SPAG5在胃癌细胞恶性增殖中的生物学作用

目的在胃癌组织及癌旁组织中分析SPAG5的表达情况,通过干扰SPAG5分析其在胃癌细胞生长中的生物学作用。方法结合TCGA分析,免疫组织化学、免疫荧光染色分析SPAG5及MKi67在胃癌及癌旁组织中的表达模式,利用胃癌细胞AGS和MGC803进行体外细胞生物学实验,分别设置空白对照组和干扰组,采用慢病毒干扰,其中空白对照转染shCtrl,干扰组转染shSPAG5。通过Celigo、MTT和克隆形成实验、凋亡检测分析敲减SPAG5基因后对胃癌细胞生长的影响。结果Proteinatlas数据库、TCGA数据库分析结果发现SPAG5在胃癌中高表达,KM-plot及GEPIA数据库分析SPAG5在肺腺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、膀胱癌中高表达,免疫组化发现SPAG5在胃癌中高表达(P<0.001),免疫组化和免疫荧光共聚焦证明SPAG5与MKi67存在显著相关性(R=0.393,P<0.001)。Real time-PCR及Western blotting结果显示SPAG5在MKN74、BGC823、MGC803、SGC7901和AGS等细胞中表达水平较高(P<0.01)。敲减SPAG5后mRNA和蛋白的表达下降,Celigo、MTT和克隆形成实验结果显示敲减SPAG5抑制胃癌细胞增殖(P<0.01),流式凋亡分析发现敲减SPAG5促进胃癌细胞凋亡(P<0.001)。结论SPAG5和MKi67在胃癌组织中的表达具有相关性,干扰SPAG5基因可以抑制胃癌细胞的增殖。SPAG5与患者预后相关,可能成为胃癌的潜在标志物。

麝香酮抑制低氧下胃癌细胞中HIF-1α以及HK2、VEGF的表达

目的探究麝香酮在低氧状态下对胃癌细胞中缺氧诱导因子1(HIF-1α)以及己糖激酶-2(HK2)、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA和蛋白表达的影响。方法通过CEPIA数据库在线分析HIF-1α、HK2、VEGF在胃癌STAD(Stomach adenocarcinoma)与癌旁组织中的表达情况。利用KM-plotter网站的Log-rank、Breslow检验分析基因表达与胃癌预后的关系。利用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测三种基因的mRNA表达情况。用蛋白质印迹法(Western Blot)分析胃癌HGC27细胞在低氧(由CoCl_(2)形成)时,麝香酮对HIF-1α、VECF、HK2 mRNA和蛋白表达的影响。结果HIF-1α和HK2在胃癌组织呈现高表达(P<0.01),预后评估提示VECF为胃癌风险基因(P<0.05),与胃癌患者预后不良相关。qRT-PCR结果显示,用麝香酮干预低氧状态下的HGC27细胞8h后,VECF的mRNA表达量下调,24h后,HIF-1α、HK2的mRNA表达量下调;WesternBlot结果显示,用麝香酮干预低氧状态下的HCC27细胞24h后,HIF-1α蛋白表达量降低(P<0.05)。结论麝香酮可能对低氧状态下的HIF-1α、HK2和VECF的mRNA和蛋白表达产生抑制作用.

基于网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式反应法探讨鬼臼毒素对胃癌的作用机制

目的利用网络药理学和实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)法研究鬼臼毒素对胃癌的作用机制。方法利用TCMSP、Pubchem、Swiss Target Prediction、Similarity ensemble approach、Pharmapper数据库预测鬼臼毒素作用于胃癌的潜在靶标,通过蛋白互作网络和富集分析法找到关键节点和作用的主要通路,并采用qRT-PCR实验验证潜在靶基因。结果通过查询多个数据库筛选获得15个胃癌特征基因(可能为鬼臼毒素的潜在靶标)。PPI网络图谱进一步显示,15个基因所对应的蛋白是鬼臼毒素作用于胃癌的关键靶标。通过GO富集分析和KEGG通路富集分析确定PI3K/AKT通路为主要作用通路。通过qRT-PCR验证发现,鬼臼毒素可以抑制与PI3K/AKT信号通路相关基因(CCND1、TP53、MET、RELA、EGFR、BCL2L1、IGF1R)的表达。结论鬼臼毒素可能通过PI3K/AKT信号通路发挥抗胃癌细胞生长的作用。

NF2、EZR和p53基因甲基化与青海汉族、撒拉族、回族胃癌易感关系

目的 探讨NF2、EZR和p53基因甲基化与青海汉族、撒拉族、回族胃癌易感关系。方法 采用亚硫酸氢盐亚克隆测序法检测青海地区汉族、撒拉族、回族胃癌组织(各30例)、正常胃组织(各20例)中NF2、EZR、p53基因的甲基化程度。结果 NF2、EZR和p53基因在青海汉族、撒拉族、回族胃癌组织中的甲基化程度均高于其正常胃组织(P<0.05),NF2、EZR和p53基因甲基化程度在三个民族胃癌中无差异性。结论 青海地区汉族、撒拉族、回族NF2、EZR和p53基因的甲基化与胃癌易感性有关,但无民族差异性。

SNRPA1基因在胃癌中的表达及对胃癌细胞生长的作用

目的观察SNRPA1在胃癌中的表达情况及对胃癌细胞生长的影响。方法通过高通量差异基因增殖筛选技术(High Content Screening,HCS)分析发现,干扰SNRPA1基因可抑制胃癌细胞AGS增殖。利用TCGA数据库分析SNRPA1基因在胃癌中的表达情况。进一步构建SNRPA1慢病毒载体并转染到胃癌细胞系AGS中(shSNRPA1),采用CCK-8技术和克隆形成技术来分析SNRPA1对胃癌细胞生长增殖的影响。结果(1)在胃癌组织中,SNRPA1的表达水平明显高于正常组织,SNRPA1基因在胃癌等组织中呈现高表达(P<0.05);(2)通过细胞生物学实验发现,shSNRPA1组与阴性对照病毒组相比,shSNRPA1组的胃癌细胞AGS的增殖被抑制(P<0.05),由shSNRPA1组胃癌细胞AGS形成的可见集落数量明显少于阴性对照病毒组(P<0.05)。结论SNRPA1在胃癌中高表达;干扰SNRPA1可以抑制胃癌细胞AGS的生长增殖能力和集落形成能力。

工业废水处理技术与参数优化试验

为解决油田工业废水外排污染环境,直接进系统影响正常生产的问题,。在A联合站建设磁分离装置1套对工业废水进行预处理后回收利用,磁分离装置处理工艺在Q厂均属于试验阶段,目前没有成熟经验可借鉴,处理药剂、参数及对系统的影响尚不确定,因此为了解决以上问题,验证该工艺污水处理效果,并摸索相关运行参数,开展此药剂投加、排泥参数优化试验。

蒲公英根提取物通过下调Nanos1表达抑制三阴性乳腺癌细胞恶性表型的研究

目的:探究蒲公英根提取物对三阴性乳腺癌(Triple-negative breast cancer, TNBC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。方法:采用CCK-8法检测蒲公英根提取物对MDA-MB-231人乳腺癌细胞及4T1小鼠乳腺癌细胞增殖的抑制作用。通过划痕实验与Transwell侵袭实验检测蒲公英根提取物对两种细胞系迁移及侵袭能力的影响。利用RNA-seq测序分析蒲公英提取物对TNBC转录组的影响,并对Nanos C2HC型锌指蛋白1(Nanos C2HC-type zinc finger 1,Nanos1)的表达及患者预后进行分析。结果:与空白对照组相比,蒲公英根提取物组细胞增殖能力降低,迁移距离降低,侵袭数量下降(P<0.01);蒲公英根提取物组细胞Nanos1表达下调(P<0.01),且Nanos1的低表达与乳腺癌患者生存时间呈正相关(P<0.01)。结论:蒲公英根提取物通过下调Nanos1的表达抑制TNBC细胞增殖、迁移及侵袭能力。

珍惜每一天

近来对植物特别钟情．便购得郁金香、风信子、观音莲、文竹若干。因缺少经验．请奶奶帮忙栽培。