广谱降解有机磷农药的真菌酶解研究

从农药污染土壤中分离出的一株真菌具有广谱降解有机磷农药的能力。菌体培养物经硫酸铵分级沉淀、SephadexG＿100凝胶过滤、DEAE＿SephroseCL6B柱层析纯化广谱有机磷农药水解酶。研究结果表明该酶为胞内酶,主要定位在细胞膜上。酶的最适反应温度为45℃,最适pH7 5,在50℃以下以及在pH6～9 5范围内活性稳定。Hg2+、Fe3+、对氯高汞苯甲酸、碘乙酸和N＿乙基马来酰亚胺对该酶有强烈的抑制作用,而Cu2+、巯基乙醇、二硫苏糖醇、二硫赤藓糖醇、谷光甘肽和去污剂对酶有不同程度的激活作用。该酶不仅可以作用于含PO键的有机磷农药;而且也能水解含PS键的有机磷农药。以甲基对硫磷和内吸磷为底物的Km值分别为63μmol L,256μmol L;Vmax分别为306μmol·min-1,189μmol·min-1;Kcat分别为1102s-1,610s-1。

海洋霉菌抗真菌作用的研究I.具广谱抗菌活性的海洋霉菌M182的分离

从中国南海海泥中分离出一株霉菌（编号为Ｍ１８２），经初步鉴定为青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ．）．该菌株所产生的广谱抗生素，对细菌、酵母及丝状真菌均有抑制作用。

米曲霉LY-128广谱有机磷农药水解酶的纯化和鉴定

米曲霉LY-128的培养物经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100 凝胶过滤, DEAE-Sephrose CL-6B 和Sephadex G-100层析手段,获得了电泳纯的广谱有机磷农药水解酶。通过SDS-PAGE 和IEF电泳测得其分子量为62 kDa, 等电点为pH 5.2。该酶的最适反应温度为45℃,最适 pH 6.8, 在50℃以下及pH6.0～9.5 范围内活性稳定。Hg2+、Fe3+、对氯高汞苯甲酸、碘乙酸和N-乙基马来酰亚胺对该酶有强烈的抑制作用,而Cu2+、 巯基乙醇、二硫苏糖醇、二硫赤藓糖醇、谷光甘肽和去污剂对酶有不同程度的激活作用。底物的专一性实验表明,该酶不仅可以作用于含P-O键的有机磷农药;而且也能水解含P-S键的有机磷农药。以甲基对硫磷和内吸磷为底物的Km值分别为52祄ol、236 祄ol; Vmax分别为317祄ol min-1 mg-1、179 祄ol min-1 mg-1;Kcat分别为1152 s-1、650 s-1。