鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW保护性表位的预测与验证

目的构建和筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW的B细胞和T细胞表位。方法运用生物信息学软件预测OmpW的小鼠B细胞及T细胞表位并合成相应肽段;构建重组质粒pET28a-ompW并原核表达、纯化获得OmpW蛋白;以OmpW蛋白皮下免疫BALB/c小鼠,2周免疫1次,共3次。第3次免疫后1周,收集小鼠血清、分离小鼠脾细胞培养。分别用OmpW蛋白及不同的T细胞表位肽刺激脾细胞,72 h后收集脾细胞上清。间接ELISA法检测小鼠血清中的特异性IgG抗体水平,双抗夹心ELISA法检测脾细胞上清液中IFN-γ浓度。结果筛选并构建了5个B细胞表位及4个T细胞表位,B细胞表位分别是OmpW B1、OmpW B2、OmpW B3、OmpW B4、OmpW B5,T细胞表位分别是OmpW T1、OmpW T2、OmpW T3、OmpW T4;间接ELISA法检测结果显示,OmpW B1和OmpW B5能够与OmpW全长蛋白质免疫小鼠的血清发生抗原抗体反应,其A450值与对照组相比显著升高(P<0.001);双抗夹心ELISA法结果显示OmpW T4表位刺激的脾细胞上清中的IFN-γ浓度最高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论成功构建并筛选出OmpW蛋白的两个B细胞表位OmpW B1及OmpW B5和一个T细胞表位OmpW T4。

克柔念珠菌感染致脓胸一例并文献复习

目的提高对克柔念珠菌感染所致脓胸相关特征、诊疗方法及预后的认识。方法回顾性分析南京医科大学第二附属医院2022年7月收治的1例克柔念珠菌感染致脓胸患者的临床资料,并检索国内外相关文献,对该病的发病、临床特征及诊疗进行探讨。结果本例患者有长期吸毒及支气管哮喘病史,入院初期存在严重低蛋白血症,克柔念珠菌脓胸诊断明确后,胸腔引流同时先后给予米卡芬净及伏立康唑治疗,脓胸完全吸收后出院;共检索到克柔念珠菌感染致脓胸病例个案报道文献6篇共计8例患者,其中食道穿孔患者4例、食管-气管瘘形成患者2例、心脏移植术后患者1例、动脉导管封堵术后患者1例;本例患者病程中伴支气管-胸膜瘘;本例及文献报道8例患者初始临床表现皆为咳嗽、咯痰、呼吸困难,脓胸病原学诊断均为常规培养;文献报道8例患者中死亡4例,1例使用两性霉素B、2例使用伏立康唑、1例使用棘白霉素类联合伏立康唑抗真菌治疗,存活4例患者中1例单独使用棘白霉素类、3例使用棘白霉素类联合伏立康唑抗真菌治疗。结论本例克柔念珠菌感染所致脓胸系国内首次报道;该病多见于食管-气管瘘形成及手术创伤后,其临床表现无特征性;确诊后使用棘白霉素类或联合三唑类伏立康唑治疗有助于提高其存活。

支气管肺泡灌洗液高通量测序技术在成人肺部感染中的应用价值

目的评估支气管肺泡灌洗液(BALF)高通量测序技术在肺部感染病原学诊断中的价值及对患者预后的影响。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of science、clinical trials.gov.cn、中国知网、万方数据库和中国生物医学文献数据库,检索时间为自建库时间至2021年12月8日。比较BALF宏基因组测序与传统病原学检测方法对肺部感染检测的阳性率、敏感度及特异度;根据病原学检测结果调整治疗方案,比较2组患者的抗生素使用强度、住院时长、28/30 d及90 d病死率。采用Review Manager 5.4.1软件对上述指标分别进行meta分析。结果最终纳入35篇文献,共2624例患者,其中高通量测序组2248例,传统病原学检测组2493例。meta分析结果显示,高通量测序组阳性率为79.8%(1793/2248),高于传统病原学检测组41.7%(1039/2493)(OR=6.84,95%CI:4.84~9.67,Z=10.88,P<0.001);敏感度、特异度及汇总受试者工作特征曲线下面积均高于传统病原学检测组。9篇论文纳入的患者为重症肺炎患者,亚组分析结果示,重症肺炎患者BALF高通量测序阳性率为85.8%(495/577),高于传统病原学检测组42.9%(282/657)(OR=6.52,95%CI:4.04~10.52,Z=7.69,P<0.001)。根据病原检测结果调整治疗方案,与传统病原学检测组相比,高通量测序组患者抗生素使用强度降低(SMD=-40.04,95%CI:-47.05~-33.03,Z=11.19,P<0.001);平均住院时长缩短(SMD=-4.68,95%CI:-6.12~-3.25,Z=6.40,P<0.001)。高通量测序组28/30 d及90 d病死率分别为9.09%和12.82%,均低于传统检测组26.44%(OR=0.26,95%CI:0.13~0.51,Z=3.89,P<0.001)和38.30%(OR=0.21,95%CI:0.07~0.66,Z=2.67,P=0.008)。结论与传统病原学诊断方法相比,BALF高通量测序对肺部感染具有更高的诊断价值。根据BALF高通量测序结果调整治疗方案,可降低患者的抗生素使用强度,缩短住院时间,降低病死率,改善患者预后。

在莎翁故乡演“莎戏”

2018年7月,我和伙伴们飞赴英国,作为上海外国语大学艺术团的学生代表参加当年8月举行的爱丁堡国际艺术节,并在伦敦参加戏剧游学活动。在为期两周的戏剧交流活动中,我们在爱丁堡的小剧场演绎了自己的原创短剧作品,在伦敦西区的大剧院欣赏了高水准的戏剧演出,还与来自世界各地的艺术家和青年人密切交流。