慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血浆8-OHdG表达水平及临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血浆8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)的表达水平及临床意义。方法选取2015年9月至2016年8月于我院呼吸内科就诊的121例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者作为急性加重期组,28例稳定期患者作为稳定期组,同期选取20例健康体检者作为健康对照组。检测各组受试者血浆8-OHd G、中性粒细胞CD64指数(CD64指数)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)表达水平,观察急性加重期组各指标在不同GOLD分级水平变化,并分析8-OHd G表达水平与CAT评分之间的相关性。结果急性加重期组患者血浆8-OHd G、CD64指数、PCT、CRP水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与稳定期组相比,急性加重期组患者血浆8-OHd G、PCT水平显著升高(P<0.05)。急性加重期组GOLDⅢ、Ⅳ级患者血浆8-OHd G、CD64指数、PCT、CRP水平明显高于GOLDⅠ级患者,GOLDⅣ级患者血浆8-OHd G、CD64指数、CRP水平显著高于GOLDⅡ级患者(P<0.05)。急性加重期组血浆8-OHd G水平与CAT评分呈正相关(r=0.419,P<0.01)。结论 8-OHd G可用于AECOPD患者的辅助诊断,其水平的高低与患者病情严重程度及生活质量具有一定相关性。

栀子苷对RAW264.7细胞胞饮和噬菌功能双向调节作用的初步观察

目的:研究栀子苷对巨噬细胞系RAW264.7细胞活性和内吞功能的影响。方法:采用CCK-8法判定在不同浓度、不同时间下栀子苷对RAW264.7细胞增殖的影响;根据CCK-8检测结果,挑选适宜浓度栀子苷与RAW264.7细胞共孵育24 h后,检测RAW264.7细胞对中性红溶液的胞饮活性;进一步以2 mg/mL栀子苷与RAW264.7细胞共孵育后,检测RAW264.7细胞对铜绿假单胞菌的吞噬活性及胞内细菌存活情况。结果:栀子苷的细胞毒性小,在0~8 mg/mL浓度内对RAW264.7细胞的增殖无明显影响;2 mg/mL的栀子苷与细胞共孵育24 h后可明显促进静息状态下RAW264.7细胞的胞饮活性;2 mg/mL的栀子苷抑制RAW264.7细胞对铜绿假单胞菌的吞噬及胞内杀菌作用。结论:栀子苷对RAW264.7细胞的胞饮和噬菌功能具有双向调节作用。

鲍曼不动杆菌TonB蛋白多表位的构建与筛选

目的:构建和筛选鲍曼不动杆菌TonB蛋白抗原的B细胞、T细胞表位。方法:运用生物信息学软件预测TonB蛋白的小鼠B细胞及T细胞表位并人工合成相应肽段;构建重组质粒p ET28a-tonB并原核表达、纯化获得TonB蛋白;分3次以TonB蛋白在皮下免疫BALB/c小鼠,5周后收集小鼠血清并分离小鼠脾脏细胞;间接ELISA法检测小鼠血清中B细胞表位抗体水平,双抗体夹心ELISA法检测经候选T细胞表位体外刺激后脾细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)量。结果:构建候选B细胞和T细胞表位各4条,分别为PB1、PB2、PB3、PB4和PT1、PT2、PT3、PT4;间接ELISA结果显示,PB3及PB4与TonB蛋白免疫组小鼠血清发生反应,其吸光度值与对照组相比显著升高(P<0.05);双抗体夹心ELISA结果显示,PT2、PT3及PT4刺激免疫组小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ量与对照组相比显著升高(P<0.05)。结论:成功构建并筛选出鲍曼不动杆菌TonB蛋白的2个B细胞表位PB3及PB4,3个T细胞表位PT2、PT3及PT4。

成都18号线行车组织方案研究

以成都18号线为工程背景,主要研究了在快慢车行车组织设计中,关于列车停站方案、系统能力损失、列车运行交路、越行站配线的设计理论,并将该理论应用到成都18号线的行车组织设计实践中去,以期为类似工程项目的设计和实施提供参考。

铜绿假单胞菌毒力因子的研究进展

铜绿假单胞菌（PA）是医院内感染最常见革兰阴性菌之一。PA分泌多种毒力因子，包括绿脓菌素、弹性蛋白酶、Ⅲ型分泌系统的毒力因子等。群体感应系统和生物膜也在PA的致病过程中发挥重要的作用。该文主要将近年来与PA毒力因子有关的研究进展作一简要综述。

重组铜绿假单胞菌分泌蛋白PA3611诱导支气管上皮细胞-间充质转化的初步观察

目的 探讨重组蛋白PA3611能否在体外使大鼠支气管上皮细胞发生上皮-间充质转化（EMT）.方法 通过DNA合成、基因扩增、载体构建、诱导表达、纯化等过程制备重组蛋白PA3611;利用CCK-8法检测PA3611刺激对支气管上皮细胞增殖的影响;镜下观察经PA3611作用后支气管上皮细胞的形态学变化;运用Western blot法和qPCR法检测支气管上皮细胞细胞E-钙粘蛋白（E-CAD）与 α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达水平.结果 DNA测序证实成功制备重组蛋白PA3611;重组蛋白PA3611刺激能抑制支气管上皮细胞的增殖（P〈0.05）,诱导其细胞形态学发生EMT变化,抑制E-CAD表达及促进α-SMA的表达（P〈0.05）.结论 重组铜绿假单胞菌分泌蛋白PA3611可以诱导大鼠支气管上皮细胞发生EMT,其具体机制值得进一步深入探讨.

城市轨道交通潮汐客流与运能匹配的多交路运输组织方案研究

城市轨道交通网络中的客流存在着规律性的动态变化,其中最为明显且突出的是由于居民通勤通学的出行需求所带来的潮汐交通现象。在潮汐交通现象较为明显的线路中,客流存在着时间与空间上的不均衡分布,使得部分区间的运能未得到充分利用或者部分区间的运能紧张。据此,本文以成都地铁1号线为例,针对其潮汐客流特征展开研究,识别运能不足或运能过剩的区间,并建立多目标优化模型求解出针对具体线路的多交路运输组织优化方案,最后对优化方案的效果做出评价。

宜宾市利用既有铁路开行市域列车方案

宜宾市作为内昆铁路的主要枢纽节点,具备较好的既有普速铁路资源,且同时面临过江通道能力紧张、城市道路交通拥堵的问题。因此,本文选择宜宾市为研究对象,提出内昆铁路及宜珙支线的改建思路和方案,制定契合宜宾市域客流出行特点的市域列车开行方案。本文研究内容具有一定普适性,为同类型中小城市发展市域郊铁路提供思路。

鲍曼不动杆菌外膜蛋白OMP33-36抗原多表位的构建与筛选

目的筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白（outermembraneprotein33×103～36×103，OMP33-36）抗原的B细胞、T细胞表位。方法运用生物信息学软件预测OMP33-36蛋白分子小鼠B细胞及T细胞表位并人工合成相应肽段；构建重组质粒pET-30a—OMP33-36并原核表达、纯化获得OMP。。蛋白；以OMP33-36蛋白免疫BALB／c小鼠，5周后收集小鼠血清并分离小鼠脾脏细胞。间接ELISA法检测小鼠血清中B细胞表位抗体水平，双夹心ELISA法检测经候选T细胞表位体外刺激后脾细胞分泌IFN-γ量。结果构建候选B细胞和T细胞表位各3条，分别为PBl、PB2、PB3，PT1、FF2、PT3；间接ELISA结果显示，PB1及PB2与OMP33-36蛋白免疫组小鼠血清发生反应，其A450值与对照组相比显著升高（P〈0．05）；双夹心ELISA结果显示，PT3刺激免疫组小鼠脾脏细胞产生的IFN．-γ量与对照组相比显著升高（P〈0．05）。结论成功构建并筛选出鲍曼不动杆菌OMP33-36蛋白的2个B细胞表位PBl及PB2，1个T细胞表位PT3。

慢慢放手

编者推荐:最后两个自然段拓展文义,要言不烦。此文可变格用于2008年高考湖北卷标题作文"举手投足"之间:略写"古旧的楼房";详写"轻轻地拉开门,转身,慢慢地放手"。

噬菌体介导的结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株的构建及其毒力初步研究

目的利用分枝杆菌噬菌体重组系统构建结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株，体内感染小鼠肺组织，观察Rυ2346c基因的毒力，从而探讨结核分枝杆菌Rυ2346c基因功能。方法构建同源交换位点，随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组，获得噬菌粒，将噬菌粒导人耻垢分枝杆菌，获得整合有同源交换位点的重组噬菌体，经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体，对结核分枝杆菌进行转染，将转染后的结核分枝杆菌涂布到潮霉素抗性的固体培养基，37℃培养4周，挑取单克隆，通过PCR验证基因敲除成功，将野生株（wildtype，wT）及敲除株（knockout，KO）结核分枝杆菌感染C57BL／6J小鼠肺组织，6～8周后观察小鼠死亡率、小鼠肺组织炎性反应程度及肺组织结核分枝杆菌体外培养菌落形成数。两组间比较采用配对t检验，率的比较采用X2检验。结果经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符，且为所需目的基因片段，成功切除靶片段，体内感染小鼠6～8周，KO株感染小鼠肺组织后，体外菌落形成数明显低于WT株感染（15．0±0．8比90．0±1．5，t=23．0361，P〈0．05），小鼠肺组织炎性反应程度明显轻于wT株感染（1040±89比1960±56，t=7．1016，P〈0．05），其小鼠总死亡率明显低于wT株感染（53％比20％，3（X2=6．1112，P〈0．05）。结论成功构建了噬菌体介导的结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株，为Rυ2346c基因功能的研究奠定了基础。