注射异丙肾上腺素建立大鼠心肌肥厚模型

目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清中羟脯氨酸(HYP)含量显著增加。模型组大鼠心肌组织中总超氧化物歧化酶(SOD)含量与对照组相比显著降低,而丙二醛(MDA)含量明显升高。结论皮下注射异丙肾上腺素14 d,可成功诱导大鼠心肌肥厚模型,为深入研究心肌肥厚的确切机制奠定基础。

钙调蛋白N_2和C_2突变体载体的构建、表达纯化和鉴定

目的构建钙调蛋白(CaM)N_2和C_2突变体的表达性载体,表达纯化并进行活性鉴定,为进一步研究CaM与钙通道片段的相互作用奠定基础。方法将CaM的N-lobe和C-lobe的cDNA分别与相应的N-lobe和C-lobe的cDNA相连,制备N_2和C_2突变体的cDNA。将N_2和C_2的cDNA分别插入p GEX-6p-3载体,并将重组质粒转入E.coli BL21菌株,IPTG诱导转化成功的菌株表达GST融合蛋白,超声破碎法提取,GS-4B beads纯化,SDS-PAGE电泳鉴定目的蛋白相对分子质量及纯度,pull-down实验鉴定活性。结果酶切鉴定以及DNA测序结果证实重组质粒构建成功;SDS-PAGE电泳图显示突变体蛋白纯度和浓度均较高;pulldown实验结果证明突变体蛋白有生理活性,能与钙通道片段结合。结论本研究成功构建了N_2和C_2表达质粒,并提取、纯化了有活性的钙调蛋白N_2和C_2突变体。

抗新型冠状病毒药物的研究进展

新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID-19)具有很强的传染性和很高的致病率。目前,对于新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)尚没有特异性的抗病毒药物,临床上根据以往抗冠状病毒用药经验以及“老药新用”原则,应用现有药物进行治疗。本文根据抗冠状病毒药物的作用机制,对临床正在使用和具有潜在抗SARS-CoV-2作用的药物及在研化合物进行综述,以期为COVID-19治疗的合理用药及抗SARS-CoV-2的新药研发提供理论依据及新思路。

钙稳态和自噬在心肌肥厚中作用的研究进展

心肌肥厚指心脏在各种因素作用下出现的心肌质量和体积的增加。生理性心肌肥厚可以转变为病理性心肌肥厚,最终导致心力衰竭和心源性猝死。心肌肥厚病理因素较为复杂,钙稳态和自噬在心肌肥厚的发生发展中起着重要作用。钙信号主要包括钙离子/钙调蛋白/钙调素依赖蛋白激酶II/肌细胞增强因子-2(Ca2+/CaM/CaMKⅡ/MEF-2)和钙离子/钙调蛋白/钙调素依赖蛋白激酶II/钙调神经磷酸酶/活化T细胞核因子(Ca2+/CaM/CaMKⅡ/CaN/NFAT)两条通路,同时钙稳态与自噬两种途径也互相调节。本文对钙稳态和自噬在心肌肥厚中的作用作一综述。

双酚A心脏毒性的研究进展

双酚A(Bisphenol-A,BPA)被公认为环境激素干扰化合物,能够通过与ERβ受体结合激活相关化学转导途径造成女性快速心律失常,作用于多种离子通道影响心肌动作电位和兴奋-收缩偶联,导致心肌触发活动异常和心律失常。同时,BPA及其代谢产物能够通过氧化应激反应损伤心肌细胞。了解BPA致心脏毒性的作用机制具有重要的临床意义。因此,本文对双酚A心脏毒性的作用机制及其对心脏造成的病理和临床表现作一综述。

不同阴道涂片方法的比较及对大鼠动情周期的判断

目的比较棉棒法和灌洗法两种阴道涂片方法的操作及对雌性大鼠动情周期的判断。方法30只雌性SD大鼠,连续每日同一时间使用棉棒法或灌洗法进行阴道分泌物的采集和涂片制作,显微镜下放大40/100/200/400倍进行观察并拍照。结果棉棒法涂片肉眼可见大量脱落细胞,镜下见较多有核上皮细胞,判断为动情前期,大量角化上皮细胞呈落叶状堆积为动情期,涂片清亮和上皮细胞数量较少则为动情后期或间期;棉棒法涂片时白细胞的数量减少,不利于区分判断动情后期或间期,同时难以保证棉棒上的沾取物完整且均匀地涂抹到载玻片上。灌洗法涂片时,镜下观察到大量白细胞为动情后期或间期,与棉棒法相比,各种细胞分布均匀形状保持完整,对周期的判断区分更容易,更准确。结论两种方法均较简单,制作涂片和观察所耗时间短,可快速区分动情周期各阶段,且结果准确实用性强,灌洗法可较好还原阴道细胞学检查中的细胞形态和数量分布,是一种可以判断大鼠动情周期各阶段的良好实验技术。

泛素化和自噬在心肌肥厚中作用的研究新进展

心肌肥厚(cardial hypertrophy)是机体由于长期的血流动力容量负荷过大导致的心肌代偿性变化。长期的心肌肥厚可能最终会导致心力衰竭和心源性猝死。近年来的研究发现,泛素化-蛋白酶体系统(UPS)在调控蛋白降解过程中的功能紊乱与心肌肥厚的发生、发展密切相关;自噬方面的研究也表明,当心肌细胞出现不正常的自噬,也会诱导心肌肥厚的病变。目前心肌肥厚药物对于治疗效果欠佳,探索抑制以至逆转心肌肥厚的新机制和新型治疗药物,是临床面临的重要课题和热点研究方向。