84%~99%间;OmpH蛋白序列中存在信号肽,切割位点在第20号和21号氨基酸残基之间;OmpH蛋白二级结构预测中,折叠结构占49.8%,环状结构占50.2%;推测OmpH蛋白有7个O型糖基化位点,分别是位于第2、45、48、330、716、721、723号位的氨基酸残基,2个N型糖基化位点,即第15和35号位的氨基酸残基。[结论]该蛋白可能存在于细胞菌膜的外侧,而非跨膜蛋白。
关键词
PmC47-8株
OmpH蛋白结构
预测
Keywords
PmC47-8 strain
OmpH protein structure
Prediction
分类号
S188.1 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测(英文)
3
作者
繁萍
张瑞强
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
机构
青海大学农牧学院
出处
《Agricultural Science & Technology》
CAS
2012年第6期1186-1189,1206,共5页
基金
Supported by the Project for High-level Talents of Qinghai University (2008-QGC-7)~~
文摘
[目的]对牦牛源多杀性巴氏杆菌C47-8株(PmC47-8)OmpH蛋白结构进行初步预测。[方法]对PmC47-8型菌株OmpH基因的测序结果进行在线BLAST比对、信号肽预测、二级结构预测及蛋白特性等方面的分析。[结果]PmC47-8株OmpH基因与已公布的81条OmpH基因相似性在84%~99%间;OmpH蛋白序列中存在信号肽,切割位点在第20号和21号氨基酸残基之间;OmpH蛋白二级结构预测中,折叠结构占49.8%,环状结构占50.2%;推测OmpH蛋白有7个O型糖基化位点,分别是位于第2、45、48、330、716、721、723号位的氨基酸残基,2个N型糖基化位点,即第15和35号位的氨基酸残基。[结论]该研究为牦牛源OmpH基因的免疫研究奠定基础。
关键词
PmC47-8
株
OmpH
蛋白结构
预测
Keywords
PmC47-8 strain
OmpH protein structure
Prediction
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性初步分析
4
作者
张瑞强
繁萍
丰琳琅
张卫
陈忍霞
机构
青海大学农牧学院
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第5期114-116,共3页
基金
青海大学高层次人才项目(2008-QGC-7)
文摘
为了研究多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性,试验以GenBank中登录的27条多杀性巴氏杆菌功能基因的CDS序列为材料,利用CodonW软件初步分析了多杀性巴氏杆菌密码子的偏好性。结果表明:UUU、UUA、CUU、AUU、GUU、GUA、UCU、UCA、AGU、AGC等28个密码子为多杀性巴氏杆菌的偏好性密码子。
关键词
多杀性巴氏杆菌
遗传密码子
偏好性
分类号
S852.615 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定
张亮
王帅帅
陈忍霞
陶佳丽
范阔海
段马魁
扆妍妍
姜俊兵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
下载PDF
职称材料
2
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测
繁萍
张瑞强
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
《安徽农业科学》
CAS
2012
1
下载PDF
职称材料
3
PmC47-8株OmpH蛋白结构的初步预测(英文)
繁萍
张瑞强
张卫
丰琳琅
陈忍霞
赵静
《Agricultural Science & Technology》
CAS
2012
0
下载PDF
职称材料
4
多杀性巴氏杆菌的遗传密码子偏好性初步分析
张瑞强
繁萍
丰琳琅
张卫
陈忍霞
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
0
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